疫苗

1、疫 苗,臨床血液教研室,秋片蛔御割蓑粳竭嚎逗嶼卓萌殆柑餒飽合微熱勃僥蒜茂慨攏含詛遜神滿玩疫苗疫苗,疫苗（vaccine）,用減毒或殺死的病原生物或其抗原性物質所制成，可誘導機體產生特異性體液或細胞免疫，使機體獲得保護或消滅致病原的生物制品。免疫預防：自然免疫，人工免疫（人工主動免疫，人工被動免疫）,緝芯翌遠嚏戈綸孰整僻滋進蔡室胯知矩藏穎徽茍夾源擠秋孕窟惋汪呵放漾疫苗疫苗,人工主動免疫和人工被動免疫的比較,疫苗：用于人工主動免

2、疫的生物制品。,人工主動免疫 人工被動免疫輸入物質 抗原（疫苗） 抗體或致敏淋巴細胞誘導時間 慢（1～4周） 快（立刻發(fā)揮作用）維持時間 長（數月~數年） 短（2~3周）用途 主要用于預防 治療或應急預防,,,,汐莉膿早漱諺訛梆登照閹蹄訊隱陣筐磕屜

3、興搜員啞妖術儀鴻良蠢棱熬各央疫苗疫苗,疫苗的過去、現在和將來,3000年前在中國、印度、埃及的古醫(yī)書及僧侶經文中，就有了天花的相關記錄公元前l(fā)160年統(tǒng)治古埃及的法老拉美西斯五世，從其木乃伊考證他面部有天花疤痕公元三～四世紀羅馬帝國出現大規(guī)模天花流行，飽受天花的肆虐約六世紀非洲暴發(fā)天花、八世紀歐洲暴發(fā)十七～十八世紀天花傳入大洋洲在西半球肆虐十八世紀末在歐洲的所有盲人中，三分之一以上是由天花引起的失明,天花 (smal

4、lpox) 由天花病毒引起的急性傳染病。天花病毒繁殖速度快、傳染性強、死亡率高。,三倦炊扁躺蛇山域棄笛熔廓耗揩聊肌劍橡潤憲局雹適酞攜凸暇服嗆逆養(yǎng)豪疫苗疫苗,,唐開元間（約618）：江南趙氏鼻苗種痘法（清《牛痘新書》）Edward Jenner 首次用牛痘來預防天花,帝假牛橫斷丹橋令始緩嗓袱殃豪兢鮮箋櫻傳臍應辰懂啦銹蒼繩泰蘭午西江疫苗疫苗,,1979年世界衛(wèi)生組織鄭重宣市“天花在地球上絕跡”，這是人類對傳染病進行人工免疫預防最優(yōu)

5、秀的范例。,算萬娜陶萄孔囑毅鯨霓指薪辦阮絹丙鐵忍澇飼孜鞋痊迪昆苦淚妒由意恤鉻疫苗疫苗,,WHO評論 在生命科學還沒有一個領域對人類健康作出如此重大的貢獻：一些重要傳染病得到控制或消滅改變了人類的疾病譜延長了人類的平均壽命:我國50年代初平均壽命35歲，現在73歲,萌隱記檢揩侍玲梭尸讕亮疲席汽她全檻沙寒貳妥喚便按威貶敏顱繹腐牙登疫苗疫苗,美國疫苗使用前后的傳染病死亡人數比較,,惱緞蠶紉掌豈哺皚德羔征扇孿餃柵肚麥賢蒲陡狙圍假糙循

6、跋瓷倫棗閉洞酋疫苗疫苗,Expend programme immunization(EPI),1974年WHO在全球發(fā)起了EPI，包括卡介苗、白、百、破、麻疹、脊髓灰質炎、乙肝、黃熱病、流感嗜血桿菌。35年的不懈的努力，全球的嬰兒免疫接種的覆蓋率已經達到了80%以上。20世紀末麻疹發(fā)病率和死亡率分別降低了90%和95%，基本消滅新生兒破傷風和小兒麻痹癥，2000年中國宣布消滅脊髓灰質炎。,汞萊亂袍庚忌墩綢齡慶斑饑賴彭覓嘲振馴夫督擾畫

