腹瀉病毒聯(lián)合檢測(cè)意義_第1頁
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1、腹瀉病毒聯(lián)合檢測(cè)的臨床意義,腹瀉病概述和腹瀉病毒檢測(cè)意義熒光免疫法及優(yōu)勢(shì),Part1 腹瀉病概述和腹瀉病毒檢測(cè)意義,腹瀉病概述腹瀉病發(fā)病趨勢(shì)病毒等其他感染性腹瀉現(xiàn)狀病毒性腹瀉診斷臨床意義,腹瀉病概述,腹瀉病為多種病原、多種因素引起的以大便次數(shù)增多和大便性狀改變?yōu)樘攸c(diǎn)的一組疾病,是兒童患病和死亡的主要原因,也是營(yíng)養(yǎng)不良的重要原因[1]。 我國(guó)每年有8.36億人次患腹瀉,其中5歲以下小兒占3億次。2005年中國(guó)小兒因急性腹

2、瀉死亡人數(shù)為160萬[1]。,[1]《兒童腹瀉病診治專家共識(shí)》中華醫(yī)學(xué)會(huì)兒科分會(huì)消化學(xué)組、中華醫(yī)學(xué)會(huì)兒科分會(huì)感染學(xué)組、中華兒科雜志通訊作者:陳潔浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院兒童醫(yī)院(杭州310003),腹瀉病發(fā)病趨勢(shì),[2]全國(guó)法定傳染病(腹瀉類)發(fā)病數(shù)據(jù)(數(shù)據(jù)來源:衛(wèi)計(jì)委網(wǎng)站),病毒等其他感染性腹瀉現(xiàn)狀,病毒等其他感染性腹瀉現(xiàn)狀,2006年中國(guó)共報(bào)告其他感染性腹瀉病例741809例,報(bào)告發(fā)病率為56.73/0萬。既往調(diào)查農(nóng)村地區(qū)人群腹瀉發(fā)病率為

3、1220/10萬-3360/10萬,就診率為6.3%-50%,日本,2005年3046家兒科定點(diǎn)監(jiān)測(cè)的感染性腹瀉病例就達(dá)941572例,分析:中國(guó)其他感染性腹瀉的報(bào)告病例數(shù)與實(shí)際發(fā)病水平相差甚大[4]。,[4]《中國(guó)感染性腹瀉監(jiān)測(cè)策略的思考與建議 》作者單位: 中國(guó)疾病預(yù)防控制中心疾控處應(yīng)急辦腸道傳染病防制辦 公室 ,作者: 張靜, 副研究員, 主要從事傳 染病監(jiān)測(cè)與控制工作,病毒等其他感染性腹瀉現(xiàn)狀,結(jié)果2011年共報(bào)告其他感染性

4、腹瀉患者836591例,發(fā)病率為62.39/10萬。病例發(fā)病年齡主要集中在0-5歲組,發(fā)病率為447.06/10萬(436098例),占總數(shù)的52.3%(436098/836591),報(bào)告病例發(fā)病有2個(gè)高峰,夏季(第23-35周),占34.33%(287231/836591);冬季(第43-52周),占23.54%(196939/836591)。 報(bào)告的30起疫情中,5起有明確病原學(xué)診斷結(jié)果,其中,4起為諾如病毒引起。2011年

5、其他感染性腹瀉確診病例占報(bào)告病例數(shù)的7.16%(59929/836591),其中,病毒感染56687例,細(xì)菌感染3242例,[5]《2011年中國(guó)其他感染性腹瀉監(jiān)測(cè)現(xiàn)狀分析》《中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志》 CAS CSCD 2013年第4期 328-332頁,共5頁,病毒性腹瀉診斷臨床意義,目前最常見的腹瀉病毒有4種,其中以輪狀病毒、腸道腺病毒最為常見。病毒性腹瀉中40%-60%由輪狀病毒感染引起,其次是腸道腺病毒、諾如病毒、星狀病毒感染[6]。

6、,[6]《病毒性腹瀉的研究進(jìn)展》雷炳鈞,華西醫(yī)科大學(xué) ;《臨床內(nèi)科雜志》1998年第4期;,病毒性腹瀉診斷臨床意義,腹瀉病臨床癥狀相仿,病毒性腹瀉的治療方案與細(xì)菌等引起的腹瀉有很大不同。有報(bào)道發(fā)現(xiàn)雙重病毒或多重病毒感染的腹瀉,其癥狀更嚴(yán)重,病情進(jìn)展快,導(dǎo)致的死亡率更高。 由于腸道傳染病的臨床表現(xiàn)和常用的輔助檢查缺乏明顯的特異性,因此存在著疾病早期病原體診斷不明確的危險(xiǎn)因素,從而存在著疾病早期濫用抗生素、生病期延長(zhǎng)而增加患者痛苦和

