一種快腐菌劑對(duì)堆肥制作效果及微生物群落的影響.pdf

1、為研究接種快腐菌劑對(duì)堆肥制作效果以及堆肥微生物群落變化的影響，本研究通過向豬糞堆肥中接種快腐菌劑，研究快腐菌劑對(duì)堆肥制作效果的影響，并采用PCR-DGGE技術(shù)研究堆肥微生物的群落變化，研究結(jié)果如下：
　　 1.接種快腐菌劑對(duì)堆肥制作的影響
　　 和未接種對(duì)照相比，接種快腐菌劑加快堆肥前期升溫速度，堆體達(dá)到65℃時(shí)間從第5d提前到第3d，堆體最高溫度從67.3℃提高到72.7℃。60℃以上溫度維持時(shí)間從17d延長到21d。

2、接種快腐菌劑一方面，在堆肥制作前期(前5d)促進(jìn)易分解物質(zhì)可溶性糖和淀粉的分解，可溶性糖的分解從對(duì)照的36.7％提高到54.2％、淀粉從39.4％提高到80.2％，另一方面，在高溫階段促進(jìn)難分解物質(zhì)粗纖維的分解速率，從而在整個(gè)堆肥制作過程中加快總有機(jī)質(zhì)分解，總有機(jī)質(zhì)穩(wěn)定時(shí)期從對(duì)照的第30d提前到第25d，最終加快堆肥腐熟進(jìn)程。
　　 2.PCR-DGGE技術(shù)研究接種快腐菌劑對(duì)堆肥微生物群落變化的影響
　　 (1)通過提取

3、不同時(shí)期堆肥細(xì)菌總DNA，PCR擴(kuò)增細(xì)菌16S rDNA V3區(qū)和DGGE電泳，進(jìn)行DGGE條帶多樣性的分析，結(jié)果表明：堆肥過程中兩組堆肥DGGE條帶數(shù)量呈現(xiàn)出高-低-高的動(dòng)態(tài)變化。表現(xiàn)為堆肥初期，DGGE條帶數(shù)較多，為20。進(jìn)入高溫前期，堆肥溫度迅速上升，大量中溫微生物死亡，而新的嗜熱微生物尚未大量繁殖，導(dǎo)致DGGE條帶數(shù)下降，接種與對(duì)照DGGE條帶數(shù)分別為16，14。隨著高溫的繼續(xù)，嗜熱微生物不斷出現(xiàn)，使得高溫后期DGGE條帶數(shù)再次

4、增多，接種與對(duì)照條帶數(shù)分別上升到22，23。至堆肥腐熟期與后熟期，堆溫保持穩(wěn)定，接種處理DGGE條帶數(shù)略有所下降，但兩處理組DGGE條帶數(shù)在堆肥腐熟期基本維持在一個(gè)較高水平。
　　 (2)通過堆肥樣品的PCR-DGGE指紋圖譜可以看出，整個(gè)堆肥過程中，兩組堆肥樣品DGGE優(yōu)勢(shì)條帶均發(fā)生明顯的變化。表現(xiàn)為部分優(yōu)勢(shì)條帶存在于堆肥的整個(gè)過程；部分優(yōu)勢(shì)條帶在高溫前期出現(xiàn)，隨著堆肥進(jìn)程逐漸消失；還有部分優(yōu)勢(shì)條帶只存在于堆肥腐熟期與后熟期。

5、說明隨著堆肥的進(jìn)程，微生物群落結(jié)構(gòu)發(fā)生了相應(yīng)變化。
　　 (3)采用Quantity one軟件對(duì)兩種處理不同階段堆肥8個(gè)樣品的PCR-DGGE圖譜進(jìn)行聚類分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：隨著堆肥進(jìn)程，堆肥微生物群落結(jié)構(gòu)明顯分為三個(gè)區(qū)域。第一個(gè)區(qū)域只分布一個(gè)樣品，為對(duì)照高溫前期，第二個(gè)區(qū)域分別為對(duì)照高溫后期、接種高溫前期與后期的三個(gè)樣品，第三個(gè)區(qū)域分別為對(duì)照與接種處理的腐熟期與后熟期的四個(gè)樣品。比較不同階段堆肥樣品微生物群落，發(fā)現(xiàn)高溫前期對(duì)照與