簡(jiǎn)介：重慶醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文博爾納病病毒核蛋白抗體ELISA檢測(cè)方法的構(gòu)建姓名霍康申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師謝鵬20090501重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文結(jié)果1、成功構(gòu)建了可用于BDV核蛋白基因表達(dá)的重組質(zhì)粒。重組質(zhì)粒經(jīng)酶切鑒定及核酸序列分析驗(yàn)證正確。2、成功的在大腸桿菌中表達(dá)了BDV重組核蛋白。重組蛋白具有較高的純度和良好的免疫原性。SDSPAGE分析表明，經(jīng)過(guò)親和層析后ECOLI中表達(dá)的重組蛋白純度可達(dá)90％；WB分析表明，重組博爾納病病毒核蛋白具有良好的免疫原性；質(zhì)譜鑒定，表明重組博爾納病病毒核蛋白與天然博爾納病病毒核蛋白結(jié)構(gòu)一致。3、驗(yàn)證了重組核蛋白與抗體之間具有特異性結(jié)合能力，說(shuō)明重組蛋白可以作為包被抗原使用。ELISA法確定重組BDV核蛋白與單克隆抗體具有隨稀釋濃度改變的特異性結(jié)合能力，但與其它抗體則無(wú)此量效關(guān)系。4、初步建立了博爾納病病毒核蛋白抗體雙抗原夾心ELISA檢測(cè)法，測(cè)定了最佳抗原包被濃度及最佳酶標(biāo)抗原濃度等參數(shù)。結(jié)論L、重組BDV核蛋白與天然的BDV病毒核蛋白具有一致的免疫原性與結(jié)合力，可用于替代天然BDV病毒核蛋白用于ELISA的檢測(cè)。2、初步建立了雙抗原檢測(cè)血清中博爾納病病毒抗體ELISA檢測(cè)方法，確定了部分技術(shù)參數(shù)。關(guān)鍵詞博爾納病病毒，核蛋白，ELISA，檢測(cè)4

簡(jiǎn)介：碩士學(xué)位論文論文題目褪黑素對(duì)大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血后繼發(fā)性腦損傷及認(rèn)知功能影響機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究研究生姓名吳凌云指導(dǎo)教師姓名王中專(zhuān)業(yè)名稱(chēng)神經(jīng)外科研究方向腦血管病的基礎(chǔ)與臨床研究論文提交日期2014年5月

簡(jiǎn)介：目的通過(guò)登革2型病毒（DEN2）NGC株感染小鼠髓源性樹(shù)突狀細(xì)胞（DC），觀察DEN2感染DC后CD11C、CD86、IAIE、TLR4和TLR7的表達(dá)，為研究DEN2感染的發(fā)病機(jī)制提供科學(xué)依據(jù)。方法BALBC乳鼠腦內(nèi)接種及C636細(xì)胞增殖病毒，RTPCR鑒定病毒核酸50％組織細(xì)胞感染量（TCID50）測(cè)定病毒毒力；RMGMCSF和RMIL4聯(lián)合誘導(dǎo)鼠源性DC，鑒定細(xì)胞及其純度；直接免疫熒光法觀察DEN2感染DC流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)DC細(xì)胞被DEN2感染后膜表面分子CD11C、CD86、MHCII類(lèi)分子表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化；實(shí)時(shí)熒光定量PCR動(dòng)態(tài)檢測(cè)DEN2NGC株感染DC細(xì)胞后DEN2MRNA、TLR4和TLR7MRNA水平表達(dá)的變化。結(jié)果1、DEN2對(duì)C636細(xì)胞的TCID50為1058。2、用IL4和GMCSF誘導(dǎo)C57BL6小鼠骨髓來(lái)源細(xì)胞，5D后通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)鑒定其DC的純度達(dá)到70。3、DEN2能夠感染小鼠骨髓來(lái)源DC。4、與陰性對(duì)照組相比，接種病毒組（1104TCID50）的DCS膜表面分子CD86、IAIE的百分率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P005）。