殼聚糖、膠原及其復合膜性質(zhì)的AFM研究.pdf

1、　　上世紀九十年代初發(fā)明的原子力顯微鏡是一種新型、先進的表面分析儀器，自其問世的二十幾年來，在生物、醫(yī)學、材料學等領域的應用取得了很大進展，而且，人們正不斷尋求將其用于更廣泛的領域。
　　本論文中利用原子力顯微鏡成像技術觀察了膠原蛋白在UV-B照射前后形態(tài)的變化，發(fā)現(xiàn)UV-B引起膠原纖維交聯(lián)度的增加，當交聯(lián)達一定程度后，照射時間的增加對交聯(lián)度增加的影響不明顯。過度輻射也造成膠原纖維某些點位的斷裂損傷。這在生物體內(nèi)將意味著膠原纖維功

2、能的缺失。紅外光譜圖顯示在膠原酰胺鍵的特征譜帶區(qū)，輻射時間的變化沒有引起膠原紅外吸收的改變，說明UV-B照射下膠原分子之間只發(fā)生了弱的相互作用，未生成新的化學鍵。AFM作為一種高分辨的表面分析儀器，為分子生物學領域的研究提供了一種有力的手段。是探討膠原光作用機理直觀、有效的方法。
　　用紅外光譜儀研究交聯(lián)劑戊二醛對膠原蛋白分子的作用，發(fā)現(xiàn)交聯(lián)后膠原分子間氫鍵的作用增強，分子內(nèi)氫鍵的作用相對減弱，表現(xiàn)在紅外光譜圖上，酰胺Ⅰ、酰胺Ⅱ帶

3、的各子峰的峰值發(fā)生了相應的位移，強度比也發(fā)生了改變。AFM觀測的結果也顯示這種化學交聯(lián)劑的引入使膠原纖維的網(wǎng)狀結構遭到破壞，說明戊二醛的加入破壞了膠原的三級、四級結構。
　　本文將膠原和殼聚糖溶液按適當比例混合，澆注成膜，并首次采用原子力顯微鏡成像觀察共混膜表面的微觀結構。發(fā)現(xiàn)純膠原膜纖維束(直徑約100—400nm)交織形成致密的網(wǎng)絡結構；純殼聚糖膜呈線形結構：而共混膜形成互穿網(wǎng)絡結構，隨殼聚糖比例的增加，膠原纖維束變得松散，網(wǎng)

4、孔增大，孑L隙被殼聚糖顆粒填充。二種分子之間的相互作用使共混膜表面吸附力得以調(diào)節(jié)，有利于細胞的生長和遷移，共混膜這種結構是其優(yōu)于單一組分膜的基礎。
　　利用AFM觀察殼聚糖、膠原及殼聚糖一膠原混合膜對紅細胞結構的影響，結果顯示殼聚糖膜表面荷正電，黏附聚集紅細胞的現(xiàn)象最明顯，膠原蛋白膜帶負電，不易使紅細胞黏附，紅細胞保持了其基本形態(tài)，而膠原一殼聚糖混合膜表面呈微區(qū)相分離現(xiàn)象，殼聚糖正離子與膠原負離子交互鑲嵌，在酸性溶液制成的膜表面，