PEASC表達載體構建及其農(nóng)桿菌介導的水稻遺傳轉化研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該研究利用從辣椒上克隆的決定辣椒倍半萜植保素合成的關鍵酶-倍半萜合成酶(pepper epi-aristolochene synthase)基因(PEASC),構建適合水稻轉化的表達載體,在建立起適合于供試水稻品種的農(nóng)桿菌介導的高效遺傳轉化體系基礎上,進行PEASC的水稻遺傳轉化,獲得轉基因水稻植株,這為進一步開展PEASC基因在水稻等主要作物抗病基因工程上可能利用價值評價的研究提供了重要材料.主要研究結論如下:(1)從三種誘導培養(yǎng)基(

2、即NB/MS/2N6)中篩選出適合于供試水稻品種的培養(yǎng)基NB;以NB為基本培養(yǎng)基,進一步篩選出分化培養(yǎng)基并對愈傷分化時間作了較為系統(tǒng)的研究,在此基礎上建立起適合于該研究供試水稻品種的遺傳轉化體系.(2)通過pBSK-PEASC的酶切、電泳、目的片段回收,將克隆在質粒pBSK上的目的基因PEASC克隆到雙元表達載體pGA1621的相應酶切位點上,構建出pGA1621-PEASC表達載體.凍溶法將表達載體導入根癌農(nóng)桿菌EHA105,PCR篩

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