與陰性對(duì)照組相比，接種病毒組（1105TCID50）的DCS膜表面分子CD86、IAIE的百分率差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜005），但各組其百分率的變化并未隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，呈現(xiàn)出明顯的上升或下降的趨勢(shì)；隨著病毒劑量的增加，DCS膜表面分子CD86、IAIE的百分率呈現(xiàn)出上升的趨勢(shì)。5、與陰性對(duì)照組比較，REALTIMEPCR證明各組病毒MRNA水平隨著病毒劑量的增大而逐漸升高。6、與陰性對(duì)照組比較，REALTIMEPCR檢測(cè)各組被DEN2感染的DCTLR4、TLR7MRNA隨著病毒劑量的增加，呈現(xiàn)下調(diào)的趨勢(shì)。結(jié)論1、DEN2可促進(jìn)DC的成熟。2、DEN2感染DC后，TLR4、TLR7MRNA水平隨病毒MRNA水平的增加而降低，提示TLR4、TLR7與病毒感染密切相關(guān)，在DEN致病中發(fā)揮了一定的作用和功能。

簡(jiǎn)介：獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已注明引用的內(nèi)容以外，本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的作品成果，也不包含為獲得江蘇大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料。對(duì)本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均己在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識(shí)到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名豆曼耋≥如IF年易肌B日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)㈨UL131111TIIT111LLFLIY1894258江蘇大學(xué)、中國(guó)科學(xué)技術(shù)信息研究所、國(guó)家圖書(shū)館、中國(guó)學(xué)術(shù)期刊光盤(pán)版電子雜志社有權(quán)保留本人所送交學(xué)位論文的復(fù)印件和電子文檔，可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文。本人電子文檔的內(nèi)容和紙質(zhì)論文的內(nèi)容相一致，允許論文被查閱和借閱，同時(shí)授權(quán)中國(guó)科學(xué)技術(shù)信息研究所將本論文編入中國(guó)學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)并向社會(huì)提供查詢(xún)，授權(quán)中國(guó)學(xué)術(shù)期刊光盤(pán)版電子雜志社將本論文編入中國(guó)優(yōu)秀博碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)并向社會(huì)提供查詢(xún)。論文的公布包括刊登授權(quán)江蘇大學(xué)研究生處辦理。本學(xué)位論文屬于不保密∥。學(xué)位論文作者簽名多曼荔鄉(xiāng)勱L、年6月R日指剝幣簽名弓吞疋7為。年Z7月FY日紗L。一‘一。

簡(jiǎn)介：GRADUATIONREPORTFORMASTEROFINTERPRETATIONINFLUENCEOFSHORTTERMPREPARATIONONACCURACYINSIMULTANEOUSINTERPRETINGWITHTEXTFROMTHEPERSPECTIVEOFTHEEFFORTMODELBYHUANGJIASUPERVISERPROFCHENYANJANPRACTICETUTORMSZHENGMEISCHOOLOFINTERNATIONALSTUDIESUNIVERSITYOFINTERNATIONALBUSINESSANDECONOMICSMAY2015畢業(yè)報(bào)告版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