對蝦白斑綜合癥病毒(WSSV)膜蛋白VP13A的鑒定及VP31和VP33與宿主細胞相互作用的初步研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、對蝦白斑綜合癥病毒是一種具有囊膜、無包涵體的桿狀雙鏈環(huán)狀DNA病毒，也是嚴重危害對蝦養(yǎng)殖業(yè)的最主要病原。本文圍繞病毒膜蛋白進行了研究。主要包括以下三個部分： (1)質譜分析發(fā)現(xiàn)病毒膜蛋白VP13A是ORF wsv284的編碼產(chǎn)物。隨后在E.coli BL-21菌株中表達純化了GST-VP13A-His并制備了相應的抗血清。利用GST pull-down和Far-Westernblotting分析發(fā)現(xiàn)VP13A和另一個病毒膜蛋白V

2、P24有相互作用。 (2) WSSV的膜蛋白VP31和VP33都具有RGD序列，推測該結構域在這兩種蛋白和宿主細胞的結合中起重要作用。分別可溶表達并純化得到這兩種全長蛋白以及RGD序列被RDG所替代的突變蛋白。間接免疫熒光染色和RGD競爭抑制實驗顯示，只有野生型蛋白能結合螯蝦血細胞，而這種結合又能被含RGD序列的多肽抑制，證實了VP31和VP33對宿主細胞的粘附是由RGD結構域所介導的。 (3)病毒具有自我組裝的機制，一

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