莠去津對斑馬魚解毒酶系的影響及DNA損傷研究.pdf

1、莠去津又名阿特拉津，化學名化學學名2-氯-4-乙基胺-6-異丙基胺-1，3，5-三嗪，分子式為C8H14ClN5，是我國目前廣泛使用的一種旱地除草劑，其能通過地表徑流、淋溶、干/濕沉降等方式進入水體，在直接影響大型水生植物和浮游藻類的同時，給魚類等水生動物也帶來了一定的毒理效應。近年來，因其使用量大、殘留期長、水體環(huán)境中檢出率高和具有內分泌干擾作用等而受到廣泛關注。因此，對莠去津的水生態(tài)安全性評價已經迫在眉睫。 本研究以莠去津為

2、研究對象，選取斑馬魚為指示生物，通過測定莠去津對斑馬魚解毒酶系(細胞色素P450酶系和谷胱甘肽硫轉移酶)的活性效應和DNA損傷作用，評價了莠去津的生態(tài)毒性和遺傳毒性。對斑馬魚進行藥劑處理后，在設定的檢測期測定了莠去津對斑馬魚的細胞色素P450含量、NADPH-P450還原酶活性(NCR)、氨基比林-N脫甲基活性(APND)、紅霉素-N脫甲基活性(ERND)和谷胱甘肽硫轉移酶活性(GST)的影響，從生物化學方面評價了莠去津對斑馬魚的毒性效

3、應；在設定的檢測期采用單細胞凝膠電泳試驗測定了莠去津對斑馬魚肝細胞DNA的損傷作用，從分子水平初步探討了其可能的誘變作用。主要內容如下： 1.莠去津對斑馬魚細胞色素P450酶系的影響：選擇P450酶系中的細胞色素P450含量、NCR、APND和ERND活性作為指標。結果表明，經0.01，0.1，1mg/L莠去津處理后，斑馬魚肝微粒體P450含量、NCR、APND和ERND活性都受到了顯著的誘導作用。在整個試驗過程，各濃度莠去津處

4、理組的P450含量、NCR、APND和ERND活性均始終處于對照組水平之上。另外，本研究還表明，莠去津在對斑馬魚P450酶系的影響中存在性別差異，對照組雄性斑馬魚細胞色素P450含量、NADPH-P450還原酶活性分別比雌性斑馬魚高24.4％和13.9％，而隨著莠去津濃度的增加和時間的延長，雌性斑馬魚P450酶系活性卻呈現出略高的誘導趨勢；雌魚CYP3A比雄魚更敏感且易受影響。 2.莠去津對斑馬魚GST酶活性的影響：結果表明，經

5、莠去津處理后，斑馬魚肝微粒體的GST活性均受到了一定程度的誘導作用，且莠去津處理濃度與斑馬魚肝臟GST活力之間存在一定的劑量.效應關系，隨著莠去津濃度的升高，GST活性大體上都呈現先降低后升高的趨勢。對于雄魚而言，GST活性除了1mg/L處理組在染毒第5d和20d受到顯著抑制外，其它處理時間的處理組均顯著高于對照組；對于雌魚而言，除了染毒第5d的1mg/L處理組和染毒25d處理組外，其它處理的GST活性均高于對照組。另外，本試驗結果也表