烏蘇里瓦韋的抗炎活性部位篩選及抗炎活性成分研究.pdf

1、烏蘇里瓦韋，別名石茶、樹茶等。為蕨類水龍骨科瓦韋屬植物烏蘇里瓦韋[Lepisorus ussuriensis(Regel et Maack) Ching]的全草。分布于東北及河北、山西、山東、四川等地。據(jù)記載該植物具有清熱解毒，利尿，止咳，止血，消腫的功效。在民間應(yīng)用廣泛。
　　據(jù)調(diào)查，烏蘇里瓦韋資源豐富，且烏蘇里瓦韋是一種富含生物活性物質(zhì)，藥用、經(jīng)濟(jì)價(jià)值可觀，尚未充分挖掘的天然藥物，值得深入研究開發(fā)。本課題主要從以下幾個(gè)方面對(duì)其

2、進(jìn)行了研究:
　　首先，鑒于瓦韋屬植物的種類較多，且種間分類較模糊，因此為了保證烏蘇里瓦韋藥材來(lái)源的準(zhǔn)確性，對(duì)其進(jìn)行了生藥鑒定。分別對(duì)藥材進(jìn)行原植物、性狀、顯微及理化鑒定。確定了如下鑒定依據(jù):①根狀莖細(xì)長(zhǎng)橫走，密生黑色或深棕色鱗片，鱗片透明;葉片紙質(zhì)或革質(zhì)，葉片中部寬0.5～1 cm，葉柄長(zhǎng)1～5 cm，細(xì)脈網(wǎng)狀，孢子囊群圓形。②干燥藥材卷曲細(xì)長(zhǎng)，易碎，上下表皮中脈均隆起，細(xì)脈網(wǎng)狀。③根狀莖表皮細(xì)胞1列，表皮下方有數(shù)層厚壁細(xì)胞，網(wǎng)

3、狀中柱，葉柄中部維管束1條，其木質(zhì)部呈“T”字型;氣孔類型主要為極細(xì)胞型、共環(huán)極細(xì)胞型。④采用HPLC法分別對(duì)烏蘇里瓦韋的綠原酸、蛻皮甾酮和葉黃素含量進(jìn)行測(cè)定。烏蘇里瓦韋綠原酸含量為2.635 mg/g;蛻皮甾酮含量為2.509 mg/g，葉黃素含量為110.0μg/g。提供了陜捷、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確的烏蘇里瓦韋中3種成分的測(cè)定方法。
　　其次，對(duì)其抗炎活性部位進(jìn)行篩選:通過(guò)對(duì)比不同劑量的烏蘇里瓦韋水提取液和70％乙醇提取液對(duì)二甲苯致小鼠

4、耳廓腫脹的抑制作用，評(píng)價(jià)不同溶劑不同劑量提取液的抗炎作用，篩選到高劑量組70％乙醇提取液抗炎效果最佳;再對(duì)烏蘇里瓦韋70％乙醇提取物分別采用不同溶劑平行萃取和梯度萃取方法，篩選烏蘇里瓦韋的最佳活性抗炎部位，各組實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，其乙醇提取液的正丁醇平行萃取部位對(duì)小鼠耳廓腫脹抑制率最高，與模型組比較P＜0.01，與阿司匹林陽(yáng)性對(duì)照組比較P＞0.05，表明烏蘇里瓦韋乙醇提取液的正丁醇平行萃取部位抗炎活性最強(qiáng)。
　　再次，為了確定烏蘇里瓦韋

5、抗炎作用的主要化學(xué)成分，以建立其定量檢測(cè)方法，采用HPLC法對(duì)不同萃取物中的綠原酸和蛻皮甾酮進(jìn)行了檢測(cè)。結(jié)果表明，烏蘇里瓦韋乙醇提取液的正丁醇平行萃取部位中綠原酸和蛻皮甾酮的含量最高，但各實(shí)驗(yàn)組腫脹抑制率隨著各萃取部位綠原酸含量的增大而提高，說(shuō)明烏蘇里瓦韋的抗炎活性指標(biāo)成分是綠原酸。
　　最后，對(duì)烏蘇里瓦韋中綠原酸的提取工藝進(jìn)行了優(yōu)化。采用響應(yīng)面法分別對(duì)水提取和乙醇提取法進(jìn)行了優(yōu)化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明綠原酸的最佳提取工藝為:采用乙醇提取