外源DNA導(dǎo)入小麥粒色變異后代的特性分析和驗證.pdf

1、山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文外源DNA導(dǎo)入小麥粒色變異后代的特性分析和驗證姓名：宋偉申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：作物遺傳育種指導(dǎo)教師：孫蘭珍劉保申20040606山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要通過花粉管通道法將外源紅高粱[SorghumbicoIor(L)Moench]總DNA導(dǎo)入普通小麥fTaestivum(L)Thell]品種濟(jì)核916，獲得了白粒、黑粒和紫粒(包括紫紅、深紅、咖啡3種粒色，其中紫紅最深、深紅次之、咖啡最淺)等不同粒色的變異后

2、代。本研究以受體濟(jì)核916為白粒對照，黑小麥品種烏麥526為黑粒對照，對變異后代進(jìn)行了營養(yǎng)品質(zhì)分析和籽粒發(fā)育過程中色素含量動態(tài)變化的研究，并從分子水平，蛋白質(zhì)水平和植株形態(tài)性狀上對外源DNA的導(dǎo)入和整合進(jìn)行了驗證。主要結(jié)果如下：l營養(yǎng)品質(zhì)分析結(jié)果表明，自粒、黑粒、紫紅粒變異后代的蛋白質(zhì)含量、氨基酸總量、必需氨基酸總量、對人體有益的礦質(zhì)營養(yǎng)元素含量、可溶性糖含量均較受體濟(jì)核916有不同程度的改善，說明導(dǎo)入后代具有獨特的營養(yǎng)價值和保健作用，

3、在黑色食品加工中具有廣闊的利用前景。2通過對供試材料籽粒發(fā)育過程中色素的含量進(jìn)行測定分析表明，在紫紅、深紅、咖啡及黑粒4個不同粒色變異后代的籽粒發(fā)育過程中，籽粒中葉綠素、類胡蘿h素的含量隨著發(fā)育天數(shù)的增加呈逐漸降低的趨勢，與自粒對照趨勢一致，其中3個不同深淺紫粒交異后代葉綠素、類胡蘿卜素的含量與籽粒的顏色深淺有關(guān)，即顏色越深，含量越低；紫粒小麥和黑粒小麥花青素的含量變化趨勢存在明顯差異，前者呈單峰曲線，后者呈雙峰曲線。峰值期是開發(fā)利用花

4、青素的最佳時間，而在白粒對照中始終沒有檢測到花青素的存在。研究還表明，不同粒色小麥籽粒在不同發(fā)育時期花青素的具體組成成分不同。3對外源DNA導(dǎo)入的RAPD驗證結(jié)果顯示，在60個供試的隨機(jī)引物中，有11個引物在供體、受體以及自粒、黑粒和紫紅粒變異后代中擴(kuò)增出了穩(wěn)定的差異片段。RAPD擴(kuò)增產(chǎn)物的多態(tài)性證實外源紅高粱的DNA片段已經(jīng)轉(zhuǎn)移并整合到了受體的基因組中，外源DNA片段整合的隨機(jī)性使導(dǎo)入后代產(chǎn)生了不同的性狀變異?！?POD和EST同工酶