普洱茶茶褐素中小分子化合物分析研究.pdf

1、黑茶是我國所特有的茶葉種類，是我國六大茶類中一類由不同微生物發(fā)酵的茶葉，屬于后發(fā)酵茶。普洱茶、青磚茶、茯磚茶、康磚茶、六堡茶等均屬于黑茶，普洱茶是其中比較著名的黑茶品種。茶褐素是普洱茶獨(dú)特的化學(xué)成分。本文以普洱茶茶褐素為研究對象，通過有機(jī)溶劑萃取，乙醇分段，柱層析分離，制備色譜分離，對茶褐素主要成分進(jìn)行分離純化。同時(shí)利用LC-MS、1H-NMR手段對各萃取部位進(jìn)行成分分析。并通過酸堿調(diào)節(jié)對普洱茶茶褐素的化學(xué)成分進(jìn)行研究，為進(jìn)一步闡明茶褐

2、素分子結(jié)構(gòu)提供了依據(jù)。
　　研究結(jié)果表明：
　　（1）對普洱茶各萃取組分進(jìn)行多酚類成分分析發(fā)現(xiàn)，試驗(yàn)樣品中茶褐素部位未檢測出沒食子酸、表沒食子兒茶素酸酯和表兒茶素，而其含有的可可堿成分明顯高于其它萃取組分，含量高達(dá)31.76％；無水乙醇萃取物中，沒食子酸的含量比較高，占21.13%；二氯甲烷萃取物中咖啡堿的含量較高，占7.23%；其它各萃取組分中的多酚類物質(zhì)的含量都有不同程度的變化。
　　（2）對普洱茶各萃取組分通過1

3、H-NMR分析發(fā)現(xiàn)，無水乙醇部位的成分主要是嘌呤類、生物堿類的物質(zhì)；二氯甲烷部位發(fā)現(xiàn)了沒食子酸和與氮上相連的氫的化學(xué)信號。反映了該部位主要是多酚類物質(zhì)同時(shí)由于咖啡堿不溶于二氯甲烷分層被除去。乙酸乙酯部位的成分主要是一些黃酮類物質(zhì)；正丁醇部位的成分主要是一些多糖類物質(zhì)，其中在該部位主要發(fā)現(xiàn)了一簇糖苷類的氫信號。水殘留萃取部位的主要是一類生物堿的信號；茶褐素部位主要是一些糖苷類的氫信號、普洱茶素和苯環(huán)氫信號等。
　?。?）依次通過有機(jī)

4、溶劑萃取，乙醇分段可以對茶褐素進(jìn)行有效地分離以及純化。使用不同濃度的乙醇/水溶液對茶褐素進(jìn)行分級，其中以水浸出物和50%乙醇/水的得率最高，分別為22.78%和10.53%。對不同濃度的乙醇/水溶液分級得到的茶褐素進(jìn)行LC-MS分析，結(jié)果表明10%乙醇水溶液得到的茶褐素的吸收值普遍高于其他分段產(chǎn)物。
　?。?）酸堿對茶褐素的影響，可以得出在酸調(diào)節(jié)的過程中，茶褐素中的蛋白類物質(zhì)達(dá)到其等電點(diǎn)，有沉淀析出。通過LC-MS對茶褐素樣品和p

5、H=1.0條件下的樣品進(jìn)行成分分析，分析發(fā)現(xiàn)酸化后的茶褐素中具有相同極性的物質(zhì)在此條件下更穩(wěn)定。因而酸性條件下的茶褐素在其排除沉淀干擾后，使其中一些被掩蓋的物質(zhì)顯現(xiàn)出來。堿性條件下的茶褐素，因茶褐素主要酸性官能團(tuán)為酚羥基和羧基。由此，堿性條件
　　會(huì)導(dǎo)致茶褐素中的多酚-糖殘基聚合物的穩(wěn)定性降低，物質(zhì)的組成結(jié)構(gòu)發(fā)生變化。因而該過程中由于物質(zhì)成分的變化茶褐素的顏色隨pH值的升高而加深。
　?。?）選取茶褐素分級中的20%的乙醇部