簡(jiǎn)介：目的在原肌酐、尿酸酶法試劑盒中添加新色原物質(zhì)TBHBA，提高肌酐、尿酸酶學(xué)檢測(cè)方法的靈敏度，在其理論基礎(chǔ)支持下研究出一種具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的，高度靈敏的、快速檢測(cè)肌酐、尿酸干化學(xué)試紙條，為臨床監(jiān)測(cè)腎功能水平，尤其是對(duì)家庭監(jiān)測(cè)慢性腎病CKD患者腎功能的變化和終末期腎病ESRD患者透析效果的判斷提供一種簡(jiǎn)便、快捷定量半定量的可靠的檢測(cè)手段。方法1建立高靈敏度新色原酶學(xué)檢測(cè)方法選擇高純度的新色原2，4，6三溴3羥基苯甲酸TBHBA添加到肌酐、尿酸檢測(cè)試劑盒的R1試劑中，混勻后作為新色原試劑。通過(guò)全波段掃描檢測(cè)新色原試劑的最佳比色波長(zhǎng)根據(jù)濃度吸光度曲線選擇TBHBA的最佳濃度通過(guò)對(duì)比試驗(yàn)確定新方法試劑比例和最佳樣品量采用最佳檢測(cè)參數(shù)，評(píng)估新色原檢測(cè)方法的的各項(xiàng)性能，確定TBHBA對(duì)提高檢測(cè)靈敏度的可行性提供依據(jù)。2試紙條的制作首先微孔反應(yīng)板上進(jìn)行大量濕化學(xué)試驗(yàn)，探索紙片反應(yīng)體系的最佳條件參數(shù)配制濾紙浸漬液，手工制作肌酐、尿酸酶促檢測(cè)試紙條。3標(biāo)準(zhǔn)比色卡的制作在微孔反應(yīng)板上進(jìn)行濕化學(xué)實(shí)驗(yàn)，根據(jù)一系列樣本標(biāo)準(zhǔn)液反應(yīng)后的顏色深淺梯度，制作試紙條結(jié)果判讀的標(biāo)準(zhǔn)比色卡。4試紙條的評(píng)價(jià)檢測(cè)已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品和臨床血清標(biāo)本，對(duì)比全自動(dòng)分析儀測(cè)定的肌酐、尿酸濃度，分析自制試紙條檢測(cè)結(jié)果的精準(zhǔn)性，評(píng)價(jià)自制肌酐、尿酸試紙條的臨床應(yīng)用價(jià)值。結(jié)果1高靈敏度肌酐、尿酸檢測(cè)新方法的參數(shù)分別為檢測(cè)波長(zhǎng)為520NM、510NM，TBHBA濃度為3GL、5GL，最大樣本添加量為20ΜL15ΜL，最佳試劑比例為3∶1、4∶1。2肌酐、尿酸酶學(xué)新方法線性回歸方程分別為Y00006X00165、Y00009X00209。線性范圍分別為125ΜMOLL～1000ΜMOLL、40ΜMOLL～1600ΜMOLL，該范圍涵蓋了正常人和腎病患者的肌酐、尿酸水平，滿足臨床檢測(cè)需要。新方法檢測(cè)反應(yīng)顯色能穩(wěn)定2小時(shí)，肌酐和尿酸高、低值標(biāo)準(zhǔn)品的CV值分別是202％、413％和325％、286％。新色原試劑4℃能保存2個(gè)月。新色原方法與原試劑盒比較，靈敏度分別是原方法的2倍和15倍。3研發(fā)制作了肌酐、尿酸檢測(cè)試紙條和標(biāo)準(zhǔn)比色卡試紙條制作過(guò)程中浸漬時(shí)間為10秒，試紙條檢測(cè)樣本量為15ΜL，檢測(cè)結(jié)果最佳終點(diǎn)觀察時(shí)間為20～30MIN臨床血清標(biāo)本檢測(cè)，試紙條檢測(cè)分組的血清樣本生化檢測(cè)，濃度均值和中位數(shù)均在試紙條設(shè)置的理論區(qū)間內(nèi)，自制試紙條半定量結(jié)果與全自動(dòng)生化儀測(cè)定濃度基本符合。結(jié)論1選擇以TBHBA為色原能有效提高肌酐、尿酸酶學(xué)檢測(cè)方法的靈敏度，為肌酐、尿酸干化學(xué)檢測(cè)試紙條的研究提供可靠依據(jù)。2肌酐、尿酸干化學(xué)檢測(cè)試紙條測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確、可靠，重復(fù)性好，可半定量定量檢測(cè)到肌酐、尿酸低濃度水平的樣本，理論上支持唾液樣本肌酐、尿酸的檢測(cè)。3肌酐、尿酸干化學(xué)檢測(cè)試紙條攜帶方便、檢測(cè)快捷，為臨床監(jiān)測(cè)腎功能水平、尤其是家庭CKD患者的腎功能監(jiān)測(cè)和ESRD透析效果的判斷具有重要臨床意義。4自主研發(fā)的肌酐、尿酸酶促干化學(xué)檢測(cè)試紙條有較好的應(yīng)用前景和市場(chǎng)開(kāi)發(fā)價(jià)值。

簡(jiǎn)介：目的研究一次力竭性離心運(yùn)動(dòng)及恢復(fù)期間大鼠骨骼肌超微結(jié)構(gòu)以及機(jī)械生長(zhǎng)因子MGF的變化情況。方法實(shí)驗(yàn)一本研究以24只7周左右的健康雄性SD大鼠為研究對(duì)象，并隨機(jī)分為安靜對(duì)照組CONTROL力竭運(yùn)動(dòng)即刻組E0力竭運(yùn)動(dòng)后24H組E24力竭運(yùn)動(dòng)后48H組E48共四組，每組各6只。各力竭運(yùn)動(dòng)組進(jìn)行一次性力竭（下坡跑）運(yùn)動(dòng)，在力竭運(yùn)動(dòng)后的不同時(shí)間點(diǎn)宰殺取樣。所有大鼠用烏拉坦腹腔麻醉、宰殺后迅速取股外側(cè)肌、股直肌各一分為二。其中一部分用25％戊二醛固定，用于制作電鏡超薄切片，在透射電子顯微鏡下觀察骨骼肌超微結(jié)構(gòu)的變化情況，另一部分保存于液氮中冷凍，用于檢測(cè)大鼠股外側(cè)肌中機(jī)械生長(zhǎng)因子MGF的情況。實(shí)驗(yàn)二選用4只7周齡成年大鼠和1只新生大鼠，其中成年鼠分組為安靜對(duì)照組1只，鈍挫傷即刻組1只，鈍挫傷24H組1只，鈍挫傷48H組1只。采用急性鈍挫傷模型，分別于鈍挫傷后不同時(shí)間點(diǎn)宰殺，迅速取股外側(cè)肌并進(jìn)行即刻培養(yǎng)。采用倒置相差顯微鏡隨時(shí)跟拍每天衛(wèi)星細(xì)胞培養(yǎng)情況。結(jié)果1成年大鼠經(jīng)過(guò)一次性力竭離心運(yùn)動(dòng)之后，電鏡下觀察其股直肌的超微結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn)，安靜對(duì)照組大鼠骨骼肌的超微結(jié)構(gòu)正常。在一次性力竭運(yùn)動(dòng)后即刻E0組出現(xiàn)了炎性細(xì)胞，間質(zhì)血管的改變，而力竭運(yùn)動(dòng)24小時(shí)后即E24組可見(jiàn)骨骼肌細(xì)胞、線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)均出現(xiàn)扭曲、腫脹等形態(tài)改變，Z線、M線明顯異常，嵴紊亂等組織學(xué)變化情況。