三七總皂甙逆轉乳腺癌耐藥細胞MCF-7-ADM耐藥的實驗研究.pdf

1、目的：化療在乳腺癌綜合治療中占有非常重要地位，但由于耐藥的發(fā)生，影響了化療效果，甚至導致化療失敗，影響病人預后。因此，尋找耐藥逆轉劑、提高化療療效是腫瘤臨床急需解決的問題。目前有關逆轉耐藥的研究比較多，現(xiàn)已被證實具有逆轉耐藥活性的藥物有鈣通道阻滯劑、免疫調節(jié)劑、鈣調蛋白拮抗劑等，因療效欠佳、作用靶點單一、毒副作用大等難以應用于臨床。中藥因具有療效確切、多靶點、毒副作用小等優(yōu)點，具有很大的研究價值，所以從中藥中尋找安全有效的耐藥逆轉劑是當

2、今研究的熱點。中藥三七總皂甙具有鈣通道阻滯的活性，以往對三七的研究主要是作為抗凝劑治療心腦血管疾病，本實驗主要研究三七總皂甙(PNS)是否具有逆轉人乳腺癌細胞MCF-7/ADM(耐藥細胞)耐藥的作用。 方法：以四唑鹽比色法(MTT)測定三七總皂甙對MCF-7/S(敏感細胞)及MCF-7/ADM(耐藥細胞)的直接細胞毒作用；并用此法測定阿霉素(ADM)對兩種細胞的毒性作用，并計算出半數(shù)致死量(IC50)和耐藥倍數(shù)；以無細胞

3、毒性濃度的三七總皂甙作為耐藥逆轉劑，用MTT法體外藥敏感實驗觀察其對乳腺癌多藥耐藥細胞株MCF-7/ADM的逆轉作用；用RT-PCR法分別測敏感細胞和三七總皂甙作用后的耐藥細胞表達的多藥耐藥基因MDRl的陽性率；用WESTERN(蛋白印記)法測定敏感細胞和三七總皂甙作用后的耐藥細胞表達多藥耐藥蛋白P-gp的陽性率。 結果：1、三七總皂甙在200ug/ml濃度以下時對兩細胞基本無毒性，為安全有效的逆轉劑量。2、阿霉素敏感細胞和耐藥

4、細胞的半數(shù)抑制濃度(IC50)分別為(0.62±0.03)ug/ml和(25.03±5.37)ug/ml，耐藥倍數(shù)約為40.37倍。3、三七總皂甙能夠增強阿霉素(ADM)對MCF-7/ADM的細胞毒作用，三七總皂甙50、100、200ug/m1分別作用于乳腺癌耐藥細胞48h后，耐藥細胞株的IC50由原來的(25.03±5.37)ug/m1分別降至(17.87±4.27)ug/m1、(13.90±4.63)ug/ml、(11.91±4.6