擬南芥和甘藍型油菜油體蛋白功能分析.pdf

1、油菜作為世界上大規(guī)模種植的油料作物之一，每年提供人類食用油13％左右。菜籽油是食用油的重要組成部分，目前我國菜籽油產量處于供不應求的狀態(tài)，因此，提高含油量和改善油菜品質是現(xiàn)代育種的重要組成部分。油體蛋白是鑲嵌在油滴表層的堿性蛋白質，對種子內油滴形成以及脂質積累有著重要的作用。本研究主要通過克隆及超表達擬南芥和甘藍型油菜油體蛋白基因分析油體蛋白對種子含油量的影響。主要研究結果如下：
　　1）從擬南芥和甘藍型油菜果莢中分別克隆了AtO

2、LE1、AtOLE2、AtOLE3、AtOLE4及 BnOLE1、BnOLE2、BnOLE3、BnOLE4油體蛋白基因，并對油體蛋白基因進行了蛋白質一級結構、亞細胞定位預測及進化樹等生物信息學分析。
　　2）分別構建了油體蛋白基因與pBinGlyRed3質粒種子特異性表達載體，同時構建了目的基因與pCambia1303-EGFP-DsRed3重組載體用于亞細胞定位實驗，將構建成功的重組載體通過農桿菌介導的方法轉化擬南芥，獲得T0代

3、轉基因擬南芥種子。
　　3）測定 T1代轉基因種子以及 T2代純系種子中含油量以及脂肪酸組分發(fā)現(xiàn)，在擬南芥中超表達油體蛋白基因對含油量影響不大，但可以促使種子中亞油酸(C18:2)含量提高1.2%-6.2%，二十碳烯酸(C20:1)含量降低1.0%-2.9%，說明油體蛋白基因在擬南芥中超表達后對種子的脂肪酸組分有一定的調節(jié)作用。
　　4）對轉基因種子的油滴大小、萌發(fā)率等形態(tài)學指標進行檢測，結果顯示在轉基因BnOLE16株系中