2本研究采用酶聯(lián)免疫吸附法即ELISA檢測(cè)大鼠血清和骨骼肌中MGF的結(jié)果顯示，一方面，從血清中MGF的變化情況來(lái)看，力竭運(yùn)動(dòng)組E0、E24、E48與安靜對(duì)照組相比呈升高趨勢(shì)，具有非常顯著性差異P＜001。另一方面，從骨骼肌中的MGF的變化來(lái)看，E0、E24、E48與安靜對(duì)照組相比，都有升高趨勢(shì)，其中E24組與安靜對(duì)照組相比具有非常顯著性的差異P＜001。3在安靜對(duì)照組中發(fā)現(xiàn)骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞最初呈圓形，多懸浮于培養(yǎng)液中，1天后細(xì)胞逐漸貼壁生長(zhǎng)，細(xì)胞較小，分布均勻，多呈圓形，此后細(xì)胞體積逐漸長(zhǎng)大，開(kāi)始分裂，鏡下可以看見(jiàn)35個(gè)或多個(gè)細(xì)胞成串排列。新生鼠的肌衛(wèi)星細(xì)胞的培養(yǎng)中，與成年大鼠比較，肌衛(wèi)星細(xì)胞的數(shù)目較多。肌衛(wèi)星細(xì)胞貼壁培養(yǎng)48小時(shí)后開(kāi)始增殖，肌肉衛(wèi)星細(xì)胞在第58天增殖較快，之后增殖減慢。結(jié)論1一次性力竭運(yùn)動(dòng)后大鼠骨骼肌超微結(jié)構(gòu)出現(xiàn)顯著性的組織學(xué)變化，例如肌原纖維排列混亂，結(jié)構(gòu)破壞，M線、Z線不夠清晰，甚至相鄰間斷裂，H帶、I帶界限模糊，細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)線粒體均發(fā)生形變，細(xì)胞間質(zhì)水腫明顯等現(xiàn)象。2一次性力竭運(yùn)動(dòng)及恢復(fù)期間，與安靜對(duì)照組相比，大鼠血清和骨骼肌中機(jī)械生長(zhǎng)因子MGF在力竭后即刻，24小時(shí)和48小時(shí)呈現(xiàn)增高的趨勢(shì)，且在24小時(shí)后達(dá)到峰值，提示MGF可能加快骨骼肌組織和血管再生修復(fù)。3大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞體外培養(yǎng)需要較高的條件要求，鈍挫傷后骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的增殖能力比安靜對(duì)照組的增殖能力要強(qiáng)。并且新生大鼠衛(wèi)星細(xì)胞的增殖較強(qiáng)。有關(guān)大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞培養(yǎng)的分化條件還有待進(jìn)一步研究。

簡(jiǎn)介：軀干是人體的重要器官，其主要功能是維持脊柱的運(yùn)動(dòng)功能、協(xié)調(diào)功能和平衡功能，并使脊柱保持平衡。腰痛是臨床多發(fā)病和常見(jiàn)病，嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量和勞動(dòng)能力。軀干的力學(xué)變化在腰痛的發(fā)生和發(fā)展中有十分重要的作用，研究軀干的力學(xué)特征有助于了解腰痛的病因并有效地預(yù)防其發(fā)生。該課題分為三部分。第一部分軀干等速肌力測(cè)試的信度研究目的研究軀干肌等速測(cè)試的信度，并初步分析影響軀干肌力及測(cè)試的有關(guān)因素，為進(jìn)一步深入研究奠定基礎(chǔ)。方法20例自愿受試者經(jīng)同一檢測(cè)者利用同一程序、同一檢測(cè)方法在一周內(nèi)分別測(cè)試其軀干的常用力學(xué)指標(biāo)，使用組內(nèi)相關(guān)系數(shù)ICC對(duì)結(jié)果進(jìn)行信度分析。結(jié)果60°S和180°S收縮時(shí)重復(fù)測(cè)試信度滿意，240°S收縮時(shí)伸肌重復(fù)測(cè)試信度滿意，但屈肌稍差。結(jié)論等速測(cè)力裝置用于軀干的力學(xué)特征評(píng)定有較好的重復(fù)信度，尤其應(yīng)選擇低速和中速收縮，少用高速收縮。第二部分速度對(duì)軀干等速肌力測(cè)試的影響目的通過(guò)對(duì)低、中、高速收縮的軀干等速力學(xué)指標(biāo)的分析，得出軀干等速測(cè)試的最佳速度參數(shù)，為了解腰痛患者軀干的力學(xué)變化提供測(cè)試依據(jù)。方法20例男性健康自愿者分別在60°S、180°S和240°S下進(jìn)行軀干的等速測(cè)試，了解各組測(cè)試指標(biāo)的變化情況，確定軀干等速測(cè)試的最理想速度。結(jié)果PT、PTBW隨速度增加有減少的趨勢(shì)，但AP在中速收縮是達(dá)到其峰值，選用高速收縮了解AP的變化無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論速度對(duì)軀干的等速肌力測(cè)試的影響是明顯的，進(jìn)行測(cè)試和訓(xùn)練時(shí)選擇低速指標(biāo)比較可靠。第三部分腰椎間盤(pán)突出癥患者軀干等速肌力測(cè)試的研究目的研究腰椎間盤(pán)突出癥疾病組和非腰椎間盤(pán)突出對(duì)照組的軀干等速測(cè)試指標(biāo)，了解其軀干力學(xué)的變化情況，分析力學(xué)因素在腰椎間盤(pán)突出癥發(fā)生和發(fā)展中的作用，為有效治療提供科學(xué)依據(jù)。方法利用等速測(cè)試系統(tǒng)對(duì)疾病組和對(duì)照組各30例的軀干屈伸肌進(jìn)行測(cè)試，比較兩組PT、PTBW、TPT、T02、TW、AP和FE的差異，確定疾病組軀干的力學(xué)特征。結(jié)果腰椎間盤(pán)突出癥患者軀干的絕對(duì)肌力、肌肉的收縮效率及屈伸比值較對(duì)照組有明顯的變化，這種變化可能導(dǎo)致脊柱的異常，產(chǎn)生肌肉痙攣、關(guān)節(jié)韌帶僵硬，并造成椎間盤(pán)及周?chē)M織結(jié)構(gòu)的損傷。結(jié)論腰椎間盤(pán)突出癥患者軀干力學(xué)改變是肯定的，這種改變同疾病的發(fā)生和發(fā)展可能互為因果，康復(fù)治療應(yīng)該在準(zhǔn)確評(píng)定這種改變的基礎(chǔ)上，制訂合適的、有針對(duì)性的治療方案。

