巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子在宮頸癌細(xì)胞株中的表達(dá)及促進(jìn)宮頸癌侵襲與轉(zhuǎn)移的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、宮頸癌是全球發(fā)病率居第二位的女性惡性腫瘤，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是宮頸癌的主要轉(zhuǎn)移途徑。本課題組前期對(duì)早期宮頸鱗癌(SCC)進(jìn)行了cDNA基因芯片篩查，結(jié)果表明巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(macrophage migration inhibitory factor，MIF)在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移宮頸癌組織中的表達(dá)較無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移宮頸癌組織高3.4倍，推測(cè)其可能在早期宮頸癌的浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移中起重要作用。
　　 目的：為了進(jìn)一步闡明MIF對(duì)宮頸癌生物學(xué)行為的影響，

2、探討其參與宮頸癌發(fā)生發(fā)展的作用機(jī)制，以期為宮頸癌的診治提供理論依據(jù)，為宮頸癌的個(gè)性化治療尋找一條新的途徑。
　　 方法:首先，利用Boyden小室趨化實(shí)驗(yàn)檢測(cè)在人重組MIF刺激作用下三種宮頸癌細(xì)胞(Caski、C33a、siha)的趨化情況，研究外源性的MIF在宮頸癌浸潤(rùn)中的作用，并檢測(cè)出最佳刺激值，以便下一步實(shí)驗(yàn)的干預(yù)處理。
　　 其次，采用細(xì)胞免疫化學(xué)法檢測(cè)MIF、ERK、MMP-9/2在三種宮頸癌細(xì)胞中的表達(dá)。檢測(cè)

3、三種不同宮頸癌細(xì)胞中不同因子的表達(dá)情況。并用人重組MIF和MIF的抑制劑ISO-1進(jìn)行干預(yù)后用細(xì)胞免疫化學(xué)法探討MIF與宮頸癌浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移、血管生成的關(guān)系。
　　 最后，利用ELISA、western-blot等方法檢測(cè)宮頸癌細(xì)胞上清液以及人重組MIF、ISO-1干預(yù)前后MIF、ERK、MMP-9/2在三種宮頸癌細(xì)胞中的表達(dá)，探討MIF與宮頸癌浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移關(guān)系的機(jī)制。
　　 結(jié)果：MIF、ERK、MMP-9/2在宮頸癌細(xì)胞中都表

4、達(dá)，但人重組MIF刺激后表達(dá)明顯增強(qiáng)，ISO-1作用后表達(dá)明顯降低。推測(cè)MIF可以促進(jìn)宮頸癌的血管生成及浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移。體外實(shí)驗(yàn)表明外源性的MIF可以促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞的遷移力，且具有促進(jìn)體外血管形成的作用。
　　 結(jié)論：MIF可能通過(guò)促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞的增生、遷移及促進(jìn)宮頸癌的血管生成等機(jī)制促進(jìn)宮頸癌的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移，部分是通過(guò)增強(qiáng)MMP-9的活性發(fā)揮作用的。也可能和參與MAPK通路有關(guān)，但其確切的機(jī)制還有待進(jìn)一步的深入研究，針對(duì)MIF在宮頸癌浸