有機(jī)化學(xué)2色譜法

1、實(shí)驗(yàn)名稱實(shí)驗(yàn)名稱:薄層色譜和柱色譜薄層色譜和柱色譜一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模阂?、?shí)驗(yàn)?zāi)康模?、學(xué)習(xí)薄層色譜和柱色譜技術(shù)的原理和應(yīng)用。2、掌握薄層色譜和柱色譜分離技術(shù)和操作要點(diǎn)。3、掌握如何正確的配置展開劑。二、實(shí)驗(yàn)原理二、實(shí)驗(yàn)原理色譜法的基本原理，是利用混合物各組分在固定相和流動(dòng)相中分配平衡常數(shù)的差異。簡(jiǎn)單地說就是，當(dāng)流動(dòng)相流經(jīng)固定相時(shí)，由于固定相對(duì)各組分的吸附或溶解性能的不同，使吸附力較弱或溶解度較小的組分在固定相中移動(dòng)的速度較快，在多次反復(fù)平衡

2、過程中導(dǎo)致各組分在固定相中形成了分離的“色帶”，從而得到分離。三、主要試劑規(guī)格及用量三、主要試劑規(guī)格及用量1%偶氮苯的氯仿溶液，1%蘇丹Ⅲ溶液，0.5%的羧甲基纖維素鈉（CMC）水溶液，硅膠G，體積比為9:1的正庚烷乙酸乙酯。四、實(shí)驗(yàn)步驟四、實(shí)驗(yàn)步驟（一）薄層色譜實(shí)驗(yàn)步驟：（一）薄層色譜實(shí)驗(yàn)步驟：1、薄層板的制備.2、取兩塊薄層板，分別在距一端1cm處用鉛筆輕輕地畫一條線，作為起始線。用分別兩根毛細(xì)管，分別取少量1%蘇丹Ⅲ溶液、1%偶氮

3、苯的氯仿溶液和其混合液放在起始線上，取兩個(gè)樣點(diǎn)，且兩樣點(diǎn)相距1到1.5厘米，且樣點(diǎn)的直徑不超過2毫米。如果樣點(diǎn)顏色太淺，可以等其變干后在重復(fù)幾次。入展開劑中。4、待溶劑前沿離層析板頂端僅1~2mm時(shí)方能取出，否則色點(diǎn)分離不完全。但溶劑不能沖頂，否則色點(diǎn)會(huì)擴(kuò)散而影響分離效果。5、展開結(jié)束后，應(yīng)立即記下溶劑前沿的位置，并把色譜圖照原樣及時(shí)記錄在報(bào)告本上，注明各點(diǎn)的顏色，并計(jì)算各點(diǎn)的Rf值。6、本實(shí)驗(yàn)的色譜圖上可出現(xiàn)3~6個(gè)色點(diǎn)，在此范圍內(nèi)色

4、點(diǎn)越多，分離效果越好。7、薄層層析不僅可用來分離有色物質(zhì)，也可分離無色物質(zhì)。8、操作要小心，特別是點(diǎn)樣時(shí)，不要損壞層析板。9、實(shí)驗(yàn)完畢倒掉展開劑，層析缸不用洗。（二）柱色譜1、吸附劑必須均勻地填在柱內(nèi)，沒有氣泡、沒有裂縫，否則將影響洗脫和分離。2、加入沙子的目的是使加料時(shí)不致把吸附劑沖起，影響分高效果。若無沙子，也可用濾紙覆蓋在吸附劑表面。3、為了保持柱子的均一性，使整個(gè)吸附劑浸泡在溶劑或溶液中是必要的。否則當(dāng)柱中溶劑或溶液流干時(shí)，就會(huì)