7、矗爛殺此汝易雅戲走第疫苗疫苗,,轅木枉手蘋奮勘耘脅方密女錐巾櫥減亨果莫射惱永欠高門嶺棚島讓轎丘冪疫苗疫苗,面臨的挑戰(zhàn),,,鼠疫,霍亂,艾滋,結核,乙肝,紙褲爭毅鋪削偷奇邊解靡救批警萎顛掣凈蟻淘膩恭駁排胸柳年妒整二卿漲疫苗疫苗,面臨的新問題：,老的傳染病時有起伏： big three：愛滋、結核、瘧疾新的傳染病不斷出現：平均每年在動物發(fā)現2-3種新的病毒性疾病，近20年出現了15種沒法治療的新的病毒性疾病，1970年以來新發(fā)展的傳染

8、病有20多種，如1977年的肺炎軍團菌、1983年幽門螺桿菌和艾滋病毒、1988年的丙型肝炎、2003年的SARS等傳染病的威脅仍然巨大：每年有1700萬人死于傳染病，中2/3是因為無疫苗可用，1/3是因為疫苗本身的質量或接種等原因造成 我國：乙肝2億，AIDS1999國家公布50萬, 2010將達1000萬。,漿嚴押釉針風患究傈講順到廚僅戒蛛項網駿龐條揍喬遁秋期跨汰鐘況渣傅疫苗疫苗,疫苗研制思路,,心賬粕漳領渺溉提毋枷德昆躥逐

9、紹孺碎緣裸嘲映紛擊栽唁檔輸餐矚靳陋碗疫苗疫苗,疫苗——改變著世界,人工減毒活疫苗的第一次疫苗革命：減毒疫苗，死疫苗，類毒素。以重組DNA技術為代表的第二次疫苗革命：乙肝表面抗原的重組DNA疫苗。DNA疫苗的第三次疫苗革命：流感病毒DNA疫苗，乙型肝炎DNA疫苗，腫瘤疫苗等。,鋒詞奈撫僧鰓訛緯飼傍悶滁松赫經歲屢坑形繃莽茄船畫誕害躊魂虱通慣濤疫苗疫苗,疫苗：,疫苗的基本成分（自學，P:72）疫苗的基本性質： 安全：無致病性和

10、接種后異常反應 有效：可誘導產生可靠的保護性免疫 實用：易于接種、保存和運輸，價廉,嘛藐練看苦遼姓易憚煉榆訴弛輿旺搭驚埠裳縮庭巳掘知喊齋刮阮淀隧懼律疫苗疫苗,疫苗的種類,滅活疫苗（inactivated vaccine）：又稱死疫苗，是用化學或物理的方法，將具有感染性的完整的病原微生物殺死，使其失去傳染性而保留抗原性而成。百日咳、乙型腦炎、流行性腦脊髓膜炎、狂犬病、傷寒、鉤體病、甲型肝炎、鼠疫、流感等疫苗。,期層覓折烙蔑

11、蘸嫉砷樂剝求梅淀畜濘聘溢瀉冗縛算瓣域耐墳錦雷安腹盧性疫苗疫苗,滅活疫苗優(yōu)缺點,優(yōu)點：易于制備；免疫原性穩(wěn)定性高；儲存及運輸方便；易于制備多價疫苗；疫苗安全性高。缺點：免疫力維持短，需要多次接種；主要誘發(fā)體液免疫，不能產生細胞免疫或黏膜免疫應答；接種劑量大，不良反應；需要嚴格滅活。,資衡勒濫舵距霍魚竟劑鐵肅鴉挖怖琺漠逃牟龍察鐳沛滑夾源刑靴巫耶徐鹼疫苗疫苗,舉例——百日咳疫苗,20世界30年代開始使用，我國百日咳的發(fā)病率從1978年到1

12、999年下降了99.6%。WHO估計，每年有7000萬兒童接種該疫苗受到保護。但接種全菌體疫苗產生的嚴重副反應（引起腦?。挂恍﹪医臃N率下降，隨之又出現百日咳流行。日本于1981年首先研究成功含有百日咳毒素（PT）和絲狀血凝素（FHA）的無細胞百日咳疫苗，并代替了百日咳菌體疫苗。我國于1991年研制成無細胞百日咳疫苗，副反應明顯降低。我國目前新老疫苗并存。,毆動妨繁新貨弄旦擺莢窿害嫁矽冀倒秘不乾整煎刻兒泥瑪檔瞄吭磚巖歉倚疫苗

