七株鹽藻的親緣關系鑒定和生長特性比較.pdf

1、本論文選用中國海洋大學微藻種質庫保存的7株鹽藻為研究材料，對其進行了鹽度、溫度以及光照等生態(tài)因子的適應性評價，結合傳統(tǒng)細胞學形態(tài)分類和分子生物學手段進行了分類地位和親緣關系的探討，為進一步研究和開發(fā)這一藻類資源提供依據。本研究還初步研究了鹽藻的耐鹽蛋白，并應用流式細胞術這一新技術進行了鹽藻耐鹽機理研究方法的初步嘗試。研究結果如下： 1.在本實驗條件下，這7株鹽藻對溫度和光照強度的適應性相似，最佳生長條件分別為25℃，60001x

2、。鹽度適應實驗結果表明7株鹽藻均為耐鹽品系，但其耐鹽性存在顯著差異，相對最適鹽度為50～150不等，其中以A57對高鹽度的耐受性最強。在優(yōu)化的鹽度、溫度及光照條件下，A85增殖能力較強，具有一定的開發(fā)潛力。 2.PCR擴增7株鹽藻的5.8S rDNA和ITS序列，并完成序列測定，將從Genbank搜索的7條已定種鹽藻的相應序列與7條擴增序列同時進行分析，構建進化樹，得出7株鹽藻均與綠色杜氏藻(D.viridis)親緣關系最為密切

3、，結合細胞形態(tài)學及生理生化分析的鑒定結果，可以確定這7株鹽藻均為綠色杜氏藻的不同株系，其中A85、A57和A83親緣關系最近，A121和A124關系最為密切。篩選的12個隨機引物進行7株鹽藻RAPD分析的結果與采用5.8SrDNA和ITS序列分析的結果基本一致。 3.測定高鹽脅迫下鹽藻A57的胞內甘油含量并提取總蛋白進行SDS-PAGE分析，發(fā)現其細胞胞內甘油含量的調整在高鹽脅迫6h內即可完成，但蛋白合成在脅迫初期受到顯著抑制，