新城疫現地分離株基因型分析和復合滅活疫苗研制.pdf

1、1999年和2002年從河北、黑龍江疑似新城疫雞的病料中經雞胚分離到4株病毒,分別命名為HeB-4-99、HeB-5-99、HeB-6-02和HLJ-10-02,各毒株均在48~72h致雞胚死亡.死亡雞胚的尿囊液有血凝活性,并且可被NDV標準陽性血清所抑制.復歸雞試驗可見發(fā)病雞出現典型新城疫癥狀和病理變化,而且可以分離出病毒,鑒定分離毒株為新城疫病毒.經致病性指數(ICPI、MDT)測定結果表明,分離株為新城疫強毒株.對F基因部分片段克

2、隆及核苷酸序列測定結果表明,4個毒株F蛋白的裂解位點氨基酸組成為<'112>RRQKRF<'117>,具有強毒株裂解位點氨基酸組成特點,與ICPI和MDT測定結果相吻合;核苷酸序列同源性分析顯示,4株分離毒株核苷酸序列具有95.9％~100％的同源性,與La Sota的核苷酸序列同源性為81.0％~81.8％,與F48E9的核苷酸序列同源性達85.8％~89.3％.選擇起始密碼子開始的1-374bp核苷酸序列,對該試驗的4個毒株和國內現

3、已克隆測序的NDV毒株以及國外部分毒株共73株繪制基因系統(tǒng)發(fā)育進化樹,結果表明HeB-4-99,HeB-5-99、HeB-6-02和HLJ-10-02歸屬于基因Ⅶ型.采用分離的基因Ⅶ型的NDV毒株與La Sota株制成復合滅活疫苗,并分別以La Sota株滅活疫苗、復合滅活疫苗以及復合滅活疫苗與La Sota株活疫苗聯合免疫試驗雞,進行免疫保護力比較試驗.結果表明,各組免疫雞強毒攻擊后均能獲得保護,但在測定免疫雞HI抗體時,發(fā)現復合滅活