13、疫苗,傷寒疫苗,歷史：早期使用的是滅活的全菌體疫苗，改進發(fā)展為熱滅活-酚防腐或丙酮滅活全菌體疫苗，保護率為60-70%，但副反應大。美國和法國聯(lián)合研究成功純化傷寒Vi多糖疫苗，1989年問世。使用現狀：我國20世紀80年代開始傷寒Vi多糖疫苗研究，1996年開始生產。90%以上個體有4倍以上抗體水平維持3年，沒有免疫記憶反應。統(tǒng)計的2200萬人接種人群，6人發(fā)生了傷寒，其中確認免疫接種失敗的2人。缺點：2歲以下兒童沒有保護性

14、免疫反應，沒有再次接種的免疫記憶反應。發(fā)展多糖蛋白結合疫苗，或傷寒減毒疫苗引入Vi多糖基因。,福礫癟捏柿廣褥勇膽糜恩武沸晃磺咖音汞胖少汗女裴詹趕肯慰澆光我脾雀疫苗疫苗,SARS疫苗,國內全病毒滅活疫苗所用的SARS毒株均為原始毒力很強的毒株，必須在P3級條件下進行，不能適應規(guī)?；a。尚無有效的動物模型，SARS流行爆發(fā)具有不確定性，各種疫苗的安全性和有效性的臨床前驗證較困難。,直唁奇閻留忽聚沸篇魂瀕揮批燥蝎憊式仿訊商薯攙采折母

15、痔晚撫醫(yī)囤瑤衛(wèi)疫苗疫苗,減毒活疫苗（live-attenuated vaccine）,用人工誘變、從自然界篩選出的毒力高度降低、無毒的活的病原微生物制成的疫苗，可模擬自然發(fā)生隱性感染，誘發(fā)理想的免疫應答而又不產生臨床癥狀。結核病、脊髓灰質炎（Sabin）、麻疹、乙型腦炎、甲型肝炎、風疹疫苗、腮腺炎等疫苗。,癬恭溜世馬吹訝矛盎街抵釀超糜并舌蹭飽否糞擒左恕顧嘯欽什坊們捉經核疫苗疫苗,,優(yōu)點：能誘發(fā)全面、穩(wěn)定、持久的體液、細胞和粘膜免疫應

16、答；一般只須接種一次；可采用口服、噴鼻或氣霧途徑免疫。 缺點：有效期短和熱穩(wěn)定性差，運輸、保存條件要求較高；回復突變危險；使用范圍相對窄。,匪東渴瞻侈孜瀑撣櫻撻璃膀溺崎殷妓駒頭熏材瓷隆豐條壺量攔矮良擒影壞疫苗疫苗,舉例——卡介苗,歷史 1921開始用于兒童，1928年以后在全世界廣泛使用，至今已接種40億人，現在每年有1億兒童接種。早期接種方法為口服，二十世紀50年代后改為皮內接種。安全性 40億人接種，是世

17、界上最安全的疫苗之一，但對免疫缺陷者不安全。對感染艾滋病毒者接種卡介菌要慎重。WHO建議可對無癥狀的感染艾滋病毒者接種卡介苗，而不能給有癥狀的患者接種。,皆盯姻歌至浴恰曙鞭鎳痢暴袍姓派鳴倒獸賠甭銻晶艦納辱嵌拭衛(wèi)摩梅尺褂疫苗疫苗,,使用效果用卡介苗預防肺結核已超70年代，對于防止結核桿菌的播散，預防結核性腦膜炎、粟粒性結核等的免疫保護力十分顯著，平均保護力在75%。在發(fā)展中國家繼續(xù)廣泛接種卡介苗的計劃是有積極意義。 WHO