本人完全了解對(duì)外經(jīng)濟(jì)貿(mào)易大學(xué)關(guān)于收集、保存、使用畢業(yè)報(bào)告的規(guī)定，同意如下各項(xiàng)內(nèi)容按照學(xué)校要求提交畢業(yè)報(bào)告的印刷本和電子版本；學(xué)校有權(quán)保存畢業(yè)報(bào)告的印刷本和電子版，并采用影印、縮印、掃描、數(shù)字化或其它手段保存畢業(yè)報(bào)告；學(xué)校有權(quán)提供目錄檢索以及提供本畢業(yè)報(bào)告全文或部分的閱覽服務(wù)；學(xué)校有權(quán)按照有關(guān)規(guī)定向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或者機(jī)構(gòu)送交畢業(yè)報(bào)告；在以不以贏利為目的的前提下，學(xué)?？梢赃m當(dāng)復(fù)制畢業(yè)報(bào)告的部分或全部?jī)?nèi)容用于學(xué)術(shù)活動(dòng)口保密的畢業(yè)報(bào)告在解密后遵守此規(guī)定。報(bào)告作者簽名指導(dǎo)教師簽名／OLT年廠月JEL2口冉F只TZET

簡(jiǎn)介：背景小口徑人工血管移植術(shù)后出現(xiàn)內(nèi)膜增生和血栓形成，導(dǎo)致通暢率不理想，主要是因?yàn)槿斯ぱ鼙砻嫒狈ν暾膬?nèi)皮層。目前已經(jīng)證實(shí)通過(guò)人工血管表面快速內(nèi)皮化可以減少再狹窄的發(fā)生。人工血管內(nèi)皮化的研究已經(jīng)從種植內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)展到基因分子水平。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子VEGF是誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)作用最強(qiáng)、特異性最高的一種生長(zhǎng)因子。VEGF蛋白涂層和基因質(zhì)粒轉(zhuǎn)染都有其明顯的缺陷。而腺病毒作為載體轉(zhuǎn)染取得了很好的效果。目的觀察人工血管攜帶腺病毒介導(dǎo)的VEGF基因轉(zhuǎn)染內(nèi)皮細(xì)胞的效果、VEGF基因和蛋白的表達(dá)以及對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)的影響。材料和方法1AD5EGFP轉(zhuǎn)染EAHY926轉(zhuǎn)染率的測(cè)定。2人工血管攜帶腺病毒在靜水中的釋放情況。3人工血管上內(nèi)皮細(xì)胞的貼附情況。4AD5VEGF165IRESEGFP轉(zhuǎn)染EAHY926，RTPCR半定量檢測(cè)VEGF基因水平表達(dá)。5人工血管攜帶AD5VEGF165IRESEGFP轉(zhuǎn)染EAHY926，ELISA法檢測(cè)VEGF蛋白水平表達(dá)。6人工血管攜帶AD5VEGF165IRESEGFP轉(zhuǎn)染EAHY926，MTT法檢測(cè)對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)的影響。結(jié)果1AD5轉(zhuǎn)染率隨MOI的增加而增加，MOI200時(shí)達(dá)到873％。2人工血管上消化下來(lái)發(fā)熒光的細(xì)胞在最初的1H內(nèi)，下降最為明顯。稀釋液中基本沒(méi)有發(fā)熒光的細(xì)胞。3電鏡顯示內(nèi)皮細(xì)胞貼附在人工血管上。4AD5VEGF165轉(zhuǎn)染組RTPCR有VEGF基因的表達(dá)，第3天比第1天表達(dá)強(qiáng)烈。對(duì)照組沒(méi)有表達(dá)。5AD5VEGF165轉(zhuǎn)染組上清液中有VEGF蛋白的表達(dá)，呈上升趨勢(shì)第5天達(dá)峰后開(kāi)始下降。對(duì)照組沒(méi)有表達(dá)。6AD5VEGF165轉(zhuǎn)染組OD值呈快速上升趨勢(shì)，對(duì)照組上升緩慢。結(jié)論1AD5轉(zhuǎn)染EAHY926的最適MOI為200。2人工血管上攜帶的病毒靜水中能在人工血管上保留1H左右，這是一個(gè)逐漸釋放的過(guò)程，而不是瞬時(shí)釋放。3內(nèi)皮細(xì)胞能夠附著在人工血管上。4AD5VEGF165IRESEGFP能轉(zhuǎn)染EAHY926，HVEGF165基因水平成功表達(dá)。5人工血管攜帶AD5VEGF165IRESEGFP能轉(zhuǎn)染EAHY926，HVEGF165蛋白水平成功表達(dá)6人工血管攜帶AD5VEGF1651RESEGFP能促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的增殖。

