濕地松、火炬松和黑松的組培繁殖技術(shù)研究.pdf

1、濕地松和火炬松具有許多優(yōu)良性狀,然而,松針褐斑病的大面積流行制約了其在中國南方的發(fā)展;黑松作為優(yōu)良的園林綠化和造林樹種,在日本深受歡迎,但卻受到松材線蟲病的嚴重危害.目前,通過抗病選育的方式選出了一批優(yōu)良的濕地松、火炬松和黑松家系并建立了種子園,但抗病種子產(chǎn)量有限,不能滿足生產(chǎn)需要,因此,利用組織培養(yǎng)方式快速擴大繁殖現(xiàn)有的抗性材料具有重要的意義.(1)以成熟胚為外植體誘導不定芽發(fā)生建立了濕地松組織培養(yǎng)再生體系.用含高濃度6-BA的液體培

2、養(yǎng)基處理濕地松成熟胚12~36小時,吸干后轉(zhuǎn)移到無激素的培養(yǎng)基上,一個月后即可誘導產(chǎn)生不定芽.經(jīng)60 mgm 6-BA的液體培養(yǎng)基處理12~24小時后,不定芽誘導頻率及平均每外植體產(chǎn)芽數(shù)達到最高,但芽體較小,在繼代培養(yǎng)基中伸長較慢.經(jīng)30mg/L 6-BA的液體培養(yǎng)基處理12-36小時后,不定芽誘導頻率較低,但不定芽較健壯,在繼代培養(yǎng)基中伸長較快.6-BA濃度大于80mg/L時不利于外植體生長及不定芽的分化.伸長的不定芽在改良1/2GD

3、+NAA0.05mg/L的培養(yǎng)基中培養(yǎng)4周后可形成不定根.(2)以帶子葉頂芽為外植體誘導叢生芽建立了濕地松組織培養(yǎng)的再生體系.誘導培養(yǎng)基中單獨添加細胞分裂素即可誘導濕地松叢生芽的發(fā)生,6-BA效果優(yōu)于KT;培養(yǎng)基中配合使用生長素較單獨使用細胞分裂素效果更理想.基本培養(yǎng)基、6-BA及NAA的濃度、處理時間等對叢生芽誘導有較大影響.在改良GD+6-BA4~5 mg/L+NAA0.05~0.1 mg/L的培養(yǎng)基上培養(yǎng)4~5周,其叢生芽誘導率最

4、高達95％;已分化的叢生芽繼代在無激素或添加活性炭或生長素(NAA或IBA)的GD培養(yǎng)基中伸長較快;叢生芽單個切下繼代培養(yǎng)在改良GD+6-BA3.0 mg/L+NAA0.1 mg/L的培養(yǎng)基上增殖較快.將嫩梢切下置于附加NAA0.05mg/L或IBA2.0 mgm或NAA0.05 mg/L+IBA2.0 mg/L的1/2GD培養(yǎng)基中培養(yǎng)30天后均可形成不定根,生根率分別為53.3％、51.6％、64.7％.再生植株移栽成活率達85％.(

5、3)采用帶子葉頂芽為外植體建立了黑松、火炬松組織培養(yǎng)的再生體系.較適合黑松叢生芽誘導的培養(yǎng)基為改良GD+6-BA4~5 mgm+NAA0.1 mg/L,誘導率在90％左右.火炬松在改良GD+6-BA4 mg/L+NAA0.02 mgm的培養(yǎng)基中誘導率較高(86.7％).改良GD培養(yǎng)基中添加活性炭或微量生長素明顯促進火炬松的伸長,對黑松叢生芽則無促進作用.較適合黑松叢生芽伸長的培養(yǎng)基為無激素的改良GD培養(yǎng)基,但其伸長速率比火炬松、濕地松低