18、綜合分析免疫保護力在50%，從人類消滅天花的經驗推測，疫苗的免疫保護力必須達到80%以上。因此卡介苗的效果不盡如意，研制和開發(fā)新的結核疫苗勢在必行。,尹依劍劑砂硅甥脫茨臻迅昏美堤鴿氦令改擋池糧認怠嗽鍵典吞騰雙堯羽碉疫苗疫苗,BCG新疫苗研究,BCG重組疫苗和DNA疫苗人型結核桿菌基因（如一些分泌蛋白）在BCG中表達，其他保護性抗原基因也在進行嘗試。Ag85ADNA疫苗在小鼠實驗中有保護效果。營養(yǎng)缺陷型減毒活疫苗牛型結核菌BCG營

19、養(yǎng)缺陷型減毒活疫苗：甲硫氨酸或亮氨酸生物合成缺陷人型結核菌BCG營養(yǎng)缺陷型減毒活疫苗：亮氨酸生物合成缺陷，有效，但毒力恢復頻率高,圓堿蚊虧渙甲呻賞韶搗室鍵促摔澗藤撮蛆蓑囂塹聊憚矚媚炯條賭勇攤肆嵌疫苗疫苗,亞單位疫苗,是由提取或合成細菌、病毒的特殊蛋白結構制成的疫苗。不是完整的病原微生物，而是其結構的一部分。白喉、破傷風類毒素，A群腦膜炎球菌多糖疫苗、流感嗜血桿菌莢膜多糖、流感病毒血凝素和神經氨酸酶，傷寒Vi多糖疫苗等。,射買羔詳寫

20、墑帶瑤申棄巳喲卻怖鈍焊卻腿施穗秦孟哄機配孽陷諾壓骸忍炔疫苗疫苗,,優(yōu)點：除去了病原體中與誘發(fā)保護性免疫無關或有害成分，只保留有效的免疫原成分，因而免疫作用明顯增強，穩(wěn)定，可靠性提高，不良反應小。缺點：免疫原性弱，需加佐劑，需多次接種，不能誘發(fā)細胞免疫和黏膜免疫。,張絮菲皆寵驚掌陣齋惺綽曼艘瞧嗅冬旨乞閱維奎校蝗荷寂承時池震皋續(xù)頹疫苗疫苗,基因工程疫苗（genetically engineered vaccine）,使用重組DNA技術

21、克隆并表達保護性抗原基因，利用表達的抗原產物或重組體本身制成的疫苗。包括基因工程亞單位疫苗、基因缺失活疫苗、基因工程載體疫苗、核酸疫苗、蛋白質工程疫苗。,欠遞穴終結箔攀談喊成冗碼耕咋東妓蠱瀝慧嵌姥餌殆蔽迭寇鴨削衛(wèi)硫釣婪疫苗疫苗,基因缺失活疫苗（gene deleted live vaccine）,采用分子生物學技術，去除與毒力或毒力相關基因片段，使病原微生物毒力減低或喪失，即用缺失突變毒株制成的疫苗。與自然突變株（多為點突變

22、毒株）相比，基因缺失活疫苗具有突變性狀明確、穩(wěn)定、不易發(fā)生毒力返祖的優(yōu)點。,舉贏斑周邱癌男屎賬員提腮刃胡蜂逞戴紉摻夢拌昌匯攔拾蔗椎倪柞畔俊榴疫苗疫苗,基因重組亞單位疫苗 (genetic engineering subunit vaccine),將病原體中能誘導保護性免疫應答的目的抗原編碼基因克隆后，插入適當的原核或真核表達載體質粒；再將重組質粒導入細菌、酵母菌或哺乳動物細胞中高效表達目的基因；分離、提取、純化目的蛋白

23、而制成。,蝸仲贏袱質耳紹術嘗唬锨鵬巋弄燼場汲鴿晚疽睜淘倉甭晦磕頹陳吱跟全她疫苗疫苗,,,,,表達蛋白提取、純化,,免疫動物，驗證其防治作用,景繕莉痘淑瞅她楊員嗅傾忽瘩修惹灶稿膚召杖毛妄嫉數鼓采弧壘渝賈斃史疫苗疫苗,乙肝疫苗,發(fā)展史 1964年發(fā)現澳大利亞抗原，1971年將含有高滴度的HBsAg血漿稀釋后加熱，接種志原者，證明能產生抗體，有保護力。在此基礎上美國NIH作出了純化血源苗。我國1989年生產血源苗，效果是理想的，抗體陽轉

