NO和H2O2介導薏苡仁油誘導靈芝三萜合成的信號轉導機制.pdf

1、靈芝是具有廣闊應用前景的藥用原材料，其關鍵活性成分三萜化合物具有重要藥理作用。但靈芝細胞中三萜含量和產量均較低，限制了其規(guī)模化應用。本論文采用液體深層發(fā)酵（細胞培養(yǎng)）技術，研究了外源誘導子薏苡仁油對靈芝深層發(fā)酵過程中三萜合成的影響，發(fā)現(xiàn)適宜濃度的薏苡仁油可顯著提高靈芝三萜的合成量和產量;進一步從信號轉導的角度分析了薏苡仁油誘導靈芝三萜合成的基本作用機制。主要研究內容和結果如下:
　　1.誘導子（薏苡仁油）在1.5g/L濃度下，可顯

2、著促進靈芝菌絲體生長和靈芝三萜的合成量，且誘導子在菌絲體細胞指數(shù)生長末期到穩(wěn)定期早期加入表現(xiàn)最為敏感，這種作用可在較長時間內誘導靈芝菌絲體細胞產次級代謝產物。
　　2.添加薏苡仁油可有效誘導靈芝細胞中NO濃度、PAL活性和CYP450含量的增加，且NO可以作為PAL活化和CYP450產生的上游信號分子起作用，它是薏苡仁油誘導靈芝菌絲體細胞中PAL活化和CYP450產生信號轉導、靈芝三萜合成積累途徑中必定產生、但不是唯一的信號分子。

3、
　　3.H2O2位于PAL活化和CYP450產生的上游，薏苡仁油誘導靈芝三萜合成通過H2O2所介導的信號轉導途徑，但H2O2途徑并不是薏苡仁油誘導靈芝三萜合成唯一的途徑。
　　4.通過對照實驗發(fā)現(xiàn)NO和H2O2均參與了薏苡仁油誘導的靈芝三萜合成的信號轉導過程，且NO和H2O2作為信號分子在介導薏苡仁油的誘導過程中具有協(xié)同作用。另外，SNP+H2O2+DMTU+IMD和SNP+H2O2+cPITO+L-NNA處理組中PAL活