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多臨床護(hù)士衛(wèi)生相關(guān)法律法規(guī)認(rèn)知狀況調(diào)查與干預(yù)研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：東南大學(xué)博士學(xué)位論文遺忘型輕度認(rèn)知障礙患者多模態(tài)磁共振成像研究姓名柏峰申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專(zhuān)業(yè)臨床醫(yī)學(xué)；內(nèi)科學(xué)指導(dǎo)教師張志珺20110609東南大學(xué)博士學(xué)位論文匹配的正常老年人為受試對(duì)象，采用全面的神經(jīng)認(rèn)知量表評(píng)估其神經(jīng)認(rèn)知功能。繼而，利用多模態(tài)MRI三維結(jié)構(gòu)成像、彌散張量成像、任務(wù)狀態(tài)功能成像和靜息狀態(tài)功能成像隨訪研究。1基線(xiàn)期首先探討海馬結(jié)構(gòu)和任務(wù)狀態(tài)下海馬功能，較細(xì)致地探討AMCI患者海馬結(jié)構(gòu)與功能的損害模式。其次，從白質(zhì)纖維束完整性研究AMCI患者白質(zhì)損害情況；進(jìn)一步從白質(zhì)損害與海馬萎縮關(guān)系的角度，探討白質(zhì)異常的可能機(jī)制。最后，鑒于既往AD靜息態(tài)FMRI研究產(chǎn)生了豐富的、有價(jià)值的發(fā)現(xiàn)，而AMCI階段的研究證據(jù)相對(duì)缺乏，于是從默認(rèn)網(wǎng)絡(luò)的角度探討AMCI的靜息功能損害模式。2隨訪期以基線(xiàn)期研究以及以往AD研究的發(fā)現(xiàn)作為基礎(chǔ)，并結(jié)合本研究中AMCI本身認(rèn)知損害特點(diǎn)，檢測(cè)腦結(jié)構(gòu)隨訪改變情況，重點(diǎn)關(guān)注全腦網(wǎng)絡(luò)、小腦網(wǎng)絡(luò)、自我指示網(wǎng)絡(luò)SELFREFERENTIALNETWORK，SIⅢ、海馬亞區(qū)網(wǎng)絡(luò)以及默認(rèn)網(wǎng)絡(luò)DEFAULTMODENETWORK，DMN，結(jié)合實(shí)驗(yàn)狀態(tài)、隨訪時(shí)限，從不同層面和角度探討AMCI患者靜息狀態(tài)下腦網(wǎng)絡(luò)的進(jìn)展性損害模式。第一部分基線(xiàn)期AMCI認(rèn)知功能評(píng)估及多模態(tài)FMRI掃描第一章基線(xiàn)期AMCI臨床評(píng)估及多模態(tài)IMRI掃描策略本論文基線(xiàn)研究首先采用三階段臨床篩查與評(píng)估方法在1480名老人中確診了115例AMCI患者和126例相匹配的正常老人，進(jìn)而完成48例AMCI患者和36例嚴(yán)格匹配的正常老人多模態(tài)FMRI掃描影像掃描時(shí)間2006年8月至2008年2月?？傮w介紹基線(xiàn)期AMCI患者與正常對(duì)照組知情同意情況、AMCI組與正常對(duì)照組入組／排除標(biāo)準(zhǔn)、臨床入組概況、神經(jīng)心理評(píng)估測(cè)試、建立情節(jié)記憶任務(wù)刺激模式、多模態(tài)FMRI掃描程序及參數(shù)等基本情況。第二章基線(xiàn)期AMCI患者海馬結(jié)構(gòu)及其功能網(wǎng)絡(luò)損害模式目的探討AMCI患者海馬結(jié)構(gòu)及功能網(wǎng)絡(luò)損害模式。方法1通過(guò)手工勾畫(huà)海馬結(jié)構(gòu)，比較AMCI患者與正常對(duì)照組海馬體積差異實(shí)驗(yàn)一；2通過(guò)情節(jié)記憶任務(wù)狀態(tài)下海馬功能連接分析，檢測(cè)AMCI海馬情節(jié)記憶網(wǎng)絡(luò)與對(duì)照組差異實(shí)驗(yàn)。結(jié)果1基線(xiàn)期AMCI患者的海馬體積顯著小于正常對(duì)照組，進(jìn)一步分析顯示AMCI組女性患者的海馬體積萎縮率為18％，男性患者為24％。2執(zhí)行情節(jié)記憶任務(wù)時(shí)，AMCI患者僅出現(xiàn)海馬與局部前額葉、顳葉、頂葉以及小腦功能連接降低的趨勢(shì)Ⅱ

