微生物檢驗(yàn)基礎(chǔ)知識(shí)

1、課程內(nèi)容,第一單元 微生物學(xué)基礎(chǔ)知識(shí),第三單元 培養(yǎng)基及器皿準(zhǔn)備,,第二單元 消毒、滅菌方式,第四單元 微生物檢驗(yàn)基本方法,1,,第一單元 微生物學(xué)基礎(chǔ)知識(shí),2,生物分類(lèi)系統(tǒng),病毒界,原核生物界,真菌界(真核),真核原生界,動(dòng)物界,植物界,病毒,細(xì)菌,酵母菌,霉菌,藻類(lèi),原生動(dòng)物,,,,,,,,,,,,,,,,,,,微生物,微生物并非生物分類(lèi)學(xué)上的名詞， 所有個(gè)體微小的低等生物通稱(chēng),,微生物在生物界地位,3,地位最低,,微生物

2、,小,簡(jiǎn),低,,,,微生物定義及特點(diǎn),個(gè)體,結(jié)構(gòu),進(jìn)化,4,微生物定義及特點(diǎn),,微生物,分布廣、種類(lèi)多,代謝強(qiáng)、繁殖快,體積小、面積大,適應(yīng)強(qiáng)、易變異,,,,,,,5,1974年第8版：2000種,,1994年第9版4500種,分類(lèi)單位：界、門(mén)、綱、目、科、屬、種,伯杰氏細(xì)菌鑒定手冊(cè),微生物分類(lèi),6,微生物,非細(xì)胞形態(tài),細(xì)胞形態(tài),,病毒,原核生物,真核生物,藍(lán)細(xì)菌,藻類(lèi),原生動(dòng)物,,微生物分類(lèi),7,細(xì) 菌,,1、細(xì)菌特點(diǎn),2、細(xì)菌分類(lèi),

3、3、細(xì)菌形態(tài),4、細(xì)菌結(jié)構(gòu)-染色,5、菌落形態(tài),9、細(xì)菌繁殖,6、影響菌落因素,8、細(xì)菌芽孢,7、細(xì)菌結(jié)構(gòu),10、細(xì)菌生長(zhǎng)周期,原核生物：呈單細(xì)胞無(wú)核膜二分裂方式繁殖,,9,細(xì)菌特點(diǎn),細(xì)菌,呼吸類(lèi)型分,代謝類(lèi)型分,細(xì)胞結(jié)構(gòu)（染色）分,形態(tài)分,,球狀、桿狀、螺旋狀,自養(yǎng)型 、異養(yǎng)型,需氧、厭氧、兼性厭氧,G+、G-,,,,,,革蘭氏染色是鑒別細(xì)菌種類(lèi)的重要方法,細(xì)菌分類(lèi),10,11,球狀,弧形或螺旋形,,桿狀,細(xì)菌形態(tài),11,G+

4、,G-,,細(xì)菌結(jié)構(gòu)（染色）,12,單個(gè)細(xì)菌 顯微鏡觀(guān)察,細(xì)菌,菌落,單個(gè)細(xì)胞繁殖肉眼可見(jiàn),,細(xì)菌與菌落,,13,a.大?。篵.形態(tài)：c.隆起度：d.菌落邊緣：e.表面性狀：f.表面光澤：g.顏色透明度：,,細(xì)菌的菌落形態(tài),14,同種菌落－－特征相似生長(zhǎng)環(huán)境鄰近菌落細(xì)胞空間位置不同,影響菌落特征的因素：,,影響菌落形態(tài)因素,15,基本結(jié)構(gòu)：細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、核質(zhì),特殊結(jié)構(gòu)：莢膜、鞭毛、菌毛、芽孢,細(xì)菌結(jié)構(gòu),,1

5、6,,芽 孢,原因,條件惡劣營(yíng)養(yǎng)損失,過(guò)程,17,一個(gè)細(xì)菌 一個(gè)芽孢 一個(gè)芽孢 一個(gè)營(yíng)養(yǎng)體芽孢特點(diǎn)：壁厚密，折光強(qiáng)，不易著色，耐熱，耐殺菌劑，不易殺滅，在高酸中不易萌發(fā),,,,芽 孢,,18,小測(cè)試,滅菌是否徹底判定標(biāo)準(zhǔn)？化驗(yàn)室滅菌條件？,芽孢是否被殺滅,濕熱 121℃ 、20-30分干熱 160℃ 、 >2小時(shí),,19,20,Nt = N0 x 2n,n = 繁殖代數(shù)t = 培養(yǎng)時(shí)間N

