28315.梭梭hacmo和habadh基因的克隆及植物表達載體構建_第1頁
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文檔簡介

1、寧夏大學碩士學位論文梭梭HaCMO和HaBADH基因的克隆及植物表達載體構建姓名：石磊申請學位級別：碩士專業(yè)：生物化學與分子生物學指導教師：宋玉霞20100301AbstractSoilsalinizafionaffectplantgrowthanddevelopmentseverelyandseriouslyhinderedthedevelopmentoftodaysagriculturalproductionBetaineisone

2、ofthebestosmoticadjustmentsolutethathavebeenfoundSynthesisofbetaineinplantsfromcholineviatwosteps，cholinetobetainealdehydebetainealdehydetobetaineTwostepofreactionsarccatalyzedbycholinemonooxygenaseandbetainealdehydedehy

3、drogenaseInthisslIldMthroughRTPCR(reversetranscriptionpolymerasechainreaction)andRACE(rapidamplificationofeDNAends)，a1503itfragmentcontainingentirebetainealdehydedehydrogenase(BAD／／)codingregionof500aminoacids(神hasbeenob

4、tained(asnamedHaBADH)anda1344bpfragmentcontainingentireCholinemonooxygenase(CMO)codingregionof447aminoacids(齟)hasbeenobtained(asnamedHaCMO)fromextremexerophyteandsalttolerantplantHaloxylonammodendronThededucedaminoacidse

5、quencesofHaBADHcontaintheconserveddecapaptidemELGGKSP)inaldehydedehydrogenase(ALDHs)during257—266andcysteineresidue(C)at294NucleotidesequenceofHaCMOWassimilartothecorrespondingfragmentofCMOeDNAofseveralotherplants，suchas

6、SpinaciaoleraceaAtriplexhortensiaSuaedaliaotungensisSalicorniaeuropaeaBetaru枷mwithasimilarityofmorethan745％EncodedproteinbYHaCMOandCMOproteinfromabovementionedplantsalsosharedmorethan735％identityattheaminoacidlevelTheres

7、ultshowedCMOgenewasconservedinChenopodiaceaeNucleotidesequenceofHaBADHwassimilartothecorrespondingfiagmentof丑4D日cD_NAofseveralotherplants，such鴿Kalidiumfoliatum，Atriplexcentralasiaaca，Atriplextriangularis，Spinaciaoleracea

8、，dtriplexhortensia，BetaⅥ伽，婦，wimasimilarityofmorethan85％EncodedproteinbyHaBADHandBADHproteinfromabovementionedplantsalsosharedmorethan87％identityattheaminoacidlevelTheresultshowedBADHgeneWaSconservedespeciallyinChenopodia

9、ceaeConstructPlantExpressionVectorspCAMBL心300HaCMOandpCAMBIA2300HaBADHwithobtainedfragmentcompleteopenreadingframeofHhCMoandHaBADHTransferthevectorsinticecallusThroughAgrobacteriummediatedmethodsuccessfullyandhaveobtaine

10、dtransgenicplantsThestudyprovidedmaterialforfurtherexploringdroughtresistantandsalttolerantmechanismsofHaloxyionammodendroninmolecularlevelandlayafoundationforfindingandexploitationofresistantgenesfromstresstolerantplant

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