鵝FAS、THRSPa和Apo-Al基因多態(tài)性及FAS和Apo-B基因在填飼鵝中表達(dá)模式的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、FAS、OBR、THRSPα、Apo-AI和Apo-B基因已被證實(shí)是重要的脂類代謝候選基因,在脂肪合成代謝與貯存、脂肪沉積、膽固醇運(yùn)輸和調(diào)節(jié)機(jī)體能量平衡等過程中發(fā)揮重要作用。為了檢測FAS、OBR、THRSPα和Apo-AI基因的突變位點(diǎn),尋找可以用于鵝分子育種的潛在的分子遺傳標(biāo)記,本研究以朗德鵝、浙東白鵝、江山白鵝、永康灰鵝和萊茵鵝共132只個體為研究對象,通過直接電泳與測序相結(jié)合的方法檢測這四個基因部分片段的多態(tài)性,對于存在多個突變

2、位點(diǎn)的片段,用SAS軟件構(gòu)建單倍型,并與鵝的屠體性狀、肌肉脂肪酸成分、粗脂肪含量和體尺性狀進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析.另一方面,為了明確強(qiáng)制填飼對FAS和Apo-B基因在朗德鵝各組織中表達(dá)的影響,探索基因表達(dá)與脂肪沉積的關(guān)系,以β-actin作為內(nèi)參基因,用實(shí)時熒光定量PCR法檢測對照鵝與填肥鵝13個組織中FAS和Apo-B基因mRNA表達(dá)水平,比較兩組鵝各組織中基因表達(dá)的差異,并分析其與終點(diǎn)體重、腹脂重、腹脂率、肝重及肝臟指數(shù)間的相關(guān)關(guān)系.此外,為

3、了明確上述五個鵝種的肉質(zhì)特點(diǎn),為其配套系選育和開發(fā)利用提供可靠依據(jù),本試驗(yàn)比較了不同品種肌間脂肪及其17項(xiàng)脂肪酸組成和腹脂沉積情況的差異,并對17項(xiàng)脂肪酸組成指標(biāo)進(jìn)行主成分分析和系統(tǒng)聚類分析。主要研究結(jié)果如下:
   1.鵝FAS、OBR、THRSPα和Apo-AI基因多態(tài)性與屠體、脂肪酸相對含量、粗脂肪及體尺性狀相關(guān)性研究
   本試驗(yàn)中,除了Apo-AI基因所擴(kuò)增出的片段中沒有發(fā)現(xiàn)SNPs,其它三個基因中檢測到的SN

4、Ps分別為:SNPs-FAS551(C/T)、SNPs-FAS681(C/T)、SNPs-OBR3460(C/T)、SNPs-OBR3575(A/G)和SNPs-THRSPα649(C/T).其中,OBR3575位點(diǎn) A/G突變?yōu)殄e義突變,導(dǎo)致異亮氨酸變?yōu)槔i氨酸。除了SNPs-FAS681只產(chǎn)生cc和ct兩種基因型,其它突變均產(chǎn)生三種基因型,但是各個位點(diǎn)的基因型分布及頻率在不同品種間均表現(xiàn)出各自的特點(diǎn).在檢測到有SNPs存在的群體中,除

5、了SNPs-FAS681位點(diǎn)在ZD群體中的PIC小于0.25,為低度多態(tài),其它位點(diǎn)在各個群體中均屬于中度多態(tài)。而且,只有江山白鵝在SNP-OBR3460和SNP-OBR3575兩個位點(diǎn)上極顯著偏離了Hardy-Weinberg平衡,它在其它多態(tài)位點(diǎn)以及其它鵝群在各多態(tài)位點(diǎn)均處于Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)。利用FAS中的2個SPNs構(gòu)建出CC、CT、TC和TT四種單倍型,利用OBR的2個SNPs構(gòu)建出CA、CG、TA和TG四種單

