29908.y家族dna聚合酶對化學致癌物mnng應答的轉錄調控研究

1、浙江大學醫(yī)學院博士學位論文Y家族DNA聚合酶對化學致癌物MNNG應答的轉錄調控研究姓名：朱慧芳申請學位級別：博士專業(yè)：病理學與病理生理學指導教師：邵吉民20091008浙江大學博上學位論文中文摘要調控中起一定作用。應用報告基因技術分析POLH、POLl和POLK啟動子截短體的轉錄活性，對三個聚合酶的最小啟動子區(qū)、轉錄激活區(qū)和抑制區(qū)進行了定位。b定量RTPCR和／或免疫印跡試驗檢測發(fā)現(xiàn)10pMMNNG可以引起POLH、POLl和POLK轉

2、錄上調。應用突變、報告基因和轉錄表達分析等技術發(fā)現(xiàn)：(1)過表達IRFl上調Polrl表達；將POLH啟動子區(qū)898位或590位IRFl結合位點突變后，過表達IRFl不能引起其轉錄上調，也抑制了MNNG引起的POLH啟動子的活性增加，說明IRFl與898位和590位結合，參與調控MNNG誘導的POLH的轉錄上調。(2)MNNG引起POLl的轉錄激活，Spl在MNNG誘導POLl的轉錄調控中起一定作用。(3)MNNG可能通過多個轉錄因子的

3、協(xié)同作用調節(jié)POLK的表達，而起主要調控作用的轉錄因子有待于進一步研究。c為了研究調控基因表達的“轉錄因子組”，我們初步建立了DNApulldown質譜檢測方法，為下一步研究基因的轉錄調控機制提供有力的工具。主要結論(1)首次系統(tǒng)研究了Y家族DNA聚合酶POLH和POLl啟動子的活性，發(fā)現(xiàn)POLH和POLl啟動子上的多個反應元件參與基因的轉錄調控，有的是正向調控，有的則是負向調控；(2)首次證明了IRFl和Spl分別參與了MNNG誘導的