纖維素酶產生菌的篩選及產酶條件優(yōu)化.pdf

1、纖維素酶在造紙、紡織、生物能源、食品加工、飼料等行業(yè)都有廣泛應用。纖維素酶產生菌是生產纖維素酶產品的最有效方式之一。但是現有的產酶菌株雖然能夠為生產提供充足的纖維素酶資源，卻也存在著種種問題。如里氏木霉生產的β-葡萄糖苷酶活性較低就是缺點之一。現今工業(yè)產酶工藝受限、酶活力不穩(wěn)定及成本過高，都成為纖維素酶應用的限制性因素。我國對纖維素酶的需求量之大，使得尋找更高效的產纖維素酶菌株具有重要意義。
　　本研究從大連周邊不同地區(qū)20余份土

2、樣中篩選出了一株具有明確降解纖維素特性的菌株JG，對其18SrDNA序列進行親緣關系分析后，確定該菌株為草酸青霉菌屬(Penicillium oxalicum)。
　　對Penicillium oxalicum JG的產酶基本特性進行了研究。確定菌株在第7d達到最大產酶活性，最適初始發(fā)酵pH為2左右，具有一定的耐酸性。采用單因素法對菌株的發(fā)酵培養(yǎng)基進行優(yōu)化，確定菌株最適培養(yǎng)基組分為:麩皮為碳源，豆粉作為氮源，且添加一定濃度的K+具

3、有促進作用。
　　采用響應面優(yōu)化法(RSM)，以濾紙酶活(FPA)作為響應值，對菌株JG搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基的碳源、氮源和pH進行3因素3水平的優(yōu)化。得到最終優(yōu)化后培養(yǎng)基組分是:麩皮46.9 g/L，豆粉6.33 g/L，pH為1.5。實驗證明，利用優(yōu)化后的培養(yǎng)基得到FPA活性為0.366 IU/mL。
　　以麩皮為底物，研究不同種類的表面活性劑對菌株JG的產酶影響。結果表明卵磷脂對菌株的產酶具有很大促進作用。并且在酸性條件下使用

4、卵磷脂對麩皮進行預處理，還原糖的產量可以大大提高。證明了卵磷脂可以作為草酸青霉菌JG的最適表面活性添加劑。
　　5L發(fā)酵罐液態(tài)發(fā)酵驗證菌株的產酶能力。結果證明，菌株在發(fā)酵罐中的產酶時間由7天縮短至3天，與使用搖瓶發(fā)酵相比，四種CBH、FPA、CMCase、BGL酶活分別提高了12％、37.3％、55.6％和20.3％，以未添加卵磷脂為對照的發(fā)酵條件下四種酶活分別提高33.5％、63％、8.3％和38.9％。SDS-PAGE電泳檢測