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多先天性巨細(xì)胞病毒中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染對(duì)學(xué)習(xí)記憶及突觸可塑性相關(guān)信號(hào)通路的影響.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：目的應(yīng)用基因芯片技術(shù)，研究慢性乙型病毒性肝炎肝郁脾虛證和脾胃濕熱證患者差異基因表達(dá)譜變化P＜005，篩選出與證型相關(guān)的差異基因，找到差異基因所表達(dá)的基因功能，為慢性乙型病毒性肝炎中醫(yī)證型客觀化研究和辨證治療提供一定的依據(jù)。方法本研究在前期課題組臨床調(diào)研及文獻(xiàn)研究結(jié)果基礎(chǔ)上，選取慢性乙型病毒性肝炎臨床常見(jiàn)證候肝郁脾虛證和脾胃濕熱證進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究。以成都市傳染病醫(yī)院、四川大學(xué)華西醫(yī)院、成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院收集的慢性乙型病毒性肝炎肝郁脾虛證和脾胃濕熱證患者及健康人為研究對(duì)象。將慢性乙型病毒性肝炎患者分為肝郁脾虛證組、脾胃濕熱證組，同時(shí)設(shè)立正常人群對(duì)照組。提取每例患者外周血液6ML加入已涂布EDTA的50ML離心管中，加入紅細(xì)胞裂解液，離心，洗滌，加入TRIZOL，將分離出的白細(xì)胞轉(zhuǎn)入15MLEP管中，得到要研究的樣品，將樣品用編號(hào)編好后放置于80℃冰箱中保存。及時(shí)將樣本包裝后埋入含有干冰的泡沫箱中，嚴(yán)格密封后，通過(guò)快遞公司空運(yùn)至上海伯豪生物技術(shù)有限公司。由上海伯豪生物技術(shù)有限公司技術(shù)人員完成樣品質(zhì)檢，全部合格后進(jìn)入實(shí)驗(yàn)階段，提取RNA，逆轉(zhuǎn)錄為CDNA，運(yùn)用基因芯片進(jìn)行芯片雜交及掃描，完成基因芯片的制備。最后在SAS軟件中完成肝郁脾虛證和脾胃濕熱證差異基因的篩選，并對(duì)差異基因進(jìn)行功能顯著性分析。結(jié)果1按照PVALUE＜005的標(biāo)準(zhǔn)篩選出肝郁脾虛證相關(guān)的1401個(gè)差異表達(dá)探針，其中包括592個(gè)上調(diào)及809個(gè)下調(diào)。有功能注釋的差異基因939條。2照PVALUE＜005的標(biāo)準(zhǔn)篩選出脾胃濕熱證相關(guān)的2011個(gè)差異表達(dá)探針，其中包括807個(gè)上調(diào)及1204個(gè)下調(diào)。有功能注釋的差異基因1376條。3對(duì)與肝郁脾虛證相關(guān)差異基因功能顯著性分析發(fā)現(xiàn)差異基因所表達(dá)的功能主要為對(duì)外界刺激的反應(yīng)、碳水化合物的結(jié)合、多細(xì)胞機(jī)體應(yīng)激反應(yīng)）、細(xì)胞發(fā)育、生長(zhǎng)發(fā)育等。4對(duì)與脾胃濕熱證相關(guān)的差異基因功能顯著性分析發(fā)現(xiàn)差異基因所表達(dá)的基因功能主要為解剖學(xué)形態(tài)結(jié)構(gòu)的形成、運(yùn)動(dòng)調(diào)節(jié)、細(xì)胞遷移、細(xì)胞粘附、定位調(diào)節(jié)、調(diào)節(jié)穩(wěn)態(tài)過(guò)程等。結(jié)論慢性乙型病毒性肝炎肝郁脾虛證與脾胃濕熱證存在與證型相關(guān)的差異基因。差異基因參與多種基因功能的表達(dá)，在兩大證型中差異基因所表達(dá)的基因功能存在差異。對(duì)中醫(yī)證候的客觀化研究具有參考價(jià)值。

