適應(yīng)無血清培養(yǎng)的HEK293細(xì)胞系的培育與初步應(yīng)用.pdf

1、動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù)自上世紀(jì)60年代出現(xiàn)以來，始終以較快的速度發(fā)展。至今為止，血清仍然是一種被廣泛使用的添加成分，但血清作為一種動(dòng)物來源的培養(yǎng)物，常會(huì)引發(fā)一些爭議性問題。新一代的無血清培養(yǎng)基的出現(xiàn)解決了這些問題，其成分明確、性質(zhì)穩(wěn)定、批次間差異小，為實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性、可重復(fù)性提供了重要依據(jù)。
　　本研究采用培養(yǎng)液漸進(jìn)替換的方法獲，采用不同比例的適應(yīng)液配比，逐梯度馴化人胚胎腎細(xì)胞（HEK293），得了一株適應(yīng)無血清培養(yǎng)的HEK293

2、細(xì)胞亞群（293SF）。馴化過程中，作者對(duì)培養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化，使293SF細(xì)胞系具有貼壁生長、懸浮生長雙重特性。經(jīng)檢測(cè)293SF細(xì)胞形態(tài)規(guī)則；蛋白表達(dá)能力未發(fā)生明顯變化；隨著傳代，細(xì)胞具有較高的穩(wěn)定性。此外，293SF細(xì)胞支持復(fù)制缺陷型重組腺病毒的包裝和復(fù)制，支持重組腺病毒介導(dǎo)的蛋白表達(dá)，并且以上性質(zhì)隨細(xì)胞的傳代得到穩(wěn)定保留。貼壁狀態(tài)下生產(chǎn)腺病毒，細(xì)胞病變時(shí)間由110 h縮短到97 h，同時(shí)產(chǎn)率平均提高了43.3％，可降低腺病毒疫苗的生產(chǎn)