簡(jiǎn)介：摘要研究背景初期穩(wěn)定性是影響種植手術(shù)成功的重要因素，臨床上為了提高種植體的初期穩(wěn)定性，常常采用級(jí)差備洞的植入方式，使種植體與頜骨產(chǎn)生機(jī)械制鎖作用，在機(jī)械力學(xué)中，這種連接方式稱(chēng)為過(guò)盈聯(lián)結(jié)，而種植體直徑與種植窩洞直徑的差值稱(chēng)為過(guò)盈量。過(guò)盈量越大則種植體與頜骨之間的應(yīng)力就越大，過(guò)大的應(yīng)力則會(huì)對(duì)骨組織造成損壞，使組織局部缺血壞死，以及頜骨骨折，所以過(guò)盈量的選擇對(duì)于種植手術(shù)尤其重要。過(guò)盈聯(lián)結(jié)在機(jī)械力學(xué)中應(yīng)用較多，有較多文獻(xiàn)，而在種植領(lǐng)域中報(bào)道的較少。目的建立三維有限元模型，分析種植體一骨界面的應(yīng)力分布，觀察主要應(yīng)力分布區(qū)域，研究牙種植體過(guò)盈植入對(duì)種植體一骨界面接觸壓力的影響。方法選擇直徑為33MM的ITL種植體和成人離體下頜骨，模擬種植體植入下頜骨內(nèi)，過(guò)盈量為05LNM，建立三維有限元模型，應(yīng)用ANSYS軟件分析種植體一骨界面的應(yīng)力分布情況，以及主要受力區(qū)域。結(jié)果種植體所受應(yīng)力主要集中于頸部，且主要集中在骨皮質(zhì)區(qū)域，種植體周?chē)亲畲髴?yīng)力為48796MPA，頜骨最大應(yīng)力值為87832MPA，種植體一骨界面應(yīng)力值隨過(guò)盈量增大而增大。結(jié)論過(guò)盈量為05MILL時(shí)，種植體一骨界面所產(chǎn)生的應(yīng)力值在骨組織所能承受的最大應(yīng)力值范圍內(nèi)，不會(huì)發(fā)生骨折，種植體所受到的應(yīng)力值遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于鈦的屈服強(qiáng)度，從生物力學(xué)角度，周?chē)撬軕?yīng)力在骨組織ABSTRACTRESEARCHBACKGROUNDINITIALSTABILITYISANIMPORTANTFACTORAFFECTINGTHEPLANTINGOPERATIONSUCCESS，INORDERTOINCREASETHEPRIMARYSTABILITYOFTHEIMPLANTS，ONTHECLINICALVASTMAJORITYADOPTSTHEGRADINGTOPREPARETHEHOLETYPETOIMPLANT，MAKETHEIMPLANTANDBONEMECHANICALLOCKFUNCTION，ITISCALLEDINTERFERENCECONNECTIONINMECHANICS，IMPLANTSDIAMETERANDTHEPLANTINGHOLEDIAMETERDIFFERENTIALVALUEHASBEENCALLEDINTERFERENCEVALUETHEGREATERTHEAMOUNTOFINTERFERENCEIMPLANTANDTHEGREATERTHESTRESSBETWEENTHEJAWS，EXCESSIVESTRESSISINTERESTEDINBONETISSUEDAMAGE，MAKETHEORGANIZATIONSISCHEMICNECROSISANDTHEJAWFRACTURE，SO，SELECTTHEAMOUNTOFINTERFERENCEISESPECIALLYIMPORTANTFORIMPLANTSURGERYTHOUGHREPORTEDINTHEFIELDOFPLANTINGLESS，INTERFERENCECONNECTIONINTHEMECHANICSUSEDMOREOFTENOBJECTIVETOESTABLISHMENTOFTHREEDIMENSIONALFINITEELEMENTMODEL，ANALYSISOFSTRESSDISTRIBUTIONOFIMPLANTBONEINTERFACE，OBSERVETHESTRESSDISTRIBUTIONAREA，STUDYONTHEEFFECTSOFINTERFERENCEOFDENTALIMPLANTIMPLANTATIONOFIMPLANTBONEINTERFACECONTACTPRESSUREMETHODSSELECTADIAMETEROF33MMITIIMPLANTANDADULTHUMANMANDIBLEINVITROANDANALOGIMPLANTMANDIBLEESTABLISHMENTOFTHREEDIMENSIONALFINITEELEMENTMODELWITHTHEAMOUNTOFINTERFERENCEFORO5MMTOANALYZETHESTRESSDISTRIBUTIONINIMPLANTBONEINTERFACEANDMAIN

簡(jiǎn)介：中南大學(xué)碩士學(xué)位論文脫細(xì)胞牛心包引導(dǎo)骨再生膜材料的制備及生物相容性研究姓名張文斌申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)口腔臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師吳漢江200405013EDAC交聯(lián)后脫細(xì)胞牛心包有與BIOGIDE膜類(lèi)似的雙面結(jié)構(gòu)光滑面結(jié)構(gòu)致密，具有良好的細(xì)胞阻隔功能，粗糙面疏松多孔，具有穩(wěn)定血凝塊和植入顆粒骨的作用，有利于骨移植后的成形和穩(wěn)定。關(guān)鍵詞脫細(xì)胞，牛心包，引導(dǎo)骨組織再生，篩選

簡(jiǎn)介：目的評(píng)價(jià)中藥灌腸方治療輕、中度活動(dòng)期潰瘍性結(jié)腸炎的療效及安全性。方法選擇60例輕、中度潰瘍性結(jié)腸炎同時(shí)符合臨床活動(dòng)期標(biāo)準(zhǔn)的患者作為研究對(duì)象，隨機(jī)分為治療組和對(duì)照組，每組各30例。治療組給予清腸化濕、涼血生肌法中藥方中藥灌腸治療對(duì)照組給予錫類(lèi)散15G加入09％生理鹽水灌腸治療。治療周期為12周，治療周期結(jié)束后進(jìn)行療效分析。結(jié)果治療組臨床療效有效28例，無(wú)效2例，有效率9333％對(duì)照組臨床療效有效18例，無(wú)效12例，有效率6000％，治療組優(yōu)于對(duì)照組P0006＜001，兩組對(duì)比有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。治療組臨床緩解27例，緩解率9000％對(duì)照組臨床緩解16例，緩解率5333％，治療組優(yōu)于對(duì)照組P0004＜001，兩組對(duì)比有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。