基于膠體金光熱效應的快速檢測方法研究及裝置研制.pdf

1、近年來，食品安全問題越來越受到社會的重視，其中對食品中致病菌、農獸藥殘留等有害物質的檢測方法研究是監(jiān)督食品安全的重要保障。對食品中有害物質的檢測方法有多種，膠體金（Gold nanoparticles, GNPs）試紙條檢測方法是常用的快速檢測方法之一。膠體金試紙條檢測方法包括膠體金免疫層析技術和膠體金免疫滲濾技術，本論文主要研究基于膠體金免疫層析技術的檢測方法。膠體金免疫層析技術是一種以GNPs作為顯色物質的免疫層析檢測技術，通常根據

2、抗原上表位的數目分為雙抗夾心法和競爭法，載體可以為硝酸纖維素膜(Nitrocellulose membrane, NC)，玻璃等，廣泛應用于食品、醫(yī)療檢測等領域。傳統(tǒng)膠體金免疫層析試紙條通常通過視覺檢測法得出檢測結果，但這種檢測方法靈敏度一般較低。
　　本研究分為五個部分：第一章概述了試紙條檢測方法的分類、GNPs的制備方法和性質，介紹了GNPs的標記技術和光熱效應機理，重點介紹了膠體金試紙條的視覺檢測方法和膠體金試紙條讀卡器檢測

3、方法及其研究進展，以及基于GNPs光熱效應的應用及其研究進展。第二章建立了一種基于GNPs光熱效應的鼠傷寒沙門氏菌層析式試紙條檢測方法。制備了GNPs，并與抗體組成金標抗體復合物，制作了鼠傷寒沙門氏菌免疫層析式試紙條，對其制作過程進行了優(yōu)化。優(yōu)化了光熱檢測的激光照射時間，分別用視覺檢測法及熱像儀光熱效應檢測法檢測，得到了鼠傷寒沙門氏菌的最低檢測限，分別為1.57×107 CFU·mL-1和1.7×106 CFU·mL-1，光熱效應檢測法

4、與視覺檢測法相比，靈敏度提高了約9倍。第三章選用雙抗夾心法商品化鼠傷寒沙門氏菌試紙條和競爭法商品化鹽酸克倫特羅試紙條雙抗夾心，利用視覺檢測法及熱像儀光熱效應檢測法進行了定量檢測，確定了商品化膠體金試紙條采用視覺檢測法及熱像儀檢測法檢測鼠傷寒沙門氏菌及鹽酸克倫特羅的最低檢測限。鼠傷寒沙門氏菌試紙條視覺檢測法和熱像儀檢測法的檢測限分別為1.13×107 CFU·mL-1及1.2×106 CFU·mL-1，熱像儀檢測方法與視覺檢測方法相比，靈

5、敏度提高了約9倍。鹽酸克倫特羅試紙條視覺檢測法和熱像儀檢測法的檢測限分別為5 ng·mL-1及0.5 ng·mL-1，熱像儀檢測方法與視覺檢測方法相比，靈敏度提高了約10倍。第四章研制了一種小型紅外溫度傳感器裝置，將第二章和第三章中測試的自制和商品化鼠傷寒沙門氏菌試紙條和商品化鹽酸克倫特羅試紙條用紅外溫度傳感器進行光熱檢測。分別對激光照射距離、傳感器測量距離及激光照射時間進行了優(yōu)化，確定了膠體金免疫試紙條方法采用視覺檢測法及紅外傳感器光

6、熱效應檢測法檢測鼠傷寒沙門氏菌及鹽酸克倫特羅的最低檢測限。自制鼠傷寒沙門氏菌試紙條視覺檢測法和傳感器檢測法檢測限分別為1.57×107 CFU·mL-1及1.25×106 CFU·mL-1，傳感器檢測方法與視覺檢測方法相比，靈敏度提高了約12倍。商品化鼠傷寒沙門氏菌試紙條視覺檢測法和傳感器檢測法檢測限分別為1.13×107 CFU·mL-1及1.0×106 CFU·mL-1，傳感器檢測方法與視覺檢測方法相比靈敏度提高了約11倍。鹽酸克倫