盆底骨骼肌細(xì)胞機(jī)械刺激后肌纖維類型的改變.pdf

1、目的：探討盆底骨骼肌細(xì)胞在受到機(jī)械力刺激情況下Ⅰ型及Ⅱ型肌纖維含量的改變及肌球蛋白重鏈亞型（MHCⅠ、MHCⅡa、MHCⅡb）的改變。
　　方法：選取2012年3月在山西醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院行直腸癌根治術(shù)患者的肛提肌組織,顯微鏡下大體組織標(biāo)本鑒定為肛提肌組織,且無腫瘤浸潤(rùn)。經(jīng)顯微鏡鑒定大體組織標(biāo)本為:鏡下可見骨骼肌的橫紋，可見少量結(jié)締組織。采用兩步消化法及差速貼壁法進(jìn)行原代細(xì)胞培養(yǎng);采用Flexcell-4000細(xì)胞柔性基底拉伸系

2、統(tǒng)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行正弦波的拉伸應(yīng)變加載實(shí)驗(yàn)(頻率為3Hz，加力強(qiáng)度分別為3％、6%)，以未加載力的靜態(tài)細(xì)胞作為對(duì)照組。用ATP酶染色法鑒定并比較（采用面密度及數(shù)密度比較）Ⅰ型和Ⅱ型肌纖維在對(duì)照組和不同受力強(qiáng)度3%、6%，不同受力時(shí)間6小時(shí)、24小時(shí)下含量的改變；用SDS-PAGE凝膠電泳觀察肌球蛋白重鏈亞型（MHCⅠ、MHCⅡa、MHCⅡb）在不同受力條件下的改變。
　　結(jié)果：（1）加力強(qiáng)度為3%、加力時(shí)間為6小時(shí)使Ⅰ型肌纖維的面密度增

3、加(P<0.01),Ⅱ型肌纖維的面密度減少(P<0.05)。(2)加力強(qiáng)度為3%、加力時(shí)間為24小時(shí)及加力強(qiáng)度為6%、加力時(shí)間為6小時(shí)使Ⅰ型肌纖維的面密度減少,Ⅱ型肌纖維的面密度增加(P<0.05)。(3)加力強(qiáng)度為3%、加力時(shí)間為6小時(shí)使肌纖維MHCⅠ%升高,MHCⅡb%降低(P<0.01)；加力強(qiáng)度為3%，加力時(shí)間為24小時(shí)；加力強(qiáng)度為6%，加力時(shí)間為6小時(shí)使肌纖維MHCⅠ%和MHCⅡb%降低,MHCⅡa%升高(P<0.01)。