大腦皮質發(fā)育過程中線粒體動力學相關蛋白的表達.pdf

1、線粒體動力學即線粒體不斷進行分裂和融合的動態(tài)過程，其主要受兩類蛋白即線粒體融合蛋白和線粒體分裂蛋白進行調控。線粒體分裂融合的動態(tài)平衡是維持細胞功能，促使機體正常運轉的關鍵，近年研究發(fā)現(xiàn)線粒體動力學異?？梢鹛囟ㄉ窠浽蛲?，導致中樞神經系統(tǒng)性疾病如阿爾茨海默病、亨廷頓病等。目前對線粒體動力學異常與疾病的研究較多，但對中樞神經系統(tǒng)發(fā)育過程中線粒體動力學如何變化并不清楚，限制了對神經系統(tǒng)疾病詳細機制的進一步闡釋。本研究以中樞神經系統(tǒng)發(fā)育過程中

2、的神經元為研究靶細胞，運用免疫熒光技術和蛋白半定量分析，觀察大腦皮質發(fā)育過程中線粒體動力學相關蛋白的表達，進而推測線粒體動力學與中樞神經系統(tǒng)神經元發(fā)育的關系。
　　目的：探討線粒體動力學相關蛋白在大腦皮質發(fā)育過程中的表達情況。
　　方法：以C57BL/6J野生型小鼠為研究對象，選取60只E18（胚胎18d）、P0（出生當天）、P7、P14、P21、P30六個年齡點小鼠并取其大腦，進行免疫熒光和Western blot蛋白半定

3、量實驗，觀察大腦皮質和海馬CA1區(qū)動力相關蛋白1（dynamin-related protein1,Drp1）、線粒體分裂蛋1（fission1 protein,Fis1）線粒體融合蛋白2（mitofusin-2,Mfn2）和視神經萎縮蛋白1（optic atrophy1,Opa1）的表達情況。
　　結果：①小鼠P14時Fis1、Drp1、Mfn2、Opa1陽性細胞數(shù)和蛋白表達量最高（P＜0.01，差異具有統(tǒng)計學意義），P0-P1

4、4發(fā)育階段是小鼠大腦皮層和海馬區(qū)陽性細胞數(shù)和蛋白表達量增長最快的年齡段（P＜0.01，差異尤其明顯具有統(tǒng)計學意義），P30出現(xiàn)下降趨勢（P＜0.05，差異具有統(tǒng)計學意義）。②小鼠發(fā)育的不同階段，Drp1在不同大腦皮層中的表達存在差異，P0、P7尤其是在P7時在大腦皮質板的Ⅵ表達量明顯高于其他層，P14、P21時皮質板的Ⅴ層表達量較高，P30時各皮層的表達量基本一致。
　　結論：①線粒體動力學相關蛋白在大腦皮層發(fā)育過程中表達呈先升高