豬源大腸桿菌耐藥性調查與I型整合子-基因盒分子流行病學研究.pdf

1、細菌耐藥性問題已經成為全球關注的一個熱點。大腸桿菌作為人和動物體內的常在菌，其耐藥水平的高低具有一定的代表性。存在于細菌質粒中的整合子結構，能夠整合各種耐藥基因盒并在同種或不同種細菌間進行水平傳播，進而引起細菌耐藥性普遍升高和多重耐藥日趨嚴重的現狀。因此了解規(guī)?；B(yǎng)豬場大腸桿菌的耐藥水平，研究Ⅰ型整合子的的類型及其流行狀況，分析其耐藥基因盒與多重耐藥現象之間的關系，為了解細菌耐藥性現狀，指導臨床合理用藥以及針對目前耐藥現狀制定防控措施提

2、供試驗依據。
　　 本研究采用微量肉湯稀釋法測定159株豬源大腸桿菌對8類14種抗菌藥物的耐藥性。試驗結果表明:159株大腸桿菌對四環(huán)素、磺胺異惡唑、新諾明的耐藥率最高，為100％;所有菌株對奧格門丁均表現為敏感;而對頭孢唑啉、頭孢噻呋和多粘菌素的耐藥率較低，分別為5.03％(8株)、5.66％(9株)和2.52％(2株)。多重耐藥范圍為3耐～11耐。其中以7耐為最多，耐藥菌株的比例占到24.44％，其次分別為9耐、8耐、6耐、

3、5耐，耐藥菌株的比例分別為17.94％、17.15％、12.93％、12.66％。
　　 本試驗采用PCR方法調查豬源大腸桿菌Ⅰ型整合子的流行病學，以擴增出5'端的保守序列Ⅰ型整合酶基因(int(I)1基因)為判定存在Ⅰ型整合子的依據。采用PCR方法、PCR產物同源性酶譜分析及直接測序三種方法結合進行耐藥基因盒的調查。研究得出:從豬場分離的119株大腸桿菌中，共92株分離菌有Ⅰ型整合子整合酶基因及耐藥基因盒插入區(qū)擴增片段，檢出率

4、達77.31％。92株Ⅰ型整合子攜帶大腸桿菌共擴增出7類不同大小的基因盒插入區(qū)片段，大小分別為1008bp、1318bp、1586bp、1663bp、1913bp、1945bp、3149bp，其中以大小為1008bp的插入區(qū)片段的檢出率最高為31.67％。而檢出率最低的為長度為1318bp的基因盒插入區(qū)。將基因盒插入區(qū)擴增片段的測序結果與Genebank中的相關序列進行比對，分析其攜帶基因盒的同源性。試驗檢測的Ⅰ型整合子攜帶的耐藥基因為