治療組腸黏膜愈合率7333％，對(duì)照組腸黏膜愈合率3000％，治療組優(yōu)于對(duì)照組P0001＜001，兩組對(duì)比有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。通過(guò)治療后治療組的電子腸鏡亞評(píng)分優(yōu)于對(duì)照組，同時(shí)治療組在治療前后的電子腸鏡亞評(píng)分，治療后明顯優(yōu)于治療前。通過(guò)治療在中醫(yī)證侯療效、癥狀療效及患者生存質(zhì)量等方面，治療組均優(yōu)于對(duì)照組P＜005，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在治療前后過(guò)程中兩組均未發(fā)現(xiàn)明顯并發(fā)癥的產(chǎn)生。治療組與對(duì)照組的安全性指標(biāo)未見(jiàn)明顯異常。結(jié)論清腸化濕、涼血生肌法中藥灌腸治療輕中度活動(dòng)期潰瘍性結(jié)腸炎具有良好的臨床療效和安全性，優(yōu)于錫類(lèi)散加入09％生理鹽水標(biāo)準(zhǔn)化治療。

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多中藥強(qiáng)骨煎劑對(duì)去卵巢大鼠骨質(zhì)疏松癥防治效果及機(jī)制探討.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：目的1、觀察腓動(dòng)脈和脛后動(dòng)脈穿支顯微解剖特點(diǎn)，應(yīng)用腓動(dòng)脈或脛后動(dòng)脈穿支蒂螺旋槳皮瓣修復(fù)小腿遠(yuǎn)端及足踝部軟組織缺損創(chuàng)面，探討其并發(fā)癥防治措施。2、通過(guò)骨髓炎兔模型研究載萬(wàn)古霉素硫酸鈣聯(lián)合自體骨植入治療感染性骨缺損的安全性，以及自體骨植入后對(duì)骨缺損修復(fù)的影響。3、探討組織瓣載萬(wàn)古霉素硫酸鈣自體髂骨聯(lián)合治療創(chuàng)傷性脛骨骨髓炎一期治療方案的臨床療效。材料與方法1、對(duì)5具新鮮尸體共10側(cè)小腿標(biāo)本，用紅色乳膠灌注胭動(dòng)脈、藍(lán)色乳膠灌注靜脈，解剖并觀察統(tǒng)計(jì)腓動(dòng)脈和脛后動(dòng)脈穿支數(shù)量、長(zhǎng)度、走行角度、血管直徑和動(dòng)靜脈伴行情況等指標(biāo)，討論穿支恒定出現(xiàn)的位置，指導(dǎo)臨床皮瓣設(shè)計(jì)從2011年6月至2013年6月，對(duì)47例小腿遠(yuǎn)端以及足踝部軟組織缺損病例用穿支蒂螺旋槳皮瓣修復(fù)，觀察臨床療效并統(tǒng)計(jì)并發(fā)癥發(fā)生率，探討并發(fā)癥防治的方法。2、采用骨髓炎兔模型，隨機(jī)分為四組模型組，治療組A，治療組B，治療組C，每組10只。模型組不行病灶清除及硫酸鈣與自體骨植入，治療組A骨缺損處全部植入載抗生素硫酸鈣，治療組B骨缺損處植入硫酸鈣與自體骨比例為1∶1，治療組C骨缺損處植入硫酸鈣與自體骨比例為1∶2。分別于術(shù)后第1天、術(shù)后30天及術(shù)后60天對(duì)病灶處行CT薄層掃描，并進(jìn)行血常規(guī)、CRP、ALP檢測(cè)。分別于術(shù)后30天和術(shù)后60天行病理切片HE染色，光鏡下觀察組織切片膿腫、壞死骨、骨膜下新骨、多核巨細(xì)胞浸潤(rùn)等情況及骨缺損處血管化情況，用免疫組化法顯示骨缺損處骨鈣素OC表達(dá)情況，通過(guò)圖像分析軟件IMAGEPROPLUSIPP60分析骨組織OC表達(dá)量。3、從2013年1月到2014年7月，收治符合納入標(biāo)準(zhǔn)的脛骨創(chuàng)傷性骨髓炎患者58例，確定為A組，即治療組，以組織瓣載萬(wàn)古霉素硫酸鈣自體髂骨聯(lián)合一期治療方案進(jìn)行治療。并根據(jù)植入硫酸鈣量的不同分為三個(gè)亞組A1組為植入含200MG萬(wàn)古霉素的硫酸鈣，A2組為植入含500MG萬(wàn)古霉素的硫酸鈣，A3組為植入含1000MG以上萬(wàn)古霉素的硫酸鈣?；仡櫺苑治?009年1月到2012年12月收治的300例骨髓炎患者中，符合納入標(biāo)準(zhǔn)且采用病灶清除單純載萬(wàn)古霉素硫酸鈣植入組織瓣修復(fù)創(chuàng)面方案一期治療并獲隨訪的患者15例，定為B組，即對(duì)照組。治療組術(shù)后每天收集引流液進(jìn)行萬(wàn)古霉素濃度測(cè)定，直到拔除引流管。所有患者術(shù)后1、3、6、9、12個(gè)月各進(jìn)行一次X片檢查，評(píng)估骨折愈合情況。對(duì)所有病例進(jìn)行隨訪，隨訪指標(biāo)包括引流管放置時(shí)間，骨折愈合時(shí)間，感染控制率，骨不連發(fā)生率，其他并發(fā)癥等。4、統(tǒng)計(jì)方法采用IBMSPSS200軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，第二章的血液學(xué)指標(biāo)、三維重建CT指標(biāo)采用重復(fù)測(cè)量方差分析OC指標(biāo)采用析因設(shè)計(jì)的方差分析其余數(shù)據(jù)采用單因素方差分析，多重比較方差齊時(shí)，采用LSD方法，方差不齊時(shí)，采用DUNTST3方法，P＜005為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。第三章采用兩獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)對(duì)A組和B組中引流管放置時(shí)間和骨愈合時(shí)間進(jìn)行差異分析，并用單因素方差分析對(duì)A組中不同萬(wàn)古霉素植入量的三個(gè)亞組的引流管放置時(shí)間和骨愈合時(shí)間進(jìn)行差異分析，P＜005為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果1、腓動(dòng)脈和脛后動(dòng)脈共發(fā)出穿支92支，其中有2條伴行靜脈的有52支，有1條伴行靜脈的有37支，伴行靜脈缺如的1支，還有2支腓動(dòng)脈穿支穿深筋膜后共用1條伴行靜脈進(jìn)入皮膚。