簡(jiǎn)介：論文作者簽名鞋塑指導(dǎo)教師簽名盞笙蘭皇論文評(píng)閱人1評(píng)閱人2評(píng)閱人3評(píng)閱人4評(píng)閱人5答辯委員會(huì)主席醫(yī)智熬援逝江太堂佳鎏痘硒究壓委員1菹丞赴熬援逝江蟲(chóng)醫(yī)藥太堂委員2夏吐?lián)P熬握逝江省瘞痘亟隨控劍生墜委員3儉型邀副主任醫(yī)婭逝二醫(yī)院委員4塞彪主任醫(yī)婭逝二醫(yī)院委員5答辯日期矽L’1浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文致謝致謝七年的大學(xué)生活即將結(jié)束，在碩士學(xué)位論文定稿之際，兩年的研究所生活即將畫(huà)上句號(hào)，艱辛而快樂(lè)的求學(xué)之路，給我留下了深刻的記憶?；叵胱邅?lái)的醫(yī)路，一路上有許許多多的人為我提供了無(wú)私的幫助和支持，使我在前進(jìn)的道路上不感到孤獨(dú)和迷茫，他們真誠(chéng)的付出讓我無(wú)以為報(bào)，在此謹(jǐn)以我最誠(chéng)摯的感謝祝愿他們一生幸福安康。首先，感謝我尊敬的導(dǎo)師李蘭娟院士，我的碩士生階段凝集了李老師無(wú)數(shù)的勤勞和汗水。兩年來(lái)，李老師對(duì)我在學(xué)J工作上諄諄教誨、為人處世上循循善誘，生活瑣事上關(guān)懷備至。李老師不僅是一位良師，也是一位可親的長(zhǎng)者，她平易近人，樂(lè)意和學(xué)生交流，關(guān)心她的每一個(gè)學(xué)生，她高尚的品格，高超的技藝，淵博的知識(shí)，開(kāi)闊的學(xué)術(shù)視野、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)闹螌W(xué)態(tài)度以及精益求精的敬業(yè)精神一點(diǎn)一滴地影響著我，將使我終生受益。本論文是在思師李蘭娟院士的悉心指導(dǎo)下完成的。值此論文完成之際，謹(jǐn)向我的導(dǎo)師李蘭娟院士致以最衷心的感謝和最崇高的敬意同時(shí)感謝浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院及研究生處的各位領(lǐng)導(dǎo)、老師的支持和幫助。感謝浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院傳染科的各位老師，盛吉芳主任、梁偉峰主任、何劍琴主任、徐凱進(jìn)主任、杜維波主任、曹紅翠研究員、盛國(guó)平醫(yī)師以及全體等染科護(hù)士對(duì)我臨床工作的指導(dǎo)和幫助。他們?cè)谖胰粘５墓ぷ?、學(xué)J中，給了我許多的指點(diǎn)和幫助，使我能夠打下良好的專(zhuān)業(yè)基礎(chǔ)，為我能夠成長(zhǎng)成一位傳染科醫(yī)師做出了很多努力。同時(shí)我也要感謝我臨床輪轉(zhuǎn)過(guò)的消化科科的項(xiàng)尊主任、陳毅鵬主任等老師及內(nèi)分泌科李成江主任、陳敏老師的指導(dǎo)和幫助，他們使我獲得了較為扎實(shí)的內(nèi)科基礎(chǔ)知識(shí)，他們的許多臨床思路及作風(fēng)都對(duì)我的成長(zhǎng)起到了很大的促進(jìn)作用。感謝俞亮、楊英、陶晶晶、張研及其他各位師兄師姐、同學(xué)兩年來(lái)在臨床和科研工作中給予的指導(dǎo)和幫助，朝夕相處和相互扶持。感謝我的父母和家人，他們的理解和支持是我克服困難、不斷進(jìn)取、不斷突破的動(dòng)力。