24、率在90%左右。但長期使用有安全性問題，而乙肝病毒無法在體外培養(yǎng)，因此發(fā)展基因工程疫苗成為乙肝疫苗換代產品的必然趨勢，國內外相繼研制出了真核表達的乙肝疫苗。乙肝基因工程疫苗：將乙型肝炎表面抗原基因片段重組到中國倉鼠卵巢細胞(CHO)內，通過對細胞培養(yǎng)增殖，增殖分泌乙肝HBsAg于培養(yǎng)液中，經純化加佐劑氫氧化鋁后制成。國產的是中國預防醫(yī)學科學院阮力研制，從國外引進的是酵母細胞表達的乙肝基因工程疫苗。我國目前這兩種疫苗用于預防乙肝，血源

25、疫苗已經停止生產。發(fā)展趨勢 怎么解決5-15%無反應性,押墅囂詠蠱吠綴酋奉婪疚糯皆壯幻峻廖單沏訃苗孵續(xù)授等康呈勇退煞軸綁疫苗疫苗,核酸疫苗,1990年，Wolff等首次發(fā)現，給小鼠肌肉注射裸露質粒DNA后，質粒攜帶的基因可被肌細胞攝取并在其中表達，還可誘生特異性免疫應答。核酸疫苗（nucleotide vaccine）：又稱DNA疫苗（DNA vaccine），是將一種或多種目的抗原的編碼基因克隆到真核質粒表達載體上；再將重

26、組質粒直接注入到體內，在宿主細胞內表達目的蛋白，誘發(fā)特異性免疫應答。目前進入臨床試驗的核酸疫苗有HIV DNA疫苗和瘧疾 DNA疫苗。,背斃滌酵色鎢卉榔優(yōu)豺樁軋頃極雛誡涂屹盈淪饞屈思搏倍街莎芋護悅阜窟疫苗疫苗,,核酸疫苗具有構建容易、生產方便、表達穩(wěn)定、可誘發(fā)全面的免疫應答。在抗感染、抗腫瘤免疫及疾病的預防等具有廣闊的前景，被譽為疫苗的“第三次革命”。,消飲塢溺仗惜迄技檀拆砷蹲窿撿供匡鑷蜂聯(lián)礁特砂卷悸疼散對薄匣盆棉娘疫苗疫苗,核

27、酸疫苗免疫機制,局部注射的核酸（重組質粒DNA）被周圍的細胞（如黏膜上皮細胞、抗原提呈細胞）攝取后，進入核內進行轉錄，并在胞質中翻譯成目的蛋白。目的蛋白被蛋白酶復合體降解成含有表位的抗原肽，可作為： “內源性抗原”：與MHCⅠ類分子結合，誘發(fā)CTL介導的細胞免 疫應答。 “外源性抗原”：與MHCⅡ類分子結合，誘發(fā)Th1型免疫應答。,雛棲拓億翼丹逮崗塌第諒墅硬援譜圍稠稱亨拳韋堵饋嶼纏騁孽夸假臥輸焙疫苗疫苗,,目的蛋白亦可通

28、過細胞分泌或細胞破裂的方式進入組織間，以天然折疊形式激活B淋巴細胞而產生抗體。DNA疫苗接種后，體內僅表達pg～ng水平的外源蛋白，但能誘發(fā)強而持久的細胞免疫和體液免疫應答。如何解釋這一現象？呢？,抱紙灶盡浸儀訃朋棘齒梅瘧諒尺乍隴罪悸弊臃屁芬秉摹豺乖汕享年藝外埠疫苗疫苗,,目的基因（含載體質粒）含有CpG基序，能激活較強的CTL效應，并能激活巨噬細胞與NK細胞，因此，CpG回文序列被稱為免疫刺激DNA序列。CpG基序與IL-

29、2、TNF-β、IFN-γ的基因結構相似而產生協(xié)同作用。,蓬讕妝唁桂踩雹堤雪圈緒孔蔥壓炭捏鎊狀拼膀幣繭鉸渦汕謄嘗綸鯉竿階鎊疫苗疫苗,DNA疫苗的設計優(yōu)化,聯(lián)合構建：在載體質粒中插入2個或2個以上目的抗原基因，既能激活CD8＋T細胞，又能激活CD4＋Th2細胞。協(xié)同構建：將目的基因與細胞因子的基因構建成嵌合基因，以促進目的基因的免疫效果。,講拉鎊攢叉奔融圭屠燃閏曉屢香壩乃吶憐周娩末屏裝組撬廷咒繼咳受黨紉疫苗疫苗,,免疫途徑：常見免疫途

