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1、目錄中文摘要1英文摘要3符號說明5前言6日U舌材料與方法8結(jié)果21討論25結(jié)論32附圖33參考文獻40綜述45致謝56原創(chuàng)性聲明”57泰山醫(yī)學院碩士學位論文白的檢測。選擇第3天、7天、14天3個時間點倒置相差顯微鏡下觀察細胞生長和分化情況:選取每組3個時問段部分細胞行細胞免疫熒光檢測臍帶問充質(zhì)干細胞nestin,MBP,NF—H表達情況,并采集照片,采集5個非重復視野下蛋白表達陽性的細胞數(shù)與細胞總數(shù),計算蛋白陽性細胞所占百分比。(4)細
2、胞混合培養(yǎng)后細胞nestin,MBP,NF~HmRNA的表達情況。提取3天,7天,14天3個時間點細胞的RNA,行熒光定量PCR術,檢測人臍帶間充質(zhì)干細胞巢蛋白(nestin)、髓磷脂堿性蛋白(ⅧP)與高分子量神經(jīng)絲蛋白(NF—H)各個時間點的表達情況。結(jié)果1大鼠嗅鞘細胞(OECs)和人臍帶間充質(zhì)干細胞(HUC—MSCs)原代培養(yǎng)及純化后,可獲得純度90%以上的細胞。2混合培養(yǎng)后細胞生長狀態(tài)良好,細胞增殖旺盛,兩種細胞混合培養(yǎng)未出現(xiàn)排異
3、反應。3。MTT法結(jié)果顯示,混合培養(yǎng)組OD值明顯高于單一細胞組OD值,差異有顯著統(tǒng)計學意義(尺001)。4細胞免疫熒光染色顯示:實驗組(A組)和陽性對照組(B組)可見陽性染色細胞,A組陽性染色細胞百分率較B組染色陽性細胞百分率要高,差異有統(tǒng)計學意義(P001):C組未見到nestin,MBP,NFH蛋白陽性染色細胞。5熒光定量PCR檢測結(jié)果顯示:實驗組(A組)和陽性對照組(B組)nestin,MBP,NF—H3種蛋白的mRNA均出現(xiàn)表達
4、,且實驗組要比陽性對照組表達高,差異有統(tǒng)計學意義(P001);C組3種神經(jīng)標志物在mRNA水平?jīng)]有出現(xiàn)表達。結(jié)論1大鼠嗅鞘細胞和人臍帶問充質(zhì)干細胞混合培養(yǎng)后,細胞生長狀態(tài)良好,細胞問未見排斥反應。2大鼠嗅鞘細胞和人臍帶問充質(zhì)干細胞混合培養(yǎng)后,細胞總數(shù)明顯較單一細胞組多,細胞的生長增殖明顯加快:3兩種細胞混合培養(yǎng)后,OECs能夠誘導人臍帶間充質(zhì)干細胞(HUC—MSCs)向神經(jīng)細胞方向分化,細胞能夠表達nestin、MBP、NFH3種神經(jīng)細
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