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文檔簡(jiǎn)介
1、雞傳染性貧血病毒（Chicken anemia virus，CAV）是引起雞傳染性貧血?。–hicken infectious anemia,CIA）的病原,屬圓環(huán)病毒科（Circoviridae）。CAV基因組編碼三種蛋白：VP1(51.6kD)、VP2(24kD)和VP3(13.6kD),其中VP3(Apoptin)可以誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。
本文通過基因突變技術(shù)將CAV的基因序列第487nt處的T改變?yōu)镃，第526nt處的C
2、改變?yōu)門，從而使VP3的起始密碼子移位到原第14氨基酸的位置。突變后的VP3缺失了39個(gè)堿基，造成VP3的不完全表達(dá)；而相同堿基位置的VP2編碼的氨基酸不變，因此不會(huì)影響VP2的表達(dá)。本研究還通過引物設(shè)計(jì)，將CAV病毒非編碼區(qū)不完整的EcoR I識(shí)別序列（5'-GACTTC-3'）突變?yōu)橥暾腅coR I識(shí)別序列（5'-GAATTC-3'）,從而有利于CAV基因組的體外自身環(huán)化。將體外自身環(huán)化的重組體轉(zhuǎn)染MDCC-MSB1細(xì)胞，獲得感染
3、性克隆。為下一步研究其對(duì)病毒致病性的影響，研制弱毒性或無毒性的CAV疫苗株探索一條新路。
環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增（Loop-mediated isothermal amplification,LAMP）技術(shù)通過具有鏈置換特性的Bst DNA聚合酶完成靶序列的擴(kuò)增，僅需恒溫加熱就能擴(kuò)增DNA，并可以通過核酸染料染色觀察結(jié)果，具有簡(jiǎn)便、快速的特點(diǎn)。本研究利用雞傳染性貧血病毒Cux-1株基因?yàn)榘行蛄性O(shè)計(jì)了6條引物并建立了LAMP檢測(cè)方法
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