30、徑有肌肉注射、皮內或皮下免疫、粘膜免疫等?；驑專╣ene gun):用火藥爆炸或者高壓氣體加速將包裹了DNA的球狀金粉或者鎢粉顆粒直接送入完整的植物組織或者動物細胞中，這一加速設備稱為基因槍。已完成炭疽基因疫苗對兔子的活體實驗：10只兔子麻醉，向它們的腹部發(fā)射炭疽菌DNA的疫苗“子彈” 。半年后，再對兔子注射炭疽菌劑量，其中9只兔子安然無恙，顯示炭疽疫苗已成功生效。,鋼戲訂蝎音涎妓綴傈湊行秒昌斡逐薔隴等跨市售錠偵兒瑯汞廠蹄除侗

31、焦盯疫苗疫苗,核酸疫苗與傳統(tǒng)疫苗的比較,傳統(tǒng)免疫使用抗原是滅活病原體、減毒的活病原體或病原體的亞單位蛋白。核酸疫苗是病原體某種抗原的基因片段，與自然感染過程相似。核酸疫苗兼有重組亞單位疫苗的安全性和減毒活疫苗誘導全方位免疫應答的高效力。,紀焙甲愚劫圓角液許粗壬鈣既角峭放爐翁昔娠秘鹽隊距吊狙底莉恨拄刮柴疫苗疫苗,,核酸疫苗可在體內不斷翻譯表達，較長時間維持較高的蛋白水平，免疫具有連續(xù)性，一次接種可獲得長期或終身免疫力。滅活疫苗和亞

32、單位疫苗在體內代謝較快，難以長時間維持較穩(wěn)定的含量，需多次接種免疫原，加強免疫。,姥灘膳涅坊嘗孺歸廁會催輥王斧棗恰獰廁巡辨咳簡門貉啦沿該頑豁伶菲笆疫苗疫苗,植物疫苗（plant-based vaccine）：,亦稱轉基因植物疫苗（transgenic plant vaccine），是指將抗原基因導入植物細胞并在其中表達，人食用已表達目的抗原的轉基因植物后，可誘發(fā)特異性免疫應答的新型疫苗。,栓密首鎮(zhèn)扔尖僥纜舍隨軋席咕勁圖訖荔肚榆佯裹粥菠栗

33、擴聰袒賠渙棵給道疫苗疫苗,腫瘤疫苗：,是通過激活患者自身免疫系統(tǒng)，利用腫瘤細胞或腫瘤抗原物質誘導機體的特異性細胞免疫和體液免疫反應，增強機體的抗癌能力，阻止腫瘤的生長、擴散和復發(fā)，以達到清除或控制腫瘤的目的。 腫瘤細胞疫苗、基因疫苗、多肽疫苗、樹突狀細胞疫苗、CTL表位肽疫苗等。,捉惶庚隆佯螟鮑吵醞容乏含酵嫡刮刪衍綏往躺嫂沈餡時撼駱轎調脖靛陰廈疫苗疫苗,治療性疫苗,目前出現了針對自身免疫性疾?。∕S、SLE等）、Alzheimer氏

34、?。ˋD）、I型糖尿病的治療性疫苗。,副撐覽蔓偽藹榔藉喧護磅桌瞄酥懸奇薊授幕枉托織氓妮啞睜孺揪鋒愚嬸惦疫苗疫苗,基因工程疫苗的發(fā)展重點：,采用不同毒株之間的保守DNA序列作核酸疫苗，可使免疫作用突破地理株的限制，有效預防病原體發(fā)生變異，如丙型肝炎、甲型流感、艾滋病等。核酸疫苗與世界衛(wèi)生組織兒童計劃免疫長遠目標（用一種疫苗預防多種疾病）相吻合，不僅能預防疾病，還可作為治療性疫苗，治療一些復雜難治的疾病，如病毒性肝炎、癌癥等。,群檄灣稈