6、0 = 細(xì)菌起始數(shù)Nt = 細(xì)菌生長(zhǎng) t時(shí)間后數(shù)量,,細(xì)菌繁殖,１個(gè)細(xì)菌２０分鐘繁殖１代，１小時(shí)后有幾個(gè)？,20,,微生物數(shù)量,時(shí)間,,衰亡期,穩(wěn)定期,對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,延緩期,,,細(xì)菌生長(zhǎng)周期,細(xì)菌能否無(wú)限繁殖下去？,21,,,,,,2、霉菌菌體結(jié)構(gòu),3、 霉菌生長(zhǎng)繁殖,4、霉菌菌落形態(tài),霉菌,1、霉菌個(gè)體形態(tài),霉菌,,,霉菌個(gè)體形態(tài)、結(jié)構(gòu),絲狀真菌，一般多細(xì)胞，由營(yíng)養(yǎng)體與繁殖體構(gòu)成,結(jié)構(gòu)：,個(gè)體形態(tài)：,23,,細(xì)胞質(zhì),24,無(wú)性

7、繁殖 （為主） 有性繁殖,,,厚垣孢子,分生孢子,胞囊孢子,,接合孢子,子囊孢子,擔(dān)孢子,TM-00027:36,霉菌繁殖,,24,霉菌菌落,,,菌落形態(tài)：大，疏松，絨毛狀，絮狀，蜘蛛網(wǎng)狀，初期無(wú)色，后期產(chǎn)生孢子有顏色,25,,,,,,2、酵母菌菌體結(jié)構(gòu),3、酵母菌生長(zhǎng)繁殖,4、酵母菌菌落形態(tài),酵母菌,1、酵母菌個(gè)體形態(tài),酵母菌,,個(gè)體形態(tài)：多數(shù)單細(xì)胞，卵圓、球形、橢圓形,,酵

8、母菌個(gè)體形態(tài)、結(jié)構(gòu),27,有性繁殖：產(chǎn)生子囊和子囊孢子,無(wú)性繁殖（為主）,,酵母菌繁殖,生長(zhǎng)周期同細(xì)菌,芽殖（普遍）,裂殖,,,,,,,,,,28,酵母菌菌落,菌落：大而厚，濕潤(rùn)、粘稠、易被挑起，多呈乳白色，少數(shù)為紅色（如紅酵母）,,29,小結(jié),,定義,特點(diǎn),分類(lèi),細(xì)菌,,微生物,,形態(tài),結(jié)構(gòu),繁殖,30,因素,營(yíng)養(yǎng),溫度,pH,滲透壓,其他,水份,,,,,,,,影響微生物生長(zhǎng)繁殖的因素,31,營(yíng)養(yǎng)元素,碳源,生長(zhǎng)因子,氮源,無(wú)機(jī)

9、鹽,,營(yíng) 養(yǎng),32,,aw:,不腐敗,,霉菌和酵母,,球菌,,G-,G+,,干燥食品,,火腿等熟奶酪醬,,,牛奶、飲料,,,,,濃縮奶蕃茄醬,甜煉乳蕃茄醬,,水 份,,aw＜0.9，大部分細(xì)菌受到抑制霉菌、酵母菌的孢子和芽孢菌強(qiáng)G+＞ G- c＞b,33,34,aw,用來(lái)衡量有多少水分可以用來(lái)生長(zhǎng),,水 份,34,種類(lèi) 最低℃ 最佳℃ 最高℃嗜熱菌 40—45 55—75

10、 60—90嗜溫菌 5—15 30—45 35—47低溫菌 -5—5 25—30 30—35 嗜冷菌 -5—5 12—15 15—20,,對(duì)溫度適應(yīng)能力分,溫 度,35,36,,,酸度(pH值),,4.6,pH,0 2 4 6 7 9 14,,,,

11、,,,,,,,,,,,,,,,,原料奶、純牛奶,細(xì)菌,,,霉菌,,,酵母,,,,TM-00027:54,PH<4.6 高酸產(chǎn)品,PH＞4.6 低酸產(chǎn)品,,,,,,酸性乳飲料,,,,36,,,厭氧菌,,,好氧菌,,兼性厭氧菌,,微氧菌,,氣 體,37,滲透壓,,等滲壓,高滲壓,代謝活動(dòng)正常進(jìn)行,代謝活動(dòng)呈抑制狀態(tài)甚至死亡,低滲壓,細(xì)胞吸水過(guò)分膨大破裂,,,,,38,,原奶微生物,39,,控制,產(chǎn)品無(wú)微生物,細(xì)菌總數(shù)：,

