淹水脅迫及白粉病菌誘導(dǎo)小麥根細(xì)胞程序化死亡的研究.pdf_第1頁(yè)
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1、濕害是長(zhǎng)江中下游麥區(qū)常見(jiàn)的自然災(zāi)害,嚴(yán)重地影響了小麥(Triticum aestivum L.)的生長(zhǎng)和產(chǎn)量。目前,關(guān)于淹水誘導(dǎo)小麥根通氣組織形成中的細(xì)胞程序化死亡(programmed cell death,PCD)報(bào)道較少。本研究以華麥8號(hào)(Triticum aestivum L.cv. Huamai8)幼苗為材料進(jìn)行淹水處理,采用DNA瓊脂糖凝膠電泳、TUNEL標(biāo)記和透射電子顯微術(shù)檢測(cè)根皮層細(xì)胞的PCD特征,采用特異熒光染色檢測(cè)根

2、中活性氧(reactive oxygen species,ROS)及Ca2+的積累。證明淹水誘導(dǎo)的小麥根通氣組織形成是一個(gè)根皮層PCD的過(guò)程,并且ROS及Ca2+參與了通氣組織的形成。主要結(jié)果如下:
   1.淹水脅迫下,小麥根皮層部分細(xì)胞發(fā)生了PCD。具體有如下特征:細(xì)胞核DNA斷裂并呈現(xiàn)laddering條帶、染色質(zhì)凝集、核膜降解、線粒體內(nèi)嵴膨脹和降解、細(xì)胞壁電子密度下降等。
   2.淹水誘導(dǎo)的小麥根PCD在發(fā)生部

3、位和細(xì)胞死亡率上都受到了嚴(yán)格調(diào)控。具體表現(xiàn)在:淹水誘導(dǎo)的PCD僅僅發(fā)生在皮層中,中柱細(xì)胞不受淹水影響;淹水誘導(dǎo)的PCD在淹水1.5-48 h內(nèi)大量發(fā)生,并且細(xì)胞死亡率保持在相對(duì)穩(wěn)定的水平(18%-33%);通氣組織形成后細(xì)胞死亡降到很低的水平(1%)。
   3.ROS和Ca2+均在核DNA發(fā)生斷裂之前開始積累,在通氣組織形成中表現(xiàn)出明顯的時(shí)空變化:ROS和Ca2+熒光最先出現(xiàn)在內(nèi)皮層中,隨后出現(xiàn)在外皮層等部位,最后在整條根中都

4、有較強(qiáng)的ROS和Ca2+熒光。二者可能參與和介導(dǎo)了皮層細(xì)胞PCD過(guò)程。
   4.淹水嚴(yán)重影響了小麥根系生長(zhǎng)。淹水脅迫對(duì)初生根生長(zhǎng)一直表現(xiàn)為抑制,但對(duì)次生根生長(zhǎng)表現(xiàn)為淹水前期的抑制和淹水后期的促進(jìn)。另外,淹水不但誘導(dǎo)了小麥根通氣組織的形成,還誘導(dǎo)了根細(xì)胞壁的加厚。
   小麥白粉病是由白粉病菌(Blumeria graminis f.sp.tritici)引起的一種世界性小麥病害。目前,關(guān)于白粉病菌誘導(dǎo)小麥系統(tǒng)性細(xì)胞程序

5、化死亡(systemic programmed cell death)的報(bào)道較少。本研究采用小麥白粉病菌感染華麥8號(hào)幼苗葉片和剪葉2個(gè)處理,用DNA瓊脂糖凝膠電泳、TUNEL標(biāo)記和透射電子顯微術(shù)檢測(cè)根細(xì)胞的PCD特征,采用特異熒光染色檢測(cè)根中ROS及Ca2+的積累。證明白粉病菌和剪葉處理均可誘導(dǎo)小麥根發(fā)生PCD,其中白粉病菌誘導(dǎo)的小麥根系PCD是一個(gè)系統(tǒng)性PCD的過(guò)程,并且ROS及Ca2+參與了該過(guò)程。主要結(jié)果如下:
   1.

6、小麥感染白粉病菌導(dǎo)致的根系(包括皮層和中柱)PCD表現(xiàn)為如下特征:細(xì)胞核DNA發(fā)生斷裂并且呈現(xiàn)laddering條帶、染色質(zhì)凝集并邊緣化、核周腔部分?jǐn)U大和核膜降解等。根中沒(méi)有發(fā)現(xiàn)白粉病菌感染跡象,所以白粉病菌誘導(dǎo)的小麥根PCD是一個(gè)系統(tǒng)性PCD的過(guò)程。
   2.感染白粉病菌的小麥與剪葉處理相比,呈現(xiàn)葉片變窄、莖稈變細(xì)、根細(xì)胞壁增厚、根細(xì)胞死亡率很高、ROS和Ca2+熒光很強(qiáng)等特點(diǎn)。剪葉處理誘導(dǎo)的根PCD是因?yàn)楦等鄙俟夂贤?/p>

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