腓側(cè)在距外踝（30±10）CM、（80±20）CM和（195±05）CM處有較為恒定的腓動(dòng)脈穿支血管穿出深筋膜進(jìn)入皮膚，其中7例在（30±10）CM處均有穿支出現(xiàn)，10例在（80±20）CM處均有穿支出現(xiàn)脛側(cè)在距內(nèi)踝（50±10）CM和（80±10）CM處有較為恒定的穿支血管穿出深筋膜進(jìn)入皮膚，其中8例在（50±10）CM處均有穿支出現(xiàn)，有9例在（80±10）CM處均有穿支出現(xiàn)。36例腓動(dòng)脈穿支蒂螺旋槳皮瓣其穿支穿出深筋膜距離外踝距離6～18CM，平均101CM，其中24例穿支位置在距外踝（80±20）CM范圍內(nèi)11例脛后動(dòng)脈穿支穿出深筋膜距離內(nèi)踝6～18CM，平均95CM，其中有6例穿支位置在距內(nèi)踝（80±10）CM范圍內(nèi)并發(fā)癥包括1例皮瓣下積血，1例感染，1例供區(qū)植皮壞死，13例靜脈回流障礙9例腓動(dòng)脈穿支，4例脛后動(dòng)脈穿支，其中4例出現(xiàn)遠(yuǎn)端部分壞死。2、治療后60天，治療組與模型組相比，堿性磷酸酶ALP、白細(xì)胞計(jì)數(shù)WBC、超敏C反應(yīng)蛋白CRP顯著降低，單因素方差分析結(jié)果表明，各組間ALP、WBC、CRP具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義F541444，P0000F61310，P0000F11317，P0000。手術(shù)后30天，各組動(dòng)物病灶部位骨缺損面積開(kāi)始減小，且均開(kāi)始有骨痂生成，各組骨缺損面積比較模型組和治療組A高于治療組B和治療組C有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜005。手術(shù)后60天，模型組骨缺損面積較大，與治療組A、治療組B、治療組C比較均有顯著性差異P＜005，且治療組B骨缺損面積最小，接近愈合狀態(tài)。術(shù)后30天，HE染色主要表現(xiàn)為模型組伴有明顯骨吸收和死骨形成的化膿性病灶。治療組A、治療組B、治療組C骨小梁逐漸增加，且有正常骨細(xì)胞形成，炎癥性細(xì)胞大量減少，周?chē)拦侵饾u減少。術(shù)后60天，HE染色主要表現(xiàn)為模型組死骨大量存在，死骨周?chē)醒装Y性肉芽組織浸潤(rùn)。治療組治療組A、治療組B、治療組C可見(jiàn)大量新骨生成，植入骨周?chē)僭S骨母細(xì)胞，破骨細(xì)胞，成骨破骨同時(shí)進(jìn)行。各組在手術(shù)后30天與手術(shù)后60天，均有不同程度的OC沉積，手術(shù)后30天，手術(shù)后60天治療組A、治療組B、治療組C與模型組比較陽(yáng)性染色率明顯增高，治療組B＞治療組C＞療組A＞模型組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜005。3、所有病例均獲隨訪，隨訪時(shí)間6～30個(gè)月，無(wú)1例患肢行截肢術(shù)。軟組織缺損修復(fù)A組采用腓腸肌外側(cè)頭肌皮瓣2例，腓腸肌內(nèi)側(cè)頭?。ㄆぃ┌?例，游離股前外側(cè)皮瓣3例，穿支蒂螺旋槳皮瓣7例，臨近筋膜蒂皮瓣6例，直接縫合9例，所有皮瓣全部成活，2例出現(xiàn)皮瓣創(chuàng)口愈合不良，經(jīng)換藥治愈B組腓腸肌外側(cè)頭肌瓣2例，腓腸肌內(nèi)側(cè)頭肌（皮）瓣5例，游離股前外側(cè)皮瓣2例，皮神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)血管皮瓣3例，穿支皮瓣1例，鄰近筋膜蒂皮瓣2例，其中2例皮神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)血管皮瓣出現(xiàn)皮瓣遠(yuǎn)端部分壞死，創(chuàng)面滲出伴感染，經(jīng)清創(chuàng)換藥后治愈，未再次行皮瓣手術(shù)。A組中有3例骨髓炎復(fù)發(fā)，復(fù)發(fā)時(shí)間從5個(gè)月到2年，其中2例再次擴(kuò)創(chuàng)后植入載萬(wàn)古霉素硫酸鈣及自體髂骨后治愈，1例擴(kuò)創(chuàng)后行骨搬移治愈其他并發(fā)癥包括1例出現(xiàn)骨不連，但感染已控制，再次植骨后愈合，2例出現(xiàn)外固定釘?shù)栏腥荆?jīng)對(duì)癥釘?shù)捞幚砑办o滴抗生素后治愈。取髂骨區(qū)并發(fā)癥主要是10例出現(xiàn)大腿前外側(cè)麻木，約3～6個(gè)月后緩解，2例出現(xiàn)取髂骨區(qū)積血，其中1例合并金黃色葡萄球菌感染，經(jīng)引流換藥后治愈。B組中有1例術(shù)后8個(gè)月骨髓炎復(fù)發(fā)，經(jīng)再次清創(chuàng)植入載萬(wàn)古霉素硫酸鈣及自體髂骨后治愈，2例分別于治愈后18個(gè)月及25個(gè)月出現(xiàn)原病灶部位再骨折，經(jīng)再次鋼板固定自體髂骨植骨后治愈，術(shù)中病理證實(shí)無(wú)骨髓炎復(fù)發(fā)，1例出現(xiàn)外固定釘?shù)罎B出伴感染，經(jīng)對(duì)癥處理后好轉(zhuǎn)。引流管放置時(shí)間A組平均（1253±456）天，B組平均（1707±387）天，P＜001，兩者存在顯著性差異。骨折愈合時(shí)間A組平均（620±216）個(gè)月，B組平均836±284個(gè)月，P＜001，兩者存在顯著性差異。A組三個(gè)亞組之間除了A1組分別和A2組A3組的引流管放置時(shí)間存在顯著差異之外，A2組和A3組的引流管放置時(shí)間、三組之間的骨愈合時(shí)間等均無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。引流液萬(wàn)古霉素局部濃度于術(shù)后第3天達(dá)峰，在第2～5天持續(xù)維持高濃度，第5天后濃度逐漸下降，但仍維持較高的濃度水平。結(jié)論1、以腓動(dòng)脈穿支和脛后動(dòng)脈穿支為蒂的螺旋槳皮瓣質(zhì)地、顏色與受區(qū)相似，匹配性好，外表美觀，皮瓣切取操作技術(shù)簡(jiǎn)單，無(wú)需吻合血管，臨床療效優(yōu)良，是修復(fù)小腿遠(yuǎn)端及足踝部創(chuàng)面的首選方案之一靜脈回流障礙仍是螺旋槳皮瓣術(shù)后主要并發(fā)癥，通過(guò)精確術(shù)前設(shè)計(jì)、皮瓣逆旋轉(zhuǎn)、延遲縫合、滴血療法，能有效防治術(shù)后并發(fā)癥腓動(dòng)脈在距外踝（80±20）CM范圍內(nèi)穿出深筋膜的穿支恒定，長(zhǎng)度以及血管口徑適合，是設(shè)計(jì)螺旋將皮瓣血管蒂的最佳選擇。2、在感染性骨缺損病灶內(nèi)植入載萬(wàn)古霉素硫酸鈣的同時(shí)植入自體骨，并不影響感染的控制，且可促進(jìn)骨愈合，縮短骨缺損修復(fù)時(shí)間。3、組織瓣載萬(wàn)古霉素硫酸鈣自體髂骨聯(lián)合治療方案，在一期治療局灶型和彌漫型創(chuàng)傷性骨髓炎時(shí)，能有效縮短骨愈合時(shí)間，增加骨愈合強(qiáng)度，減少術(shù)后滲出，且不增加感染復(fù)發(fā)率，較單純植入載萬(wàn)古霉素硫酸鈣更具有優(yōu)越性。且硫酸鈣植入量與術(shù)后反應(yīng)性滲出時(shí)間呈正相關(guān)，最低可減少到植入含200MG萬(wàn)古霉素量的硫酸鈣。