7、經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)的客觀因素。 因此,針對(duì)輪狀病毒、腸道腺病毒研制快速準(zhǔn)確的診斷技術(shù),對(duì)指導(dǎo)臨床對(duì)癥治療和避免濫用抗生素有重要意義,特別是對(duì)嬰幼兒腹瀉診斷上更有意義。,[6]《病毒性腹瀉的研究進(jìn)展》雷炳鈞,華西醫(yī)科大學(xué) ;《臨床內(nèi)科雜志》1998年第4期;,病毒性腹瀉診斷臨床意義,1、為疾病診斷和鑒別診斷、臨床療效觀察和預(yù)后提供依據(jù)符合循證醫(yī)學(xué)原則,提升醫(yī)療診治科學(xué)性。癥狀學(xué)診治轉(zhuǎn)變?yōu)椴∫驅(qū)W診治客觀上降低抗生素濫用、縮短不必要的病程

8、減少不必要的病患痛苦、降低不必要的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)不同的病因,不同的自然病史,不同的臨床相,不同的預(yù)后轉(zhuǎn)歸判斷,病毒性腹瀉診斷臨床意義,輪狀病毒最常見的致腹瀉病毒,常溫穩(wěn)定,在環(huán)境表面存活數(shù)日,糞便中可存活數(shù)月,55攝氏度30分鐘滅活糞口途徑傳染,秋冬季高發(fā),起病急,潛伏期1~2天,癥狀期3~8天,發(fā)熱嘔吐腹痛,噴射性水樣腹瀉,易導(dǎo)致脫水病程自限,多數(shù)預(yù)后良好,嬰幼兒較重,少數(shù)脫水死亡首次感染可減少再次感染幾率,并減輕再次感染的

9、嚴(yán)重性,各型無交叉免疫,可多次感染,病毒性腹瀉診斷臨床意義,輪狀病毒輪狀病毒(Rotavirus,簡(jiǎn)稱RV)是一種雙鏈核糖核酸病毒,屬于呼腸孤病毒科。它是嬰兒與幼兒腹瀉的單一主因,幾乎世界上每個(gè)大約五歲的小孩都曾感染過輪狀病毒至少一次。然而,每一次感染后人體免疫力會(huì)逐漸增強(qiáng),后續(xù)感染的影響就會(huì)減輕,因而成人就很少受到其影響。輪狀病毒總共有七個(gè)種,以英文字母編號(hào)為A、B、C、D、E、F與G。其中,A種是最為常見的一種,而人類輪狀病毒感染

10、超過90%的案例也都是該種造成的。,病毒性腹瀉診斷臨床意義,輪狀病毒輪狀病毒是借由糞口途徑傳染的。它會(huì)感染與小腸連結(jié)的腸黏膜細(xì)胞(enterocyte)并且產(chǎn)生腸毒素(enterotoxin),腸毒素會(huì)引起腸胃炎,導(dǎo)致嚴(yán)重的腹瀉,有時(shí)候甚至?xí)驗(yàn)槊撍鴮?dǎo)致死亡。雖然輪狀病毒于1973年就被由澳洲的露絲·畢夏普(Ruth Bishop)所發(fā)現(xiàn),而且造成嬰兒與幼兒總計(jì)超過50%以上因?yàn)閲?yán)重腹瀉而住院治療的案例,但是在公共衛(wèi)生社群

11、中它仍然沒有被廣泛地重視,特別是在發(fā)展中國(guó)家更是如此。除了對(duì)人類健康的影響之外,輪狀病毒也會(huì)感染動(dòng)物,是家畜的病原體之一。,病毒性腹瀉診斷臨床意義,腸道腺病毒對(duì)溫度敏感,對(duì)含氯劑和脂溶劑不敏感,抗紫外線,認(rèn)真洗手糞口途徑傳染終年可發(fā)病,冬春多發(fā),病程長(zhǎng),多超過一周,腹瀉嘔吐,可多器官受累,心肌炎,CNS自限,預(yù)后良好,腺病毒是腸套疊的重要原因,40%的腸套疊與腺病毒有關(guān)感染后可獲得持久免疫力,很少二次感染,病毒性腹瀉診斷臨

