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1、中國海洋大學(xué)博士學(xué)位論文櫛孔扇貝和牡蠣的遺傳多樣性研究姓名:孔曉瑜申請學(xué)位級別:博士專業(yè):水產(chǎn)養(yǎng)殖指導(dǎo)教師:武云飛20040501櫛孔扇貝和牡蠣的遺傳多樣性研究對櫛孔扇貝和海灣扇貝的線粒體16SrRNA基因片段進(jìn)行了PCR擴(kuò)增,分別得到634bp(AF526247)和542bp(AF526239)長度的堿基序列,其A,T,G,c含量分別為2508%、2965%、2760%和1767%(櫛孔扇貝),2565%、2952%、2731%gU1
2、753%(海灣扇貝)。對位排序結(jié)果表明,兩者的擴(kuò)增片段其長度相差92bp,還有80個核苷酸位點(diǎn)存在轉(zhuǎn)換或顛換,同源性為681%,造成擴(kuò)增片段長度差異的幾個小區(qū)段的缺失/插入出現(xiàn)在擴(kuò)增片段中部約130bp范圍內(nèi)。這表明,分別分布于太平洋西北部沿海和大西洋北部沿海的兩種扇貝在進(jìn)化上分歧較早。用線粒體16SrRNA基因片段研究了櫛孔扇貝大連(DL)、煙臺(YT)、榮成(Rc)、青島(QD)、韓國(SE)和日本(JP)六個群體的遺傳多樣性,并探
3、討了櫛孔扇貝各群體的遺傳結(jié)構(gòu)。所有47個個體中得到了長度為592bp的16SrRNA基因片段序列,把所有個體的16SrRNA基因片段序列用C1USTALX(Thompsoneta11997)進(jìn)行排序?qū)Ρ?,用ARI,EQUIN(Schneidereta1,2000)計算群體特異性、單倍型多樣性(NeiandTajma,1981)和核營酸多樣性(Nei,1987)。分析表明有31個核昔酸變異位點(diǎn),共23個單倍型。單倍型A和B為最常見單倍型,
4、存在于所有群體,其頻率分別為29,8%和17%,基于所有單倍型之間核苷酸歧異的網(wǎng)狀圖表明:大多數(shù)單倍型是互相密切關(guān)聯(lián)的,最常見的單倍型A居于輻射狀網(wǎng)狀圖的中央。許多鄰近的單倍型互相只有一個核苷酸差異,有些單倍型則與A有兩個核苷酸差異。EXACTTEXT單倍型頻率分布分析顯示,在所有樣品中單倍型頻率分布沒有明顯差異(P=O925),而且在所有兩兩群體之間也無明顯差異。分子變異分析表明:絕大多數(shù)(9965%)的遺傳變異是群體內(nèi)的變異。群體間
5、無明顯變異,只有少于2%的變異來源于不同地區(qū)的差異,而且這部分變異不明顯(P=O195)。在各群體的單倍型多樣性、核苷酸多樣性和其他群體多樣性指數(shù)中,sK群體的指數(shù)最大,其次為YT群體。YT群體為中國四個群體中各項(xiàng)值最高的群體,DL為最小。群體問核苷酸分歧最大的各群體對之間的分歧值位于sK和YT之間,最小的出現(xiàn)在DL和JP之間,而這兩群體問的地理距離最大。結(jié)果表明,櫛孔扇貝16SrRNA基因片段顯示出了相當(dāng)程度的變異,雖然16SrRNA
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