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1、目的:研究還氧合酶(cyclooxygenase,COX)抑制劑對(duì)在胃癌上清液中培養(yǎng)的樹(shù)突狀細(xì)胞(dendriticcell,DC)分化成熟和功能的影響。 方法: 1、胃癌細(xì)胞HCG-7901上清液提取 設(shè)A、B、C三組,A組不加干擾因素作為對(duì)照組,B、C組分別加入吲哚美辛、塞內(nèi)昔布,與胃癌細(xì)胞HCG7901共培養(yǎng)24小時(shí)后分別提取其上清液。 2、健康成人外周血DC體外誘導(dǎo)和生物學(xué)特征觀察 從健康
2、成人外周血分離DC前體細(xì)胞(即單核細(xì)胞),按比例分別加入上三組上清液,D組加入RPMll640完全培養(yǎng)基作為空白組。四組在重組人粒細(xì)胞.巨噬細(xì)胞集落刺激因子(rhGM-CSF)和重組人白細(xì)胞介素(rhlL-4)作用下共培養(yǎng)14天聯(lián)合誘導(dǎo)擴(kuò)增出DC. 3、用流式細(xì)胞儀檢測(cè)DC表面分子的表達(dá)。 4、用3H-TdR摻入法測(cè)定胃癌細(xì)胞裂解物致敏的DC刺激同種T淋巴細(xì)胞增殖效應(yīng)。 結(jié)果: 1、成人外周血分離DC前體
3、細(xì)胞在rhGM-CSF和rhlL-4的誘導(dǎo)下,分化為典型的DC,并具有較強(qiáng)的抗原提呈功能。 2、源于胃癌細(xì)胞的上清液能顯著地抑制DC的分化成熟并使DC刺激同種T淋巴細(xì)胞增殖的功能減退。 3、COX抑制劑能明顯地改善胃癌細(xì)胞對(duì)DC的上述抑制效應(yīng)。 4、COX的非選擇性抑制劑吲哚美辛和COX-2選擇性抑制劑塞內(nèi)昔布后,在阻斷胃癌細(xì)胞對(duì)DC的抑制效應(yīng)方面沒(méi)有差異。 結(jié)論: 源于胃癌細(xì)胞的上清液抑制了DC
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