簡(jiǎn)介：目的觀察自擬強(qiáng)骨飲對(duì)去卵巢大鼠骨形態(tài)計(jì)量學(xué)的指標(biāo)的影響，并探討其影響骨形成的原理與機(jī)制。方法健康雌性SD大鼠45只，體重230～280G。隨機(jī)分為3組，分別為強(qiáng)骨飲組（治療組QGY組）、密鈣息組（對(duì)照組MIACALCIC組）和空白組（BLANK組），每組15只。分別采取切除雙側(cè)卵巢方法進(jìn)行骨質(zhì)疏松造模，10周后造模成功，開(kāi)始給藥，治療組用自擬強(qiáng)骨飲灌胃，每日一次，每次0001MLKG，對(duì)照組用密鈣息，皮下注射，每日1次，每次072UKG。空白組，不做處理。在給藥后3、6、9個(gè)月每組各取5只大鼠進(jìn)行檢測(cè)，先測(cè)量體重，然后空氣栓塞處死，分離腰椎和股骨頸，獲得腰椎和股骨頸樣本，標(biāo)本經(jīng)過(guò)染色，梯度乙醇脫水，二甲苯透明，石蠟包埋，涼干，封固，進(jìn)行切片，顯微鏡下作骨形態(tài)計(jì)量學(xué)檢測(cè)并利用SPSS130統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料兩樣本均數(shù)之間的比較用T檢驗(yàn)，多樣本均數(shù)之間的比較用方差分析，均以P結(jié)果對(duì)于腰椎的骨形態(tài)計(jì)量學(xué)指標(biāo)，治療組與對(duì)照組均能較好的改善，雖然TVBV、MAR、BFRBS、TBTH與對(duì)照組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＞005，但均呈良好的上升趨勢(shì)，且在第9個(gè)月的BFRBS指標(biāo)與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P結(jié)論自擬強(qiáng)骨飲可以明顯改善骨形態(tài)計(jì)量學(xué)骨形成指標(biāo)，可能是通過(guò)刺激成骨細(xì)胞生長(zhǎng)，并抑制高骨轉(zhuǎn)趨勢(shì)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。由此證明強(qiáng)骨飲對(duì)增加骨量、提高骨質(zhì)量、降低骨轉(zhuǎn)換有較好的作用，能較好的促進(jìn)骨形成，且長(zhǎng)期療效可觀，為臨床應(yīng)用提供了的實(shí)驗(yàn)依據(jù)和理論價(jià)值。

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簡(jiǎn)介：第二軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文特發(fā)性聲帶麻痹患者喉返神經(jīng)及環(huán)杓后肌形態(tài)學(xué)觀察THEMORPHOLOGICALOBSERVATIONOFRECURRENTLARYNGEALNERVEANDPOSTERIORCRICOARYTENOIDMUSCLEINPATIENTSWITHIDIOPATHICVOCALFOLDPARALYSIS研究生姓名馬情情指導(dǎo)教師鄭宏良教授導(dǎo)師組成員陳世彩陳東輝朱敏輝劉菲李孟專(zhuān)業(yè)名稱(chēng)耳鼻咽喉科學(xué)培養(yǎng)單位第二軍醫(yī)大學(xué)附屬長(zhǎng)海醫(yī)院二。一五年五月目錄摘要?????????????????????????????1ABSTRACT????．???．?????．?????．????????．?．???．??????．．3縮略詞表????????????????????????????6前言???????????????????????????????????????7日U舌???????????????????????????????????????。／第一部分特發(fā)性聲帶麻痹喉返神經(jīng)的組織形態(tài)學(xué)研究????????9一、實(shí)驗(yàn)材料?????????????????????????9二、臨床資料????????????????????????．．11三、方法??????????????????????????．．12四、結(jié)果??????????????????????????．．12五．討論??????????????????????????．．19第二部分特發(fā)性聲帶麻痹環(huán)杓后肌組織形態(tài)學(xué)研究????????．23一、實(shí)驗(yàn)材料????????????????????????．．23二、臨床資料????????????????????????一24三、實(shí)驗(yàn)方法????????????????????????．．25四、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理???????????????????????．．26五、結(jié)果??????????????????????????一26六、討論??????????????????????????一29第三部分特發(fā)性聲帶麻痹環(huán)杓后肌運(yùn)動(dòng)終板形態(tài)學(xué)研究??????．31一、實(shí)驗(yàn)材料?????????????????????????31二、臨床資料????????????????????????．．33三、實(shí)驗(yàn)方法????????????????????????一34四、結(jié)果??????????????????????????．．34五、討論??????????????????????????一36全文小結(jié)???????????????????????????．39

