甜瓜蔓枯病抗性生理特點及抗性基因的分子標記研究.pdf

1、甜瓜(Cucumis melo L.)屬于葫蘆科(Cucurbitaceae)甜瓜屬(Cucumis)，是人們喜愛的水果之一，目前中國甜瓜的產量和消費量均居世界前列。甜瓜蔓枯病是一種由Didymella bryoniae引起的土傳真菌病害，其發(fā)生常導致甜瓜產量和品質上的嚴重損失，目前國內外甜瓜品種的蔓枯病抗性主要由Gsb-1提供，對蔓枯病Didymella bryoniae的抗性不足。提供甜瓜持久穩(wěn)定的抗性，創(chuàng)制培育復合抗源已成為必然。

2、抗性基因Gsb-4抗性供相對穩(wěn)定、持久。因此，圍繞如何利用Gsb-4抗性基因來提高甜瓜蔓枯病抗性開展了課題，本研究明確了甜瓜資源接種蔓枯病菌后的生理生化變化特點，以期在一定程度上揭示甜瓜蔓枯病的抗性形成機制，并為甜瓜蔓枯病抗性育種的種質資源鑒定提供技術借鑒;在此基礎上，篩選甜瓜蔓枯病抗性基因Gsb-4的SSR標記，并將其轉化為可以便捷利用的SCAR標記，為甜瓜蔓枯病抗性基因的分子標記輔助育種奠定了一定的基礎。具體研究如下:
　　

3、 1.不同抗性甜瓜接種蔓枯病菌后若干生理指標的變化
　　 以高抗蔓枯病的自交系PI420145和感蔓枯病的自交系伊麗莎白為材料，三葉一心期進行蔓枯病接種，接種一周后對抗感材料葉片葉綠素、可溶性糖、可溶性蛋白及3種防御酶(PPO、POD、PAL)的活性等指標進行測定。結果表明:抗感材料的葉綠素含量、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量的高低與蔓枯病抗性的強弱沒有必然的聯系，PPO、POD和PAL對蔓枯病原菌的侵染具有積極的作用，根據其接種

4、蔓枯病菌后的變化規(guī)律，可以為甜瓜蔓枯病的接種鑒定提供參考價值。
　　 2.甜瓜抗蔓枯病基因Gsb-4分子標記
　　 以含有抗病基因Gsb-4的甜瓜抗蔓枯病材料PI482398和感病材料白皮脆，及以此為親本構建的118株F2群體為材料，通過89對SSR多態(tài)性引物的篩選，并利用MAPMAKER/Exp version3.0 b軟件分析，獲得了與抗蔓枯病基因Gsb-4連鎖的SSR標記CMAT170a，連鎖距離為5.14 cM。

5、研究結果表明該標記可用于甜瓜抗蔓枯病分子標記輔助育種和抗病基因聚合育種。
　　 3.甜瓜抗蔓枯病基因SCAR標記的轉化與驗證
　　 在獲得與GSb-4連鎖的SSR標記的基礎上，將SSR特異片段回收、測序，根據序列片段設計特異引物SCARGB1，將該特異引物在PI482398和白皮脆雜交的F2群體的118單株上進行驗證，特異擴增檢測F2群體分離結果（抗∶感=3∶1）與原先的SSR標記檢測結果完全一致，表明SSR標記已經成功