12、床意義,腸道腺病毒腺病毒(adenovirus)是一種沒有包膜的直徑為70~90 nm的顆粒,由252個(gè)殼粒呈廿面體排列構(gòu)成。每個(gè)殼粒的直徑為7~9 nm。衣殼里是線狀雙鏈DNA分子,約含35 000 bp,兩端各有長(zhǎng)約100 bp的反向重復(fù)序列。由于每條DNA鏈的5'端同相對(duì)分子質(zhì)量為55X103Da的蛋白質(zhì)分子共價(jià)結(jié)合,可以出現(xiàn)雙鏈DNA的環(huán)狀結(jié)構(gòu)。,病毒性腹瀉診斷臨床意義,腸道腺病毒腺病毒對(duì)呼吸道、胃腸道、尿道和膀胱、

13、眼、肝臟等均可感染,人腺病毒約1/3的已知血清型通常與人類疾病相關(guān),但一種血清型可引起不同的臨床疾患;相反,不同血清型也可引起同一種疾患。,病毒性腹瀉診斷臨床意義,腸道腺病毒胃腸炎許多腺病毒在腸道細(xì)胞中復(fù)制,隨糞便排出,但大多血清型與胃腸道疾病無關(guān)。而40型和41型腺病毒可引起嬰幼兒與年少(4歲以下)兒童的胃腸炎,致腹痛、腹瀉。C組腺病毒能引起某些嬰幼兒腸套疊。,病毒性腹瀉診斷臨床意義,腸道腺病毒引起其他疾患腺病毒11、12型能

14、引起兒童急性出血性膀胱炎,尿中出現(xiàn)病毒。37型可引起女性宮頸炎和男性尿道炎,常由性傳播感染。在免疫功能低下者可引起偶發(fā)或嚴(yán)重的病毒感染,尤其在器官移植病人中發(fā)生嚴(yán)重呼吸道感染和病毒性肝炎,多由1、5和7型腺病毒引起。艾滋病患者可感染多種血清型腺病毒,并能出現(xiàn)抗原性介于中間的雜合型毒株,而且常為致死性腺病毒感染。主要原因是腺病毒的E1A蛋白可反式激活HIV的轉(zhuǎn)錄,加速HIV的復(fù)制。臨床發(fā)現(xiàn)37%的艾滋病患者病毒性腹瀉是由腺病毒所致。,病毒

15、性腹瀉診斷臨床意義,腸道腺病毒腺病毒感染后可獲得對(duì)同型的持久免疫力與絕大多數(shù)呼吸道感染的病原相比,機(jī)體對(duì)腺病毒的再感染能產(chǎn)生有效的免疫。起保護(hù)作用的是體內(nèi)產(chǎn)生的循環(huán)中和抗體。正常的健康成人一般也具有多型的抗體。約40%~60%的6~15歲的人具有1、2和5型中和抗體,但3、4和7型抗體很少。母親的抗體能保護(hù)嬰兒免除嚴(yán)重的腺病毒呼吸道感染。,病毒性腹瀉診斷臨床意義,諾如病毒諾如病毒,又稱諾瓦克病毒(Norwalk Viruses,N

16、V)是人類杯狀病毒科(Human Calicivirus,HuCV)中諾如病毒(Norovirus,NV)屬的原型代表株。它是一組形態(tài)相似、抗原性略有不同的病毒顆粒。,病毒性腹瀉診斷臨床意義,諾如病毒糞口途徑傳染,水源、食物污染易導(dǎo)致爆發(fā)流行潛伏期1~2天,癥狀持續(xù)1~2天,惡心嘔吐腹部痙攣性腹瀉,普遍感到病情嚴(yán)重,一日內(nèi)多次劇烈嘔吐預(yù)后良好抗體沒有免疫作用,可反復(fù)感染,病毒性腹瀉診斷臨床意義,諾如病毒諾如病毒最早是從196

17、8年在美國(guó)諾瓦克市暴發(fā)的一次急性腹瀉患者糞便中分離的病原。2002年8月第八屆國(guó)際病毒命名委員會(huì)批準(zhǔn)名稱為諾如病毒,它與在日本發(fā)現(xiàn)的札幌樣病毒,合稱為人類杯狀病毒。諾如病毒感染性腹瀉在全世界范圍內(nèi)均有流行,全年均可發(fā)生感染,感染對(duì)象主要是成人和學(xué)齡兒童,寒冷季節(jié)呈現(xiàn)高發(fā)。美國(guó)每年在所有的非細(xì)菌性腹瀉暴發(fā)中,60-90%是由諾如病毒引起。荷蘭、英國(guó)、日本、澳大利亞等發(fā)達(dá)國(guó)家也都有類似結(jié)果。在中國(guó)5歲以下腹瀉兒童中,諾如病毒檢出率為15%

