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文檔簡介
1、第一部分姜黃素對高糖誘導的系膜細胞增殖的作用 目的:探討姜黃素(curcumin)對高糖培養(yǎng)的系膜細胞增殖的作用。 方法:以大鼠系膜細胞(Ratmesangialcell,RMC)為受試對象,將系膜細胞分為7組:①正常對照組NG(5mmol·L-1,D-葡萄糖),②高糖組HG(30mmol·L-1,D-葡萄糖),③HG+6.25μmol·L-1姜黃素組,④HG+12.5μmol·L-1姜黃素組,⑤HG+25μmol·L-
2、1姜黃素組,⑥HG+50μmol·L-1姜黃素組,⑦HG+100μmol·L-1姜黃素組。刺激24小時,倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài),臺盼藍染色確定細胞活性,噻唑藍(MTT)比色法檢測細胞增殖情況。 結果:作用24h后,高糖組系膜細胞增殖活性明顯增強,較正常組相比差異具有顯著性(P<0.05),增殖率為27.0%。6.25μmol·L-1姜黃素至100μmol·L-1姜黃素均能抑制高糖誘導的細胞增殖,24h的抑制率分別為28.6%、
3、32.5%、38.6%、45.0%、53.6%,差異具有顯著性(P<0.05)。倒置顯微鏡下見姜黃素組細胞形態(tài)并無改變。臺盼藍染色,各組活細胞數(shù)均大于95%。 結論:姜黃素能抑制高糖誘導的系膜細胞增殖,并且隨著姜黃素濃度的增大,這種作用逐漸增強。提示姜黃素可通過抑制系膜細胞增殖活化,減少細胞外基質(extracellularmatrix,ECM)和炎性介質釋放,從而阻止糖尿病腎病(diabeticnephropathy,DN)腎
4、小球硬化的發(fā)生發(fā)展。 第二部分姜黃素對高糖誘導的系膜細胞內纖維連接蛋白表達的影響 目的:研究姜黃素對高糖誘導的系膜細胞內纖維連接蛋白(fibronection,FN)表達的影響。 方法:以大鼠系膜細胞(RMC)為受試對象,將系膜細胞分為7組:①正常對照組NG(5mmol·L-1,D-葡萄糖),②高糖組HG(30mmol·L-1,D-葡萄糖),③HG+6.25μmol·L-1姜黃素組,④HG+12.5μmol·L-
5、1姜黃素組,⑤HG+25μmol·L-1姜黃素組,⑥HG+50μmol·L-1姜黃素組,⑦HG+100μmol·L-1姜黃素組。刺激24h后,用Westernblot法測定細胞內纖維連接蛋白蛋白表達水平。 結果:正常組系膜細胞內纖維連接蛋白蛋白僅有微弱表達。高糖組細胞內纖維連接蛋白表達明顯上調,較正常組相比差異具有顯著性(5956±91vs5157±89,P<0.05)。與高糖組相比,6.25μmol·L-1姜黃素組至100μm
6、ol·L-1姜黃素組細胞內纖維連接蛋白蛋白表達均明顯下降,差異均具有顯著性(分別為5611±106vs5956±91,5352±85vs5956±91,4641±90vs5956±91,4197±156vs5956±91,3579±149vs5956±91,P<0.05)。 結論:姜黃素能抑制高糖誘導的系膜細胞內纖維連接蛋白表達,并且隨著姜黃素濃度的增大,這種作用逐漸增強。提示姜黃素可能通過阻抑纖維連接蛋白表達而減少細胞外基質積
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