耐硒細(xì)菌篩選、群落分析及其對(duì)硒形態(tài)的轉(zhuǎn)化研究.pdf

1、硒是人體必須的微量元素之一，缺硒和硒過量都對(duì)人體健康有害。我國絕大部分地區(qū)土壤缺硒，但過量硒引起的污染會(huì)造成環(huán)境質(zhì)量下降和人體中毒。因此，如何合理利用有限的硒資源開發(fā)富硒農(nóng)產(chǎn)品進(jìn)行生物補(bǔ)硒，同時(shí)通過硒積累植物修復(fù)硒污染環(huán)境是亟待解決的科學(xué)難題。大量研究發(fā)現(xiàn)，根際微生物可以影響硒在環(huán)境中的遷移、轉(zhuǎn)化，從而增強(qiáng)植物對(duì)硒的吸收和積累能力，提高植物中有機(jī)硒的比重。因此，篩選合適的微生物，利用植物與微生物的聯(lián)合作用增加對(duì)優(yōu)質(zhì)硒的富集，對(duì)于生物補(bǔ)硒

2、和硒污染環(huán)境的修復(fù)均具有重要意義。本研究采用選擇性培養(yǎng)基結(jié)合平板劃線法，從皖南富硒土壤中對(duì)耐硒細(xì)菌進(jìn)行了分離、篩選和純化，對(duì)耐硒細(xì)菌群落進(jìn)行了研究，測(cè)定了細(xì)菌的耐硒能力和對(duì)硒的還原動(dòng)力學(xué)過程。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴分離、篩選出兩株超耐硒細(xì)菌。通過革蘭氏染色、16S rDNA基因測(cè)序，結(jié)合細(xì)菌耐低溫檢驗(yàn)，鑒定出兩株細(xì)菌分別為Lysinibacillus xylanilyticus和Lysinibacillus macroide

3、s。⑵細(xì)菌耐硒能力測(cè)定結(jié)果表明，兩種細(xì)菌對(duì)Na2SeO3和Na2SeO4的耐受能力分別達(dá)到160 mM和400 mM，相對(duì)而言L. xylanilyticus耐Na2SeO4能力較強(qiáng)，而L.macroides耐Na2SeO3能力較強(qiáng)。Na2SeO3對(duì)L.xylanilyticus和L. macroides的半有效濃度（EC50）分別為60mM和90mM。⑶根據(jù)細(xì)菌還原 Na2SeO3的動(dòng)力學(xué)曲線，以及還原產(chǎn)物的分析可知，細(xì)菌的生長及其還

4、原Na2SeO3的過程是同步進(jìn)行的，還原的產(chǎn)物為揮發(fā)性的硒化物與納米級(jí)紅色單質(zhì)硒，這是賴氨酸芽孢桿菌（Lysinibacillus）還原Na2SeO3為納米級(jí)單質(zhì)硒的首次報(bào)道。⑷通過PCR-DGGE技術(shù)對(duì)富硒土壤中茶樹和水稻根際土壤中的細(xì)菌群落進(jìn)行分析。發(fā)現(xiàn)在低硒環(huán)境下，茶樹根際細(xì)菌多樣性最高，而水稻根際細(xì)菌多樣性在中等硒水平下相對(duì)較好。土壤細(xì)菌群落與土壤理化因子的冗余分析（RDA）表明，理化因子對(duì)茶樹根際細(xì)菌群落沒有顯著性影響，而 p