18、左右,血清抗體水平調(diào)查表明中國(guó)人群中諾如病毒的感染亦十分普遍。,病毒性腹瀉診斷臨床意義,諾如病毒“諾如病毒”感染性腹瀉屬于自限性疾病,沒有疫苗和特效藥物,公眾搞好個(gè)人衛(wèi)生、食品衛(wèi)生和飲水衛(wèi)生是預(yù)防本病的關(guān)鍵,要養(yǎng)成勤洗手、不喝生水、生熟食物分開,避免交叉污染等健康生活習(xí)慣。,病毒性腹瀉診斷臨床意義,諾如病毒諾如病毒遺傳高度變異,在同一時(shí)期和同一社區(qū)內(nèi)可能存在遺傳特性不同的毒株流行。諾如病毒抗體沒有顯著的保護(hù)作用,尤其是沒有長(zhǎng)期免疫保

19、護(hù)作用,極易造成反復(fù)感染。諾如病毒有許多共同特征:直徑約為26~35nm,無包膜,表面粗糙,球形,呈二十面體對(duì)稱;從急性胃腸炎病人的糞便中分離,不能在細(xì)胞或組織中培養(yǎng),也沒有合適的動(dòng)物模型;基因組為單股正鏈RNA;在氯化銫密度梯度中的浮力密度為1.36~1.41g/cm3;電鏡下缺乏顯著的形態(tài)學(xué)特征,負(fù)染色電鏡照片顯示,NV是具有典型的羽狀外緣,表面有凹痕的小圓狀結(jié)構(gòu)病毒。,病毒性腹瀉診斷臨床意義,諾如病毒諾如病毒基因組全長(zhǎng)約7.7

20、kb,包含3個(gè)開放閱讀框(Open readding frames,ORFs)。ORF1編碼非結(jié)構(gòu)蛋白,包括RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase,RdRp);ORF2和ORF3分別編碼主要(VP1)和次要(VP2)衣殼蛋白。VP1蛋白結(jié)構(gòu)上可分為S和P區(qū)兩個(gè)相鄰的區(qū)域,其中S區(qū)形成內(nèi)殼,構(gòu)成VP1的底座;P區(qū)形成拱樣結(jié)構(gòu)突出于內(nèi)殼外。P區(qū)可進(jìn)一步分為P1和P2兩個(gè)亞區(qū),后者位于VP1的最外層,高度變異,

21、目前認(rèn)為是免疫識(shí)別和受體結(jié)合的關(guān)鍵部位。ORF1/ORF2的重組及P2區(qū)的變異大大豐富了NV的遺傳多樣性。根據(jù)VP1序列的同源性,諾如病毒可分為GI~GV五個(gè)基因群(Genogroup),其中引起人類感染的主要是GI和GII群,基因群可進(jìn)一步分為不同的基因型(Genotype)。自1995~1996年諾如病毒首次導(dǎo)致世界性大流行以來,GII群中的第4基因型GII.4,一直在世界范圍內(nèi)的流行中占據(jù)主導(dǎo)地位,且?guī)缀趺扛魞伞⑷?,GII.4便

22、會(huì)引發(fā)一次大范圍流行,同時(shí)出現(xiàn)一種新的變異株。,病毒性腹瀉診斷臨床意義,諾如病毒傳播途徑諾如病毒感染性強(qiáng),以腸道傳播為主,可通過污染的水源、食物、物品、空氣等傳播,常在社區(qū)、學(xué)校、餐館、醫(yī)院、托兒所、孤老院及軍隊(duì)等處引起集體暴發(fā)。疾控專家稱,病程為自限性,一般2~3天即可恢復(fù)。,病毒性腹瀉診斷臨床意義,諾如病毒感染者糞便和嘔吐物中可以發(fā)現(xiàn)諾如病毒,可以通過幾種方式感染諾如病毒:1、食用諾如病毒污染的食物或飲用諾如病毒污染的飲料;