簡(jiǎn)介：目的觀察振蕩磁場(chǎng)和或靜磁場(chǎng)下填充超順磁性殼聚糖質(zhì)粒PADTRACKBMP9明膠微球SPCPGM的生物活性人工骨促進(jìn)骨缺損愈合的作用，探討其成骨效果及其臨床應(yīng)用價(jià)值。方法1化學(xué)共沉淀法制備超順磁性殼聚糖納米微球SPFCN，用透射、掃描電鏡和振動(dòng)樣品磁強(qiáng)計(jì)等儀器對(duì)合成的SPFCN進(jìn)行形態(tài)觀察和結(jié)構(gòu)表征。2制備大量能夠在真核細(xì)胞中表達(dá)人骨形態(tài)發(fā)生蛋白BMP9HBMP9的質(zhì)粒PADTRACKBMP9。用PVUⅡ、SALⅠ雙酶切后行瓊脂糖凝膠電泳分析鑒定，對(duì)質(zhì)粒進(jìn)行DNA序列測(cè)定，用SMARTSPECTM3000核酸蛋白測(cè)定儀測(cè)定其純度和濃度。3制備超順磁性殼聚糖質(zhì)粒PADTRACKBMP9復(fù)合物SPCPN。用瓊脂糖凝膠電泳觀測(cè)超順磁性殼聚糖納米球SPFCN與質(zhì)粒PADTRACKBMP9的結(jié)合能力。4用交聯(lián)固化法制備超順磁性殼聚糖質(zhì)粒明膠微球SPCPGM和不含質(zhì)粒的超順磁性殼聚糖明膠微球SPCGM。用納米羥基磷灰石聚酰胺骨水泥由四川大學(xué)納米生物材料研究中心提供制備中空帶側(cè)孔的仿兔橈骨中段骨缺損修復(fù)支架，將一定量的兩種微球分別填入中空支架中。5選用新西蘭大白兔60只，建立兔橈骨雙側(cè)骨缺損模型，隨機(jī)分為A組SPCPGM振蕩磁場(chǎng)靜磁場(chǎng)；B組SPCPGM靜磁場(chǎng)；C組SPCGM振蕩磁場(chǎng)靜磁場(chǎng)；D組SPCGM；E組空支架。術(shù)后1周、2周、4周、6周、8周、12周，搜集標(biāo)本，通過(guò)大體觀察，X線影像學(xué)檢測(cè)，組織切片光學(xué)顯微鏡觀察，求積儀測(cè)量和計(jì)算機(jī)圖像分析系統(tǒng)分析等方法對(duì)缺損處成骨情況進(jìn)行定性及定量測(cè)定，將所獲得的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，以評(píng)估五種不同處理組成骨的情況。結(jié)果1掃描電鏡下FE304納米粒外形呈圓形或橢圓形，均勻度好，粒徑為23±247NM；氮含量為00053MGL。振動(dòng)樣品磁強(qiáng)計(jì)檢測(cè)結(jié)果示制備的超順磁納米微球具有超順磁性。2質(zhì)粒PADTRACKBMP9經(jīng)擴(kuò)增、純化后，PVUⅡ、SALI雙酶切瓊脂糖凝膠電泳分析鑒定顯示BMP9片段大小與預(yù)期1290BP相符，基因序列測(cè)定結(jié)果表明，基因序列正確。用SMARTSPECTM3000核酸蛋白測(cè)定儀檢測(cè)質(zhì)粒濃度為113±007MML。3用瓊脂糖凝膠電泳分析SPFCN與質(zhì)粒PADTRACKBMP9結(jié)合時(shí)的最適氮磷NP比例為251。4磁場(chǎng)振動(dòng)磁場(chǎng)和或靜磁場(chǎng)下SPCPGM促進(jìn)人工骨成骨的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究表明①SPCPGM具有明顯的促進(jìn)體內(nèi)局部成骨的作用。②靜磁場(chǎng)能夠促進(jìn)SPCPGM體內(nèi)局部成骨作用，效果優(yōu)于使用SPCGM。③靜磁場(chǎng)和振動(dòng)磁場(chǎng)聯(lián)合應(yīng)用，能夠明顯提高SPCPGM體內(nèi)局部成骨作用，4周時(shí)已有大量成骨。④促進(jìn)成骨的作用的順序1SPCPGM振蕩磁場(chǎng)靜磁場(chǎng)；2SPCPGM靜磁場(chǎng)；3SPCGM振蕩磁場(chǎng)靜磁場(chǎng)；4SPCGM；5空支架。⑤振動(dòng)磁場(chǎng)的應(yīng)用，能夠促使局部磁性微球殘留量的明顯減少，這對(duì)避免局部藥物殘留可能造成的近期或遠(yuǎn)期的不良后果具有重要意義。結(jié)論在振動(dòng)磁場(chǎng)和靜磁場(chǎng)聯(lián)合應(yīng)用下，能夠明顯提高SPCPGM體內(nèi)局部成骨作用，4周時(shí)已可達(dá)到大量成骨；振動(dòng)磁場(chǎng)的應(yīng)用，能夠促使局部磁性微球殘留量的明顯減少，這對(duì)避免局部藥物殘留可能造成的近期或遠(yuǎn)期的不良后果具有重要意義。

簡(jiǎn)介：分類(lèi)號(hào)分類(lèi)號(hào)R7834密級(jí)一般密級(jí)一般UDC616314編號(hào)編號(hào)2010212313碩士學(xué)位論文組織蛋白酶組織蛋白酶D在不同種植方式種植義齒骨界面改建中在不同種植方式種植義齒骨界面改建中表達(dá)變化的研究表達(dá)變化的研究研究生研究生宋晶晶導(dǎo)師袁林教授申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別醫(yī)學(xué)碩士年級(jí)年級(jí)二零一零級(jí)學(xué)科專(zhuān)業(yè)外科學(xué)研究方向研究方向口腔修復(fù)學(xué)論文提交日期論文提交日期2013年5月論文答辯日期論文答辯日期2013年5月學(xué)位類(lèi)型學(xué)位類(lèi)型醫(yī)學(xué)專(zhuān)業(yè)學(xué)位學(xué)位授予單位學(xué)位授予單位廣州醫(yī)科大學(xué)答辯委員會(huì)主席答辯委員會(huì)主席評(píng)議人人2013年5月目錄中文摘要1英文摘要3縮略詞表5前言6材料和方法12結(jié)果16討論19小結(jié)26參考文獻(xiàn)27附錄一圖片34附錄二綜述39致謝58學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明59學(xué)位論文知識(shí)產(chǎn)權(quán)權(quán)屬聲明59關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的說(shuō)明59

簡(jiǎn)介：中圖法分類(lèi)號(hào)R322學(xué)校代碼10661學(xué)號(hào)2012048密級(jí)公開(kāi)碩士學(xué)位論文碩士學(xué)位論文（學(xué)術(shù)型學(xué)位）成肌調(diào)節(jié)因子成肌調(diào)節(jié)因子和肌抑制素肌抑制素在大鼠失神經(jīng)骨骼肌的表達(dá)在大鼠失神經(jīng)骨骼肌的表達(dá)姓名名董進(jìn)專(zhuān)業(yè)業(yè)人體解剖與組織胚胎學(xué)人體解剖與組織胚胎學(xué)研究方研究方向向骨骼肌骨骼肌再生再生的基礎(chǔ)研究的基礎(chǔ)研究導(dǎo)師師劉坤祥教授培養(yǎng)單位培養(yǎng)單位遵義醫(yī)學(xué)院遵義醫(yī)學(xué)院2015年5月目錄1論文成肌調(diào)節(jié)因子和肌抑制素在大鼠失神經(jīng)骨骼肌的表達(dá)中英縮略詞對(duì)照表1中文摘要2英文摘要4前言6材料與方法7結(jié)果16討論29結(jié)論32參考文獻(xiàn)332綜述363致謝524作者簡(jiǎn)介53