12、耐熱芽孢,嗜冷菌,,,實(shí)際需要控制的微生物,細(xì)菌總數(shù),,主要：G+球菌（微球菌、鏈球菌）危害：加快產(chǎn)酸；蛋白不穩(wěn)定；貨架縮短來(lái)源：牛體、擠奶用具、盛乳容器,耐熱芽孢,,主要：G+桿菌 （蠟狀、枯草、梭狀、棒狀）危害：質(zhì)量缺陷；有致病性；食物中毒來(lái)源：土壤、水、塵埃、飼料,嗜冷菌,,42,主要： G-桿菌 （假單胞菌占50%）危害：釋放蛋白酶、脂肪酶；產(chǎn)生苦味；變質(zhì)來(lái)源： 擠奶、儲(chǔ)奶設(shè)備；運(yùn)輸、加工、儲(chǔ)藏污染；巴氏殺

13、菌后污染,控制措施,,奶站車(chē)間衛(wèi)生好，清洗消毒要做到,巴氏殺菌不能少，超高溫處要有效,凈化處理很主要，過(guò)濾能夠除芽孢,巴氏消毒：殺滅90％細(xì)菌、全部病原菌高壓蒸汽滅菌：殺滅全部微生物,管路嚴(yán)密無(wú)死角，產(chǎn)品質(zhì)量絕對(duì)高,回顧,,微生物學(xué)基本知識(shí),微生物定義,微生物特點(diǎn),微生物分類(lèi),聯(lián)系實(shí)際,影響因素,44,,一,二,第二單元 消毒、滅菌方式,45,消毒、滅菌概念,,,,,概念,殺死所有微生物包括芽孢和繁殖體,殺死病原微生物,阻止或抑制

14、微生物生長(zhǎng)繁殖,無(wú)活的微生物,,滅菌,消毒,防腐,無(wú)菌,,46,滅菌和消毒前提條件：清洗干凈!,,消毒、滅菌——清洗,47,,,,,熱力滅菌,48,,微生物,蛋白變性,代謝故障,,死亡,,,,高溫,熱力滅菌原理,49,濕熱滅菌優(yōu)點(diǎn),水蒸汽穿透力強(qiáng),蒸汽凝結(jié)成水，放出潛熱，提高物體溫度,濕熱滅菌比干熱效果好,菌體蛋白質(zhì)吸收水分易凝固,,50,,化學(xué)消毒,51,,病原微生物,蛋白,酶類(lèi),細(xì)胞破裂溶解,變性沉淀,系統(tǒng)破壞,破壞細(xì)胞膜,,,,

15、,,,,殺死,,對(duì)非病原微生物不能全部殺死,消毒防腐劑作用原理,52,紫外線(xiàn)消毒原理,,菌體,,吸收紫外線(xiàn),損壞核酸中DNA,致死,,空氣,紫外線(xiàn)照射,,產(chǎn)生臭氧,,殺死菌體,53,回顧,,消毒、滅菌方式,概念,種類(lèi),選用,54,,玻璃器皿清洗、包扎,培養(yǎng)基分類(lèi)及制備,一,二,第三單元 培養(yǎng)基及器皿準(zhǔn)備,55,新器皿,未污染,已污染,有油圬,用過(guò)的載玻片,,玻璃器皿清洗、包扎,清洗,包扎,,56,培養(yǎng)基,化學(xué)成分,用途,物理狀態(tài),半

16、固體,液體,固體,增殖,鑒別,選擇,半合成,合成,天然,,基礎(chǔ),加富,厭氧,特殊,培養(yǎng)基分類(lèi)及制備,57,容器選擇狀態(tài)觀(guān)察pH驗(yàn)證滅菌存放,注意事項(xiàng),,培養(yǎng)基制備,58,回顧,,玻璃器皿清洗,培養(yǎng)基分類(lèi)及制備,培養(yǎng)基及器皿準(zhǔn)備,59,,第四單元 微生物檢驗(yàn)基本方法,60,一個(gè)親代細(xì)胞 一個(gè)菌落,檢樣 培養(yǎng)基,,接種和培養(yǎng),,,接種,,純培養(yǎng),,分離培養(yǎng),純培養(yǎng)過(guò)程,,61,獲得單個(gè)菌落,,傾注,涂布,劃線(xiàn),1.斜線(xiàn)