23、 因?yàn)椴《竞苄?,而且攝入不到100個(gè)病毒就能使人發(fā)病。接觸諾如病毒污染的物體或表面,然后手接觸到口。2、直接接觸感染者,如照顧病人、與病人共餐或使用相同的餐具也可引起傳播。直接接觸到感染者(如照顧病人,與病人同餐或使用相同的餐具)。3、食物可以被污染的手、嘔吐物或糞便污染的物體表面直接污染,或者通過附近嘔吐物細(xì)小飛沫污染。盡管病毒在人體外很難繁殖,但是一旦存在食品或水中,就能引起疾病。[5] 4、有些食品在送至飯店或商店前可能被污

24、染。一些暴發(fā)是由于食用從污染的水中捕獲的牡蠣。其它產(chǎn)品如色拉和冰凍水果也可能在來源地被污染。,病毒性腹瀉診斷臨床意義,諾如病毒“諾如病毒”感染性腹瀉是一種急性腸道傳染病,由“諾如病毒”引發(fā),具有發(fā)病急、傳播速度快、涉及范圍廣等特點(diǎn),癥狀多表現(xiàn)為嘔吐、腹瀉。潛伏期多在24~48h,最短12h,最長(zhǎng)72h。感染者發(fā)病突然,主要癥狀為惡心、嘔吐、發(fā)熱、腹痛和腹瀉。兒童患者嘔吐普遍,成人患者腹瀉為多,24h內(nèi)腹瀉4~8次,糞便為稀水便或水樣

25、便,無黏液膿血。大便常規(guī)鏡檢WBC<15,未見RBC。原發(fā)感染患者的嘔吐癥狀明顯多于續(xù)發(fā)感染者,有些感染者僅表現(xiàn)出嘔吐癥狀。此外,也可見頭痛、寒顫和肌肉痛等癥狀,嚴(yán)重者可出現(xiàn)脫水癥狀。,病毒性腹瀉診斷臨床意義,病毒性腹瀉診斷臨床意義,,病毒性腹瀉診斷臨床意義,星狀病毒人星狀病毒于1975年從腹瀉嬰兒糞便中分離得到,球形,直徑28-35nm,無包膜,電鏡下表面結(jié)構(gòu)呈星形,有5~6個(gè)角。核酸為單正鏈RNA,7.0kb,兩端為非編碼區(qū)

26、,中間有三個(gè)重疊的開放讀碼框架,病毒性腹瀉診斷臨床意義,星狀病毒該病毒呈世界性分布,糞-口傳播,是引起嬰幼兒、老年人及免疫功能低下者急性病毒性腸炎的重要病原之一,其致病性已日益受到重視,人類感染腺病毒主要癥狀是嚴(yán)重腹瀉,伴隨發(fā)熱、惡心、嘔吐。本病為自愈性疾病,大部分患者在出現(xiàn)癥狀2-3天時(shí),癥狀會(huì)逐漸減輕,但也有極少數(shù)癥狀加重,造成脫水。,病毒性腹瀉診斷臨床意義,預(yù)防目前使用的疫苗僅有用于預(yù)防雞星狀病毒疾病,為滅活苗。人類星狀病毒疾

27、病的疫苗至今沒有研制成功。但加強(qiáng)鍛煉有利于抵抗該類疾病。,病毒性腹瀉診斷臨床意義,星狀病毒冬季多發(fā)潛伏期3~4天,癥狀期3~5天癥狀輕,少見脫水與遷延性腹瀉有關(guān),病毒性腹瀉診斷臨床意義,為流行病學(xué)監(jiān)測(cè)積累資料在人群中的傳播規(guī)律,為臨床醫(yī)生提供相對(duì)可靠的病原體感染譜,為經(jīng)驗(yàn)性診斷和治療提供科學(xué)依據(jù)制定針對(duì)性的公共衛(wèi)生應(yīng)對(duì)策略: 隔離傳染源: 切斷傳播途徑:環(huán)境衛(wèi)生,個(gè)人衛(wèi)生,認(rèn)真洗手等等 保護(hù)易感人群:疫苗

28、 明確病因?qū)W診斷可以消除不必要的恐慌:尤其是暴發(fā)疫情,病毒性腹瀉診斷臨床意義,為科學(xué)研究提供可靠數(shù)據(jù)科研需要大量的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)的支持,臨床和流行病學(xué)資料的積累,促進(jìn)研究工作的深入開展為提高醫(yī)療單位、相關(guān)科室的科研水平提供工具、方法學(xué)保證,Part2 熒光免疫法及優(yōu)勢(shì),臨床常見的病原學(xué)檢測(cè)方法,免疫學(xué)方法,因檢測(cè)準(zhǔn)確、速度快、應(yīng)用面廣得到臨床門診青睞!,臨床常見的病原學(xué)檢測(cè)方法,免疫學(xué)方法分很多種,包括:酶聯(lián)免疫檢測(cè)、膠體金法、