簡(jiǎn)介：多孔磷酸鈣生物陶瓷不僅具有良好的生物相容性，在一定條件下還表現(xiàn)出骨誘導(dǎo)性，即不用外加生長(zhǎng)因子或活體細(xì)胞可以在非骨部位誘導(dǎo)骨組織形成，在治療骨缺損等方面中具有光明的應(yīng)用前景。已有研究表明多孔磷酸鈣具有骨誘導(dǎo)性的材料學(xué)因素主要包括1多孔結(jié)構(gòu)；2相組成；3結(jié)晶度和力學(xué)性能等。前期動(dòng)物植入實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明多孔雙相陶瓷在體內(nèi)具有較強(qiáng)的成骨誘導(dǎo)能力，因此本論文實(shí)驗(yàn)主要采用多孔的HATCP雙相陶瓷。在骨誘導(dǎo)機(jī)理研究中，對(duì)于材料誘導(dǎo)的靶向細(xì)胞一直是猜測(cè)和假設(shè)骨髓基質(zhì)細(xì)胞或在植入部位出現(xiàn)的未分化的血管末梢干細(xì)胞，然而缺乏直接的體內(nèi)和體外數(shù)據(jù)證明，間充質(zhì)細(xì)胞的來(lái)源問(wèn)題需要進(jìn)一步研究。另外，在干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化過(guò)程中大量的基因參與表達(dá)，從材料基因表達(dá)的關(guān)系進(jìn)行看，鈣磷材料可以誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)控制成骨發(fā)育的關(guān)鍵基因在細(xì)胞中的上調(diào)表達(dá)嗎哪些不同的材料學(xué)因素影響這些基因的表達(dá)這些問(wèn)題構(gòu)成了本論文的研究?jī)?nèi)容。在磷酸鈣材料的骨誘導(dǎo)過(guò)程中，處于未分化的間充質(zhì)干細(xì)胞、定向的基質(zhì)干細(xì)胞、早期骨祖細(xì)胞、后期骨祖細(xì)胞、前成骨細(xì)胞到成骨細(xì)胞等，都可能是磷酸鈣陶瓷材料誘導(dǎo)的靶向細(xì)胞。本文主要采用了成骨細(xì)胞、骨髓基質(zhì)細(xì)胞、骨骼肌母細(xì)胞等可以向骨細(xì)胞分化的細(xì)胞類(lèi)型研究了磷酸鈣陶瓷骨誘導(dǎo)過(guò)程中對(duì)細(xì)胞的誘導(dǎo)分化作用，并從分子生物學(xué)水平提供了骨誘導(dǎo)的證據(jù)。首先，研究了多孔磷酸鈣陶瓷體外對(duì)原代培養(yǎng)的骨髓基質(zhì)細(xì)胞的誘導(dǎo)作用。多孔磷酸鈣陶瓷在植入狗的非骨部位一定時(shí)間后組織學(xué)觀察可以在陶瓷的孔隙中形成骨組織，因此，抽取小鼠骨髓，分離培養(yǎng)原代的骨髓基質(zhì)細(xì)胞，體外與各種多孔的磷酸鈣陶瓷材料復(fù)合培養(yǎng)，研究其對(duì)原代細(xì)胞的誘導(dǎo)作用。如果能觀察到多孔磷酸鈣陶瓷對(duì)分離培養(yǎng)的骨髓基質(zhì)細(xì)胞起到骨誘導(dǎo)作用，即骨髓基質(zhì)細(xì)胞為骨誘導(dǎo)過(guò)程中的靶向細(xì)胞，那么在培養(yǎng)一定時(shí)間后應(yīng)該可以觀察到骨組織的形成。為驗(yàn)證這一假設(shè)，設(shè)計(jì)了擴(kuò)散盒模型，即多孔磷酸鈣陶瓷與分離培養(yǎng)的大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞一起裝入到擴(kuò)散盒中，然后植入到動(dòng)物肌肉中，以屏蔽宿主的自身細(xì)胞，利用動(dòng)物自身的血液循環(huán)和營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，植入一定時(shí)間后，觀察其成骨情況。在植入半年后，組織學(xué)切片觀察到多孔陶瓷孔隙里面已形成骨組織，證實(shí)了這一假設(shè)，進(jìn)一步為鈣磷陶瓷的骨誘導(dǎo)性提供直接證據(jù)。其次，體外培養(yǎng)研究了磷酸鈣陶瓷材料的材料學(xué)因素對(duì)成骨細(xì)胞骨誘導(dǎo)過(guò)程中細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖、骨相關(guān)基因的表達(dá)等。體外培養(yǎng)情況下，細(xì)胞通常是生長(zhǎng)在材料的表面上，因此，以多孔磷酸鈣陶瓷形成類(lèi)骨磷灰石層后為研究材料，研究材料表面形貌變化對(duì)成骨細(xì)胞的影響；同時(shí)，由于不同相成份和不同燒結(jié)溫度下的磷酸鈣陶瓷在培養(yǎng)基中的溶解性不一樣，對(duì)細(xì)胞的影響也不一樣，故同時(shí)還采用了多種不同相成份和燒結(jié)溫度的磷酸鈣陶瓷材料。結(jié)果表明鈣磷陶瓷不同的相成份和燒結(jié)溫度能夠影響骨相關(guān)基因的表達(dá)，其表面形成類(lèi)骨磷灰石層后能促進(jìn)成骨細(xì)胞對(duì)骨鈣素和Ⅰ型膠原基因的表達(dá)。最后，由于肌肉組織中也存在大量的多能干細(xì)胞類(lèi)型，因此以骨骼肌母細(xì)胞C2C12系為細(xì)胞模型，我們研究了多孔磷酸鈣陶瓷對(duì)肌母細(xì)胞的骨誘導(dǎo)過(guò)程中骨特異基因的表達(dá)情況。多孔磷酸鈣陶瓷在骨誘導(dǎo)過(guò)程中，即骨的形成過(guò)程中，同時(shí)伴隨著細(xì)胞的成骨定向分化及骨相關(guān)基因CBFAL，OCN，TYPEⅠCOLLAGEN，OSTCOPONTIN等等的表達(dá)。CBFAL為多能干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化的關(guān)鍵調(diào)控因子，通過(guò)進(jìn)一步定量研究多孔磷酸鈣陶瓷對(duì)骨骼肌母細(xì)胞骨誘導(dǎo)過(guò)程中CBFAL和OCN基因的表達(dá)情況發(fā)現(xiàn)，骨誘導(dǎo)過(guò)程中伴隨著干細(xì)胞的這一分化過(guò)程，CBFAL，這一關(guān)鍵基因被激活并高效表達(dá)，從而引起細(xì)胞進(jìn)一步分化，出現(xiàn)確定成骨細(xì)胞功能的標(biāo)志性基因OCN的表達(dá)。