葛根素對(duì)宮內(nèi)發(fā)育遲緩仔鼠BALP、OPG及RANKL的影響.pdf

1、目的:觀察葛根素對(duì)IUGR仔鼠體重、BALP、OPG、RANKL及骨礦物質(zhì)含量的影響，探討葛根素對(duì)宮內(nèi)發(fā)育遲緩相關(guān)成年期骨質(zhì)疏松癥防治效果及可能機(jī)制。
　　 方法:
　　 1、模型制備:將18只孕鼠隨機(jī)分成:①正常蛋白飼料組(n=6):孕期給予蛋白含量21％的常規(guī)飼料，自由飲水，建立正常出生體重仔鼠組;②低蛋白飼料組(n=12):母鼠孕期給予蛋白含量10％的低蛋白飼料，自由飲水，建立IUGR仔鼠模型。兩組孕鼠哺乳期均給予

2、蛋白含量21％的常規(guī)飼料，自由飲水。
　　 2、分組:按低蛋白飼料組孕鼠分娩先后，將所生仔鼠隨機(jī)分配至IUGR模型組（模型組）、IUGR模型干預(yù)組（干預(yù)組）;正常蛋白飼料喂養(yǎng)孕鼠所生仔鼠為正常出生體重對(duì)照組（正常組）。三組仔鼠哺乳期均母乳喂養(yǎng)，斷乳后均給予蛋白含量21％的常規(guī)飼料，自由飲水。
　　 3、干預(yù):于各組仔鼠生后1周時(shí)，當(dāng)日上午9～10點(diǎn)，干預(yù)組給予葛根素注射液50mg/kg.d，腹部皮下注射，正常組、模型組給

3、予同量滅菌用水腹部皮下注射，連續(xù)干預(yù)2周。
　　 4.標(biāo)本留取:于各組仔鼠1周、3周、8周時(shí)稱取體重、處死后取材，留取血清及右側(cè)脛骨。
　　 5.指標(biāo)檢測(cè):用ELISA法測(cè)定三組仔鼠各個(gè)時(shí)間點(diǎn)血清BALP、OPG與RANKL的水平;用全自動(dòng)血生化分析儀檢測(cè)血清中血鈣、血磷的水平。
　　 6、脛骨礦物質(zhì)含量測(cè)定:于仔鼠1周、3周、8周時(shí)，取右側(cè)脛骨，碳化后稱得干重，灰化后稱得灰重，灰重與干重之比即為脛骨礦物質(zhì)含量。

4、
　　 7、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（(x)±s）表示，多個(gè)樣本均數(shù)間比較采用方差分析，多個(gè)樣本均數(shù)間的兩兩比較采用方差分析中的最小顯著差異法(LSD法)，樣本間率的比較采用卡方檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果:
　　 1、體重比較:出生24小時(shí)內(nèi)，模型組、干預(yù)組仔鼠出生體重低于正常組（P＜0.05）;1周時(shí)，干預(yù)組、模型組仔鼠體重低于正常組

5、（P＜0.05);3周時(shí)，干預(yù)組高于模型組(P＜0.05)，低于正常組(P＜0.05);8周時(shí)，干預(yù)組與正常組之間無顯著差異(P＞0.05)，均高于模型組(P＜0.05)。
　　 2、血清學(xué)指標(biāo)比較:
　　 (1)血鈣、血磷:三組仔鼠各時(shí)間點(diǎn)血鈣、血磷比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 (2)血BALP:1周時(shí)，干預(yù)組、模型組低于正常組(P＜0.05)，干預(yù)組與模型組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05

6、);3周時(shí)，干預(yù)組、模型組血清BALP升高，兩組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，均高于正常組(P＜0.05);8周時(shí)，干預(yù)組血清BALP低于模型組(P＜0.05)，與正常組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 (3)血OPG、RANKL及OPG/RANKL比值比較:1周時(shí)，干預(yù)組、模型組與正常組相比，OPG、OPG/RANKL低于正常組，RANKL高于正常組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，干預(yù)組與模型組血清O

7、PG、RANKL及OPG/RANKL比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 3周時(shí)，干預(yù)組血清OPG與正常組、模型組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，血清RANKL低于模型組與正常組(P＜0.05)，OPG/RANKL比值高于模型組(P＜0.05)，與正常組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);模型組與正常組血清OPG、RANKL及OPG/RANKL比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 8周時(shí)，干預(yù)

8、組血清OPG、OPG/RANKL均高于模型組(P＜0.05)，RANKL低于模型組(P＜0.05)，與正常組比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);模型組血清RANKL高于正常組(P＜0.05)，OPG及OPG/RANKL比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 3、脛骨礦物質(zhì)含量比較:1周時(shí)，干預(yù)組、模型組脛骨礦物質(zhì)含量低于正常組(P＜0.05);3周時(shí)，三組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);8周時(shí)，干預(yù)組與正常組

9、脛骨礦物質(zhì)含量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，均高于模型組（P＜0.05）。
　　 結(jié)論:
　　 1、孕期低蛋白飲食可導(dǎo)致SD仔鼠發(fā)生IUGR。
　　 2、IUGR仔鼠生后出現(xiàn)追趕生長，葛根素可促進(jìn)IUGR仔鼠生后體重增加。
　　 3、IUGR仔鼠生后早期存在高骨轉(zhuǎn)換率，葛根素干預(yù)可降低IUGR仔鼠高骨轉(zhuǎn)換率。
　　 4、葛根素可上調(diào)IUGR仔鼠OPG表達(dá)、下調(diào)RANKL表達(dá)，提高OPG/RAN