29、 熒光免疫法。,臨床常見的病原學(xué)檢測(cè)方法,臨床常見的病原學(xué)檢測(cè)方法,酶聯(lián)免疫檢測(cè)方法技術(shù)特點(diǎn) 技術(shù)特點(diǎn)是用酶來標(biāo)記特定的抗體,在檢測(cè)過程中,如果樣本中有相應(yīng)的病毒,帶有酶標(biāo)記的抗體就會(huì)與其結(jié)合,利用酶的催化作用,就可以檢測(cè)出病毒。優(yōu)缺點(diǎn) 酶聯(lián)免疫檢測(cè)方法具有非常好的優(yōu)點(diǎn),靈敏度高,檢測(cè)準(zhǔn)確;缺點(diǎn)是操作相對(duì)復(fù)雜,一種試劑只能檢測(cè)一種病毒,檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng);尤其是對(duì)腹瀉病毒的檢測(cè)具有很大的缺點(diǎn),因?yàn)椋嘎?lián)免疫檢測(cè)試劑一般一個(gè)檢測(cè)板上有9

30、6個(gè)試劑位,而這96個(gè)試劑位不能獨(dú)立使用,醫(yī)院為了降低檢測(cè)成本,一般都會(huì)積累樣本到一定數(shù)量才進(jìn)行項(xiàng)目檢測(cè),而對(duì)于腹瀉病人來說,需要快速進(jìn)行檢測(cè),因此,該方法不能夠適應(yīng)腹瀉病毒快速檢測(cè)的要求。,臨床常見的病原學(xué)檢測(cè)方法,膠體金方法技術(shù)特點(diǎn):基于免疫金染色法技術(shù)開發(fā)的試劑盒技術(shù)特點(diǎn)是用特定直徑的膠體金顆粒來標(biāo)記病毒抗體,在檢測(cè)過程中分,如果樣本中有病毒,就會(huì)與金標(biāo)記的抗體進(jìn)行結(jié)合,使其分子大小和分子量發(fā)生改變,同時(shí)顏色也會(huì)發(fā)生相應(yīng)的變化,

31、可以用肉眼觀察來判斷病毒類型。優(yōu)缺點(diǎn):優(yōu)點(diǎn)是簡(jiǎn)便,迅速;膠體金的技術(shù)缺點(diǎn)是自動(dòng)化水平低,靈敏度相對(duì)較低,主要是肉眼判別檢測(cè)結(jié)果,因此檢測(cè)結(jié)果容易受到人為因素干擾,特別是低濃度樣本更容易產(chǎn)生誤判,同時(shí)結(jié)果穩(wěn)定時(shí)間過短,假陽性率高。,臨床常見的病原學(xué)檢測(cè)方法,熒光免疫法技術(shù)特點(diǎn) : 利用免疫層析技術(shù),采用雙抗體夾心法檢測(cè)腹瀉病毒的抗原。當(dāng)待測(cè)樣本加入測(cè)試卡加樣孔后,待測(cè)樣本中病毒抗原與熒光標(biāo)記的抗體形成反應(yīng)復(fù)合物,在層析作用下,反應(yīng)復(fù)

32、合物沿硝酸纖維膜向前移動(dòng),分別被硝酸纖維膜檢測(cè)區(qū)上預(yù)先包被的單克隆抗體捕獲,在檢測(cè)區(qū)上形成反應(yīng)帶,使用熒光免疫分析儀檢測(cè)出反應(yīng)線上的熒光值,當(dāng)熒光值等于或高于檢出限時(shí),顯示為陽性,當(dāng)熒光值低于檢出限時(shí)顯示為陰性,從而實(shí)現(xiàn)檢測(cè)病毒的目的。優(yōu)缺點(diǎn):優(yōu)點(diǎn)是半自動(dòng),簡(jiǎn)單、快速、多病毒聯(lián)合檢測(cè);檢測(cè)結(jié)果半定量,避免人為肉眼主觀誤讀,穩(wěn)定時(shí)間比膠體金多一倍;方便連接醫(yī)院LIS、HIS系統(tǒng)。,檢測(cè)原理---雙抗體夾心法,熒光免疫法(雙抗體夾心法),

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