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文檔簡介
1、雞γ雞γ亞麻酸(γ亞麻酸(γALA)酶聯(lián)免疫分析)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作方法試劑盒操作方法本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:檢測范圍:96T35pgml1200pgml使用目的:使用目的:本試劑盒用于測定雞肉樣本中γ亞麻酸(γALA)含量。實驗原理實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中雞γ亞麻酸(γALA)水平。用純化的雞γ亞麻酸(γALA)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入γ亞麻酸(γALA),再與HRP標記的
2、γ亞麻酸(γALA)抗體結合,形成抗體抗原酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的γ亞麻酸(γALA)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中雞γ亞麻酸(γALA)濃度。試劑盒組成試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml1瓶7終止液6ml1瓶2酶標試劑6ml1瓶8標準品(2400pgml)0.5ml1瓶3酶
3、標包被板12孔8條9標準品稀釋液1.5ml1瓶4樣品稀釋液6ml1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml1瓶12密封袋1個標本要求標本要求1標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于20℃保存,但應避免反復凍融2不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可
4、按照下列圖表在小試管中進行稀釋。1200pgml5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液600pgml4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液300pgml3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液150pgml2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液75pgml1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標
5、試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。注意事項注意事項1試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡1530分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。3各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內,如標本數量多,
6、推薦使用排槍加樣。4請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(n5)。5封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6底物請避光保存。7嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.8所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說
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