中國(guó)胞囊線蟲屬（Heterodera）主要種群形態(tài)學(xué)及rDNA比較研究.pdf

1、該研究對(duì)不同的大豆胞囊線蟲(Heteroderaglycines)群體和中華異皮線蟲(H.sinensis)、禾谷胞囊線蟲(H.avenae)及寄生于煙草根部的胞囊線蟲等種從形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)兩方面進(jìn)行了比較和分析.通過(guò)制作永久玻片和臨時(shí)玻片,對(duì)一些重要的胞囊線蟲種及種下群體進(jìn)行了詳細(xì)的形態(tài)學(xué)觀察,通過(guò)掃描電鏡觀察了二齡幼蟲唇區(qū)結(jié)構(gòu)、側(cè)區(qū)側(cè)線數(shù)等重要特征,同時(shí)對(duì)二齡幼蟲的體長(zhǎng)、口針長(zhǎng)、尾長(zhǎng)及透明尾長(zhǎng)等主要鑒別特征進(jìn)行了形態(tài)測(cè)量.結(jié)果表明

2、:寄生于煙草根部的胞囊線蟲無(wú)論從唇區(qū)結(jié)構(gòu)、側(cè)線數(shù)目、還是從各項(xiàng)測(cè)量數(shù)值上,與大豆胞囊線蟲群體均無(wú)明顯差別.中華異皮線蟲與其他種相比差異較大.對(duì)全部樣品rDNA的ITS區(qū)進(jìn)行了PCR擴(kuò)增,并用AluI,Bshl236I,BsurI,CfoI,DdeI,Hinfl,MspI及RsaI等8種限制性內(nèi)切酶對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行了酶切分析及序列測(cè)定.PCR擴(kuò)增結(jié)果表明:所有樣品擴(kuò)增片段長(zhǎng)度均為1,030bp左右;RFLPs分析表明:經(jīng)Alu I,Cfo

3、I,Rsa I及Mva I等酶切后,各大豆胞囊線蟲群體均得到了相同的酶切圖譜.經(jīng)Ava I酶切后,部分來(lái)自山西太谷的大豆胞囊線蟲群體產(chǎn)生兩類酶切圖譜,顯示出群體內(nèi)存在一定的差異.另外,中華異皮線蟲經(jīng)除CfoI酶以外的7種酶酶切后,得到的酶切圖譜與其它種存在明顯的差異.通過(guò)對(duì)中國(guó)主要的胞囊線蟲種群rDNA中ITS區(qū)的序列測(cè)定及同源性分析明確了不同種群的系統(tǒng)學(xué)關(guān)系.其中大豆胞囊線蟲種內(nèi)群體間rDNA中ITS區(qū)間差異極小;寄生于煙草的胞囊線蟲

4、與大豆胞囊線蟲各群體差異不明顯,相似度高達(dá)99％,結(jié)合形態(tài)學(xué)特征,初步將寄生于煙草的胞囊線蟲鑒定為大豆胞囊線蟲;中華異皮線蟲同大豆胞囊線蟲差異明顯,相似度僅為77％,而與甘蔗胞囊線蟲(H.sacchari)的同源性較高,相似度為86％,這也是國(guó)際上首次報(bào)道中華異皮線蟲的分子信息.另外,根據(jù)所測(cè)定的序列比較而得出的大豆胞囊線蟲種內(nèi)群體及胞囊線蟲種間親緣關(guān)系與Subbotin et al.(2001)根據(jù)形態(tài)學(xué)差異所進(jìn)行的分組是完全相符的.