蔥鏈格孢轉(zhuǎn)化人參皂甙Rb-,1-、Rb-,2-和Rc的研究.pdf

1、人參為五加科植物，是名貴中藥，人參皂甙是其主要活性成分之一。有些人參皂甙在人參中的含量低，甚至不存在，被稱為稀有人參皂甙。但是，有些稀有人參皂甙具有獨特的藥理學(xué)活性。由于化學(xué)方法存在著產(chǎn)率低、污染環(huán)境、副產(chǎn)物多、皂甙元的結(jié)構(gòu)容易遭到破壞等缺點，因此生物轉(zhuǎn)化方法是目前獲得稀有人參皂甙最具有潛力的方法。本論文的內(nèi)容包括：篩選能夠轉(zhuǎn)化高含量的原人參二醇型皂甙為稀有人參皂甙的植物病原真菌；蔥鏈格孢轉(zhuǎn)化人參二醇型皂甙Rbl、Rb2、Rc的研究。<

2、br>　　 本論文的第一部分對27種植物病原真菌進行了轉(zhuǎn)化實驗，其中僅有一種不能催化人參皂甙的轉(zhuǎn)化反應(yīng)，其余26種均對人參皂甙有不同程度的轉(zhuǎn)化能力。這些真菌轉(zhuǎn)化人參皂甙的終產(chǎn)物不同，其中有2種真菌能將高含量的原人參二醇型皂甙轉(zhuǎn)化為原人參二醇型皂甙元；包括蔥鏈格孢在內(nèi)的8種植物病原真菌能將高含量的原人參二醇型皂甙轉(zhuǎn)化為具有抗腫瘤活性的人參皂甙C-K;有12種真菌轉(zhuǎn)化高含量原人參二醇型皂甙混合物的終產(chǎn)物為人參皂甙F2;有4種真菌只能將人參

3、皂甙Rb1轉(zhuǎn)化為Rd，不能再繼續(xù)水解Rd上的糖殘基而生成其他的產(chǎn)物；有3種真菌除了生成主要產(chǎn)物之外，在TLC圖譜上發(fā)現(xiàn)還存在一種比F2的Rf值略低的少量產(chǎn)物，很可能是人參皂甙Rg3：交鐮孢霉病原真菌轉(zhuǎn)化原人參二醇型皂甙的產(chǎn)物有7種，說明該真菌水解糖殘基時對糖殘基所在位置的選擇性較差，原因可能是該真菌分泌的糖苷酶隨機地水解原人參二醇型皂甙上的糖殘基，也可能是分泌的酶的種類比較多。
　　 本論文的第二部分研究了蔥鏈格孢(Altern

4、aria porri(Ellis) Cifferri)及其分泌的胞外酶對三種人參皂甙Rbl、Rb2、Re的轉(zhuǎn)化。大量制備了其中一種產(chǎn)物，對其進行13C-NMR鑒定以確定其結(jié)構(gòu)，判斷該產(chǎn)物為人參皂甙F2，利用TLC和HPLC鑒定了其他產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)。蔥鏈格孢轉(zhuǎn)化人參皂甙Rb1的途徑為：RbIRdF2C-K;蔥鏈格孢轉(zhuǎn)化人參皂甙Rb2的途徑為：Rb2COC-Y，不能進一步水解C-Y而生成人參皂甙C-K;蔥鏈格孢轉(zhuǎn)化人參皂甙Rc的途徑為：RcMb