簡(jiǎn)介：福建醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文骨橋蛋白特異性SIRNA慢病毒表達(dá)載體的構(gòu)建及其在U251膠質(zhì)瘤細(xì)胞中沉默效應(yīng)的鑒定姓名黃智勇申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師晉雯20090501CONSTRUCTIONOFLENTIVIRALVECTOROFSIRNASPECIFICFOROSTEOPONTINANDCHARACTERIZATIONOFITSEFFICIENCYINU251GLIOMACELLLINEABSTRACTOBJECTIVETOOBSERVETHEINFLUENCEOFLENTIVIRALVECTORMEDIATEDSMALLINTERFERENCERNAONEXPRESSIONOFHUMANOSTEOPONTINGENEINHUMANGLIOMACELLLINEU251，SOASTOPAVEAWAYFOROPNGENETARGETEDGENETHERAPYOFGLIOMAETHODSGENEENGINEERINGTECHNIQUEWASUSEDTOSCREENSMALLINTERFERENCERNASEQUENCESTARGETINGOPNGENE，THESEQUENCESWERESEPARATELYCLONEDINTOTHEPGCLGFPVECTORTOCONSTRUCTLVOPNSHRNA，WHICHWASSUBSEQUENTLYCONFIRMEDBYPCRANDDNASEQUENCINGANALYSISTHETITEROFLENTIVIRUSWASDETERMINEDAFTER293TCELLSWERECOTRANSFECTED謝THLVOPNSHRNA，PHELPER10，PHELPER20THERECOMBINANT1ENTIVIRUSEWASINJECTEDINTOU251CELLSANDTHEMRNAANDPROTEINEXPRESSIONWEREEXAMINEDBYRTPCRANDWESTERNBLOTTING，THEPROLIFERATIONOFU251WASDETECTEDBYMTTASSAYTHEEFFECTSOFLVOPNSHRNAONINVASIONOFTHETRANSFECTEDCELLSWEREINVESTIGATEDBYRECONSTITUTEDMATRIGELINVASIONANDPOLYCARBONATEFILTERSMIGRATIONEXPERIMENTSRESULT1LENTIVIRALSIRNAVECTORSOFOPNGENEHAVEBEENSUCCESSFULLYCONSTRUCTED，2AFTERTRANSFECTION、】L，ITHLVOPNSHRNA，OPNEXPRESSIONINU251CELLSWASSIGNIFICANTLYINHIBITEDATBOTHMRNAANDPROTEINLEVELSCOMPARED、析THTHENONTRANSFECTEDANDEMPTYVECTORTRANSFECTEDU251CELLS3AFTERTRANSFECTIONWITLLLVOPNSHRNAMTTASSAYSHOWEDTHATTHEPROLIFERATIONOFU251CELLSWASSIGNIFICANTLYINHIBITEDCOMPAREDWITLLTHENONTRANSFECTEDANDEMPTYVECTORTRANSFECTEDU251CELLS4AFTERTRANSFECTIONWI廿LLVOPNSHRNATHEINVASIONOFU251CELLSWASSIGNIFICANTLYINHIBITEDCOMPAREDWITHTHENONTRANSFECTEDANDEMPTYVECTORTRANSFECTEDU251CELLSCONCLUSIONTHEOPNGENEWASSUCCESSFULLYSILENCEDINU251CELLSBYSIRNA，THEPROLIFERATIONANDINVASIONOFU251CELLSWEREOBVIOUSLYINHIBITEDANDITIMPLIESTHATOPNGENEKNOCKDOWNASANEWSTRATEGYINTHECLINICALTREATMENTOFHUMANGLIOMAKEYWORDSRNAINTERFERENCE；OSTEOPONTIN；LENTIVIRALVECTORS；GLIOMA5

