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1、1第二章1、目前,常用的植物細(xì)胞培養(yǎng)基種類有哪些?各有什么特點(diǎn)?1)MS培養(yǎng)基特點(diǎn)是無機(jī)鹽和離子濃度較高,是較穩(wěn)定的平衡溶液。2)B5培養(yǎng)基其主要特點(diǎn)是含有較低的銨,這是因?yàn)殇@對(duì)不少培養(yǎng)物的生長(zhǎng)有抑制作用。3)White培養(yǎng)基其特點(diǎn)是無機(jī)鹽數(shù)量較低,適于生根培養(yǎng)4)N6培養(yǎng)基其特點(diǎn)是成分較簡(jiǎn)單,KNO3和(NH4)2SO4含量高。5)KM8P培養(yǎng)基其特點(diǎn)是有機(jī)成分較復(fù)雜,它包括了所有的單糖和維生素,廣泛用于原生質(zhì)融合培養(yǎng)。2、簡(jiǎn)要說明M
2、S培養(yǎng)基的基本組成。1)大量元素母液配制MS培養(yǎng)基的大量元素主要包括硝酸銨(NH4NO3)、硝酸鉀(KNO3)、磷酸二氫鉀(KH2PO4)、硫酸鎂(MgSO4?7H2O)和氯化鉀(CaCl2CaCl2?2H2O)五種化合物。2)微量元素母液配制MS培養(yǎng)基的微量元素由7種化合物(除Fe外)組成MnSO4?4H2O、ZnSO4?7H2O、H3BO3、KI、NaMoO4?2H2O、CuSO4?5H2O、CoCl2?6H2O。3)鐵鹽母液配制M
3、S培養(yǎng)基中的鐵鹽是硫酸亞鐵(FeSO4?4H2O)和乙二胺四乙酸二鈉(Na2?EDTA)的螯合物,必須單獨(dú)配成母液。4)有機(jī)母液的配制MS培養(yǎng)基的有機(jī)成分有甘氨酸、肌醇、煙酸、煙酸硫胺素和鹽酸吡哆素。5)激素母液配制MS培養(yǎng)基中的激素有生長(zhǎng)素類、細(xì)胞分裂素3、配制培養(yǎng)基時(shí),為什么要先配制母液?如何配制母液?1)配制母液不但可以保證各物質(zhì)成分的準(zhǔn)確性及配制時(shí)的快速移取,而且還便于低溫保藏。2)基本培養(yǎng)基中的大量元素、微量元素、維生素等一般
4、都分別配制成母液。4、常用的滅菌方法有哪些,各有哪些優(yōu)缺點(diǎn)?1)濕熱滅菌(高壓蒸汽滅菌)優(yōu)點(diǎn):高溫高壓蒸汽對(duì)生物材料有良好的穿透力,能造成蛋白質(zhì)變性凝固而使微生物死亡,是一種最有效的滅菌方法。缺點(diǎn):如果是對(duì)培養(yǎng)基或液體溶液滅菌,滅菌時(shí)間與需要滅菌的培養(yǎng)基或液體溶液的體積密切相關(guān),時(shí)間不足達(dá)不到滅菌效果,時(shí)間過長(zhǎng)培養(yǎng)基內(nèi)的化學(xué)物質(zhì)遭到破壞,影響培養(yǎng)基成分。2)過濾除菌優(yōu)點(diǎn):3)干熱滅菌缺點(diǎn):干熱滅菌存在能源消耗大、浪費(fèi)時(shí)間、安全性差問題4
5、)紫外線滅菌缺點(diǎn):由于紫外線穿透物質(zhì)的能力很弱,所以只適于空氣中和物體表面3有預(yù)防措施第三章1.基本概念細(xì)胞的全能性:是指細(xì)胞具有發(fā)育成完整個(gè)體的遺傳潛能。也可以指?jìng)€(gè)體某個(gè)器官或組織已經(jīng)分化的細(xì)胞在適宜的條件下再生成完整個(gè)體的遺傳潛能。外植體:是指由活體植物體上提取下來的,接種在培養(yǎng)基上用來進(jìn)行離體無菌培養(yǎng)的離體材料,可以是器官、組織、細(xì)胞和原生質(zhì)體等。愈傷組織:脫分化后的細(xì)胞經(jīng)過細(xì)胞分裂,產(chǎn)生無組織結(jié)構(gòu)、無明顯極性的松散的細(xì)胞團(tuán),稱之
6、愈傷組織(callus)極性:通常是指在器官、組織甚至細(xì)胞中,在不同的軸向上存在某種形態(tài)結(jié)構(gòu)和生理生化上的梯度差異。細(xì)胞分化:是指發(fā)育起始狀態(tài)的合子沿個(gè)體發(fā)育方向不斷分化出形態(tài)結(jié)構(gòu)、生理功能不同的細(xì)胞、組織、器官而最終形成完整植株的過程。即由于細(xì)胞的分工而導(dǎo)致其結(jié)構(gòu)和功能改變或發(fā)育方式改變的過程。在細(xì)胞水平上,細(xì)胞分化是指細(xì)胞在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生改變的過程。去分化:已有特定結(jié)構(gòu)和功能的植物組織,在一定的條件下,其細(xì)胞被誘導(dǎo)改變?cè)械?/p>
7、發(fā)育途徑,逐步失去原有的分化狀態(tài),轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂蟹稚芰Φ呐咝约?xì)胞的過程叫脫分化或去分化(dedifferentiation)。再分化:脫分化細(xì)胞失去了分化的特征,但在特定條件下,可再次開始新的分化發(fā)育進(jìn)程,最終形成各種組織、器官或胚狀體等,即再分化(rededifferentiation)體細(xì)胞胚:(somaticembry)又稱胚狀體,是指離體培養(yǎng)條件下沒有經(jīng)過受精過程而形成的胚胎類似物。人工種子:(artificialseeds)又稱
8、合成種子(syntheticseeds)或體細(xì)胞種子(somaticseeds)。就是將離體培養(yǎng)中產(chǎn)生的胚狀體或芽包裹在含有養(yǎng)分和保護(hù)功能的人工胚乳和人工種皮中形成的類似種子的顆粒。2.愈傷組織的形成大致可分為幾個(gè)時(shí)期?各有何特點(diǎn)?答:可分為三個(gè)時(shí)期:(1)啟動(dòng)期(誘導(dǎo)期):主要是指細(xì)胞準(zhǔn)備分裂的時(shí)期需要采用合適的誘導(dǎo)劑如NAA(萘乙酸)、IAA(吲哚乙酸)、2,4D(2,4二氯苯氧乙酸)等或細(xì)胞分裂素。特征:距傷口較近的薄壁細(xì)胞略有增
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