碳源和鹽度對烏梁素海水體好氧不產氧光合細菌群落結構影響.pdf

1、好氧不產氧光合細菌（AAPB）作為地球上最古老的細菌類群，對于水體碳循環(huán)有著重要作用。目前，自然環(huán)境條件下研究所得出的碳源、鹽度對淡水AAPB群落結構的影響及其變化規(guī)律不盡相同，而以人為分別改變碳源和鹽度來進行單因素實驗分析有望為理解水生生態(tài)系統(tǒng)AAPB群落結構的控制機制提供依據(jù)。
　　烏梁素海是黃河流域最大的淡水湖泊，其中蘊含有豐富的好氧不產氧光合細菌（AAPB）資源。因此，本文首先針對PCR-DGGE實驗中出現(xiàn)的擴增問題，通過

2、比對篩選了最佳優(yōu)化劑組合。之后運用PCR-DGGE，結合QPCR技術對經碳源、鹽度誘導處理的烏梁素海水樣菌群進行分析，結果表明：
　　(1)經土壤、水樣DNA驗證后篩選出了最適PCR優(yōu)化劑組合DBD-2（2%DMSO,0.8 M Betaine,2 mM DTT），發(fā)現(xiàn)同一樣品在應用優(yōu)化劑后于DGGE圖譜上能夠檢測到更多條帶，并證實了該優(yōu)化劑組合對多種Taq酶的適用性，且對于弱條帶的重擴增同樣能夠起到優(yōu)化作用。
　　(2)對

3、烏梁素海水體人為添加3種碳源誘導，經分析后發(fā)現(xiàn)碳源能夠使得水體總細菌群落豐富度提升約45%，多樣性提升約10%；AAPB菌群豐富度提高36.3%，多樣性提升約4%。碳源誘導使得AAPB菌群中Alpha-及Gamma-proteobacteria的比例增加，丙酮酸鈉作為誘導效果最佳的碳源，能夠提升水體中部分AAPB功能菌的豐度。
　　(3)對烏梁素海水體進行鹽度處理，發(fā)現(xiàn)碳源能夠使得水體總細菌群落豐富度提升約16.6%，多樣性則下降

4、約5%；AAPB菌群豐富度提高63.6%，多樣性提升約8%。CCA分析發(fā)現(xiàn)水體細菌及AAPB與TN、TP、Chl a、鹽度等顯著相關。細菌各類群比例在鹽處理后變化不大，但值得注意的是，在5%鹽度處理下， Gamma-proteobacteria類群比例顯著增加。QPCR結果顯示，1%鹽度處理14 d后，16S rRNA拷貝數(shù)相比同時期對照樣品提升了約7.8倍，5%鹽度處理樣品中pufM拷貝數(shù)提升約10倍，表明鹽環(huán)境可能更有利于烏梁素海水