小麥CPK2基因在小麥-葉銹菌體系中的表達(dá)分析及下游蛋白的篩選.pdf

1、CDPKs即鈣離子依賴蛋白激酶,是植物細(xì)胞應(yīng)對(duì)各種生物和非生物脅迫過(guò)程中承接Ca2+流變化的重要因素。本實(shí)驗(yàn)室前期工作通過(guò)SSH技術(shù)對(duì)小麥與葉銹菌互作不親和及親和組合在接種后早期的差異表達(dá)基因進(jìn)行了富集及篩選,發(fā)現(xiàn)小麥CPK2基因在不親合組合接種后8h被誘導(dǎo)表達(dá)。在此基礎(chǔ)上,本試驗(yàn)利用RT-PCR和Western-blotting技術(shù)分別在mRNA水平和蛋白質(zhì)水平對(duì)不同親和性組合中葉銹菌侵染后不同時(shí)間CPK2的表達(dá)特征進(jìn)行了檢測(cè)。結(jié)果表

2、明,在不親和組合中小麥CPK2無(wú)論在mRNA水平還是蛋白質(zhì)水平在接種后4h表達(dá)量均開(kāi)始上調(diào),8h達(dá)到最大。而親合組合mRNA水平在接種后8h略有增加,但水平顯著低于不親和組合,之后又趨于下降并接近Oh水平;蛋白質(zhì)水平在接種后8h有上調(diào)表達(dá),在16h達(dá)到最大,但其表達(dá)量明顯低于不親和組合。可見(jiàn),小麥CPK2在不親和組合中的誘導(dǎo)表達(dá)要比親和組合早且表達(dá)量高。這暗示著CPK2可能參與了小麥抗葉銹防衛(wèi)反應(yīng)的誘發(fā)過(guò)程。在此基礎(chǔ)上,本試驗(yàn)進(jìn)一步以T