6、倍型,且根據(jù)對連鎖不平衡參數(shù)的估計(jì),OBR的兩個位點(diǎn)處于強(qiáng)連鎖不平衡狀態(tài)。
   關(guān)聯(lián)分析結(jié)果表明:SNPs-FAS551位點(diǎn)的基因型效應(yīng)對粗脂肪的影響極顯著(P<0.01),對全凈膛率影響顯著(P<0.05),對腹脂率有一定影響(P<0.1);SNPs-681的不同基因型對腹脂率有極顯著影響(P<0.01),對豆蔻酸有顯著影響P<0.05);二者的單倍型效應(yīng)對腹脂率有顯著影響(P<0.05),對鵝肉的脂肪酸成分、粗脂肪含量及鵝

7、的體尺性狀無明顯影響。
   對于OBR基因,SNPs-OBR3460位點(diǎn)的基因型效應(yīng)對花生酸和二十碳烯酸的相對含量影響顯著(P<0.05); SNP-OBR3575的基因型對十七碳烯酸和粗脂肪含量有顯著影響(P<0.05);該基因兩個突變位點(diǎn)的基因型效應(yīng)及其單倍型效應(yīng)對所有屠體性狀和體尺性狀均無顯著影響。
   而在THRSPα基因,SNPs-THRSPα649的基因型效應(yīng)對豆蔻酸相對含量影響極顯著(P<0.01);對

8、亞油酸、ω6∶ω3值和龍骨長影響顯著(P<0.05),并對半凈膛率、飽和脂肪酸和芥酸的相對含量有一定影響(P<0.1)。
   2.熒光定量PCR法檢測朗德鵝填飼前后FAS和Apo-B基因表達(dá)情況
   FAS與Apo-B基因在朗德鵝13個組織中均有不同程度的表達(dá)。經(jīng)填肥處理,F(xiàn)AS基因在鵝肝臟和脾中的表達(dá)量顯著增加(P<0.05),在腎臟中的表達(dá)水平顯著降低(P<0.05),而Apo-B基因在腦和胸肌中的表達(dá)水平顯著升

9、高(P<0.05),在皮脂、小腸、脾和胰腺中的表達(dá)量顯著降低(P<0.05)。FAS基因在朗德鵝心臟、肝臟、小腸、皮脂和脾中的相對表達(dá)量,以及Apo-B基因在小腸、肺和脾中的表達(dá)水平與朗德鵝部分生長參數(shù)顯著或極顯著相關(guān)。
   3.5個鵝種肌肉脂肪酸成分比較及主成分分析結(jié)果
   在五個鵝種中,江山白鵝的飽和脂肪酸相對含量(31.10%)、萊茵鵝的不飽和脂肪酸相對含量(69.46%)、浙東白鵝的必需脂肪酸相對含量(15.

10、27%)最高,分別與其它鵝種間存在不同顯著水平的差異;江山白鵝的ω3(3.16%)、浙東白鵝的ω6(12.96%)和ω7(5.28%)、萊茵鵝的ω9(49.79%)相對含量最高,均極顯著高于其它鵝種(P<0.01);浙東白鵝ω6∶ω3值(5.63)最高,江山白鵝的(3.78)最低,各鵝種間的差異極顯著(P<0.01);浙東白鵝的粗脂肪含量(3.72%)最高,極顯著高于江山白鵝和萊茵鵝(P<0.01),顯著高于永康灰鵝(P<0.05);永

11、康灰鵝的腹脂率(3.47%)最高,江山白鵝的最低(0.55%),二者與其它鵝種間均呈極顯著差異(P<0.01);各族不飽和脂肪酸相對含量與粗脂肪、腹脂率之間呈不同程度的相關(guān),17項(xiàng)脂肪酸組成指標(biāo)間也存在不同程度的相關(guān),其中以油酸與亞油酸的相關(guān)性最高;主成分分析獲得的前3個主成分分別解釋總變異的46.89%、30.01%和13.27%,累積貢獻(xiàn)率達(dá)到90.17%;浙東白鵝的綜合主成分值排名第一;聚類結(jié)果表明,5個鵝種聚為3類,浙東白鵝與萊

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