褪黑激素受體基因在內(nèi)蒙古絨山羊皮膚毛囊中的表達(dá).pdf

1、內(nèi)蒙古白絨山羊是世界名貴的珍惜物種，其絨纖維是舉世公認(rèn)的“纖維寶石”。通過(guò)前人研究，發(fā)現(xiàn)褪黑激素能夠促進(jìn)絨毛生長(zhǎng)，但其信號(hào)通路及調(diào)控機(jī)理尚不清楚。因此，本研究以內(nèi)蒙古絨山羊?yàn)檠芯繉?duì)象，利用RT—PCR、熒光實(shí)時(shí)定量RT—PCR和原位雜交等技術(shù)，探討褪黑激素受體MTNRla，MTNRlb和RORa在內(nèi)蒙古絨山羊2、4、8、10、12月份及埋植褪黑激素后皮膚毛囊中mRNA水平的表達(dá)，尋找褪黑激素促進(jìn)絨毛生長(zhǎng)的信號(hào)通路及調(diào)控機(jī)理，通過(guò)研究得到

2、結(jié)果如下： 1、克隆了MTNRla外顯子序列，該序列由1081個(gè)核苷酸組成，預(yù)測(cè)編碼345個(gè)氨基酸。核苷酸和氨基酸序列與GenBank中其他哺乳動(dòng)物該基因序列的同源性均較高。 2、RT—PCR結(jié)果表明：MTNRla mRNA在內(nèi)蒙古絨山羊皮膚組織中不表達(dá)，而在下丘腦中表達(dá)；MTNRlb mRNA在皮膚及下丘腦組織中均不表達(dá)；RORα mRNA在皮膚組織中表達(dá)。 3、原位雜交結(jié)果顯示，MTNRla mRNA在皮膚組織中不表達(dá)，而在

3、下丘腦組織中呈廣泛表達(dá)：RORa mRNA在皮膚毛囊中表達(dá)，2月份在絨干上有較強(qiáng)的陽(yáng)性表達(dá)信號(hào)，在毛干上沒(méi)有表達(dá)信號(hào)；4月份集中在毛囊的內(nèi)根鞘、髓質(zhì)和絨干上有表達(dá)信號(hào)；在8月份的毛干皮質(zhì)部和外根鞘處有較強(qiáng)的表達(dá)信號(hào)；10月份在毛干和絨干上有表達(dá)信號(hào)；12月份在毛干和絨干的外根鞘部有表達(dá)信號(hào)。 4、實(shí)時(shí)熒光定量RT—PCR結(jié)果表明，RORa mRNA在內(nèi)蒙古絨山羊皮膚2、4、8、10、12月份均有表達(dá)：在2月份的表達(dá)量最高，4月份下降，之

4、后8月份、10月份在逐漸升高，10月份基本達(dá)到2月份水平，12月份降到全年最低點(diǎn)，呈動(dòng)力學(xué)變化。 5、埋植褪黑激素皮膚組織RORa mRNA表達(dá)信號(hào)集中在毛干和絨干的外根鞘上；表達(dá)水平較正常組織要低。本研究在內(nèi)蒙古絨山羊皮膚毛囊中檢測(cè)到了RORa mRNA的表達(dá)，并且不同月份表達(dá)量存在動(dòng)態(tài)變化，揭示了褪黑激素促進(jìn)絨毛生長(zhǎng)的作用途徑可能是通過(guò)核受體RORa來(lái)發(fā)揮其功能的，為進(jìn)一步研究褪黑激素受體與產(chǎn)絨性能之間的關(guān)系，闡明褪黑激素作用途徑及