大鼠頜下腺腺病毒介導熒光素酶基因轉(zhuǎn)導后基因表達及組織結(jié)構(gòu)的研究.pdf

1、該研究目的是通過將腺病毒介導的熒光素酶基因轉(zhuǎn)導至Wistar大鼠頜下腺,建立涎腺基因轉(zhuǎn)導的方法并探討基因表達規(guī)律及轉(zhuǎn)導后腺體組織結(jié)構(gòu)的變化,從而為今后涎腺疾病的基因治療打基礎.該研究主要分為兩大部分1.基因轉(zhuǎn)導的研究 材料和方法：取正常健康純系、8～10周的Wistar大鼠40只.所有的動物通過肌注3﹪戊巴比妥（1mg/kg）麻醉.在病毒感染前肌注阿托品（0.5mg/kg）目的是減少唾液的流率.病毒懸浮于稀釋的緩沖液,用塑料軟管插入頜下

2、腺導管約5mm深,按轉(zhuǎn)導熒光素酶基因后3天、1周、2周、1個月及2個月將40只動物隨機分為5組,每組8只.每組中3只導入10<'8>pfu的AdCMVLuc/50ul/腺體,同時肌注地塞米松,按1mg/每只/天,連續(xù)注射3天;3只導入10<'8>pfu AdCMVLuc/50ul/腺體,不肌注地塞米松;2只導入病毒稀釋緩沖液50ul作為對照組.在不時點取大鼠頜下腺檢測熒光素酶活性.2.基因轉(zhuǎn)導后腺體組織結(jié)構(gòu)和超微結(jié)構(gòu)變化.材料和方法：同

3、前一部分大鼠,基因轉(zhuǎn)導后在取頜下腺檢測熒光素酶的同時取頜下腺進行組織病理及超微病理觀察.結(jié)論：腺病毒介導的熒光素酶基因能成功轉(zhuǎn)導至Wistar大鼠頜下腺并表達,其轉(zhuǎn)導表達隨時間而逐漸減弱,地塞米松能增加腺病毒介導涎腺短期基因表達.腺病毒介導的熒光素酶基因轉(zhuǎn)導引起腺體明顯炎癥反應,基因轉(zhuǎn)導后腺體炎癥反應在兩周內(nèi)最重,4周左右恢復正常.腺病毒介導的熒光素酶基因表達與腺體炎癥反應密切相關.該研究首次研究了大鼠頜下腺基因轉(zhuǎn)導后超微病理變化,發(fā)現(xiàn)