miR-205對卵巢癌細胞生物學行為的影響.pdf

1、中圖分類號墅魚UDC6lO碩士學位論文學校代碼!Q三三密級監(jiān)IntR205對籮日巢癌細胞生物學行為的影響EffectofmiR一205onBiologicalBehaviorinOvarianCancerCellsl5ancerells作者姓名：學科專業(yè)：研究方向：學院(系所)：指導教師：論文答辯日期型竺：篁：塑李龍基礎醫(yī)學病理學與病理生理學基礎醫(yī)學院吳曉英教授答辯委員會主席塹中南大學二O一四年五月miR205對卵巢癌細胞生物學行為的影

2、響摘要：背景：卵巢癌是女性生殖系統(tǒng)三大惡性腫瘤之一，在全球女性婦科腫瘤中死亡率位列第二位。由于卵巢癌早期癥狀不明顯，又尚未有有效的腫瘤標記物來進行預警和早期診斷，在進展期卵巢癌患者即使接受治療，絕大部分五年生存率仍低于20％oJ。近年來，關于微小RNA(microRNA，miRNA)調(diào)控基因表達的研究成為腫瘤研究的新熱點。微小RNA是長約19～25nt的單鏈非編碼小分子RNA，它廣泛存在于植物，非脊椎動物和脊椎動物中。miRNA在調(diào)節(jié)細

3、胞分化，細胞周期，細胞凋亡中均發(fā)揮著重要作用。目前有超過900種miRNA在人體中被發(fā)現(xiàn)【2】。miR一205定位于lq322，是一段uccuucauuccaccggagucug編碼的microRNA，在不同種系中呈現(xiàn)高度保守性。miR205作為腫瘤致癌基因或抑制基因取決于特定腫瘤環(huán)境中的靶基因表達?，F(xiàn)已有研究證實在不同的癌細胞株中miR一205發(fā)揮著促進腫瘤或抑制發(fā)生發(fā)展的作用【3】。本課題組前期應用比較蛋白質(zhì)組學研究發(fā)現(xiàn)有兩種差異蛋

4、白Ezrin和LaminA／C與卵巢癌侵襲轉(zhuǎn)移相關。同時，應用生物信息學方法(3個獨立軟件TargetScan、DIANAmiroT、PicTar)分別預測Ezrin、LaminA／C3UTR有結合位點的miRNA，結果3個軟件同時顯示miR一205在Ezrin、LaminA／C的3UTR均有結合位點。由此推測miR一205、差異蛋白Ezrin和LaminA／C間存在著調(diào)控關系，在卵巢癌侵襲轉(zhuǎn)移中發(fā)揮著重要作用。本文旨在探究miR205

5、對卵巢癌細胞增殖、遷移和侵襲能力的影響，以及miR205表達與差異蛋白Ezrin和LaminA／C間的關系。方法：(1)培養(yǎng)人上皮性卵巢癌細胞系HO8910(氐轉(zhuǎn)移株)、HO8910pm(高轉(zhuǎn)移株)、SKOV3(k乇轉(zhuǎn)移株)及SKOV3ip(高轉(zhuǎn)移株)4株配對的細胞系。(2)RealtimePCR檢測miR一205在四株細胞中的本底水平。(3)RealtimePCR檢測瞬時轉(zhuǎn)染miR205mimics／inhibitor后四株細胞中mi