簡(jiǎn)介：上海交通大學(xué)碩士學(xué)位論文第一部分第一部分前列腺癌骨轉(zhuǎn)移模型的建立及前列腺癌骨轉(zhuǎn)移模型的建立及RAAVHGFK1抗腫瘤治療作用的抗腫瘤治療作用的研究研究1緒論緒論前列腺癌是男性常見(jiàn)惡性腫瘤，平均發(fā)病年齡為72歲，并且隨著年齡的增長(zhǎng)發(fā)病率不斷增加。在歐美國(guó)家，前列腺癌是男性最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，發(fā)病率都在1010萬(wàn)以上，在美國(guó)前列腺癌發(fā)病率居男性惡性腫瘤中第一位，死亡率僅次于肺癌，占第二位。每六個(gè)美國(guó)老年人中就將會(huì)有一個(gè)人患前列腺癌，僅2005年一年就有235，000例前列腺癌新發(fā)病例，其中29，000人死于前列腺癌。隨著人口老齡化及生活條件的改善，在我國(guó)其發(fā)病率也呈明顯的上升趨勢(shì)，上海地區(qū)前列腺癌發(fā)病率1985年是2610萬(wàn)，到2000年增長(zhǎng)到了7710萬(wàn)，北京地區(qū)1985年發(fā)病率是23610萬(wàn)，從1985年至1995年，城區(qū)前列腺癌發(fā)病率上升了23倍，顧方六等對(duì)全國(guó)30個(gè)省、市、自治區(qū)187所醫(yī)院1997年住院患者進(jìn)行調(diào)查，與30年前相比，各醫(yī)院前列腺癌住院患者均有增加，增加3倍以上的醫(yī)院占473％、2倍237％、1倍290％。北京大學(xué)第一醫(yī)院北京大學(xué)泌尿外科研究所的前列腺癌住院患者從1951年的33％上升至2000年134％。吉林大學(xué)前列腺疾病防治研究中心張海峰等測(cè)定了長(zhǎng)春市12027名55歲以上男性的前列腺特異性抗原PSA，以PSA40NGML者確定為前列腺癌可疑病例，經(jīng)直腸行超聲引導(dǎo)下前列腺6點(diǎn)活檢，前列腺癌發(fā)現(xiàn)率為057％1。前列腺癌患者極易發(fā)生骨轉(zhuǎn)移，超過(guò)80的前列腺癌患者會(huì)發(fā)生骨轉(zhuǎn)移。死于前列腺癌的患者中85～100合并骨轉(zhuǎn)移。骨轉(zhuǎn)移病灶可見(jiàn)于髂骨、椎體、肋骨、顱骨和長(zhǎng)骨近端等，大多發(fā)生在骨骼中軸線(xiàn)血運(yùn)豐富的部位，考慮前列腺癌骨轉(zhuǎn)移的發(fā)生可能與血流動(dòng)力學(xué)有關(guān)。最常見(jiàn)的也是最早的前列腺癌骨轉(zhuǎn)移的臨床表現(xiàn)是骨骼的疼痛，其次轉(zhuǎn)移的骨骼很容易發(fā)生病理性骨折。1889年P(guān)AGET等提出“種子和土壤”學(xué)說(shuō)試圖解釋特異性骨轉(zhuǎn)移的現(xiàn)象，如研究發(fā)現(xiàn)肺癌、腎癌、甲狀腺癌及前列腺癌易發(fā)生骨轉(zhuǎn)移；而胃癌和卵巢癌則罕見(jiàn)骨轉(zhuǎn)移，這說(shuō)明不同類(lèi)型腫瘤在親骨、定位生長(zhǎng)以及與骨基質(zhì)結(jié)合方面存在明顯差異。但總的來(lái)說(shuō)，骨干骺端血管結(jié)構(gòu)與腫瘤細(xì)胞的粘附、腫瘤細(xì)胞向血管外浸潤(rùn)與骨基質(zhì)的粘附、腫瘤細(xì)胞與骨細(xì)胞及骨髓微環(huán)境的交互作用等方面在骨轉(zhuǎn)移的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中起著決定性的作用。早在1971年FOLKMAN就發(fā)現(xiàn)腫瘤生長(zhǎng)依賴(lài)于血管生成，腫瘤的生長(zhǎng)有兩個(gè)明顯不同的階段，即從無(wú)血管的緩慢生長(zhǎng)階段轉(zhuǎn)變?yōu)橛醒艿目焖僭鲋畴A段，血管生成使腫瘤能夠獲得足夠的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，如果沒(méi)有血管生成，原發(fā)腫瘤的生長(zhǎng)不會(huì)超過(guò)12MM3。此外血管生成還在腫瘤轉(zhuǎn)移的起始或終末階段均發(fā)揮著重要作用。此前的一些研究提示EGF通路在乳腺癌、前列腺癌、腎癌等腫瘤的骨轉(zhuǎn)移過(guò)程中起到重要的作用。有研究提示，EGFR在激素非依賴(lài)前列腺癌細(xì)胞PC3中高表達(dá)，并與TGFΑ／EGF形成自泌環(huán)，激活胞內(nèi)酪氨酸激酶TK通路發(fā)揮胞內(nèi)效應(yīng)，參與激素非依賴(lài)前列腺癌的形成。其中，酪氨酸磷酸化是EGFR介導(dǎo)的上海交通大學(xué)碩士學(xué)位論文抗體稀釋液美國(guó)DAK公司其他試劑如DAB顯色試劑盒、EDTA抗原修復(fù)液、PBS粉劑等均有我院病理科提供。213實(shí)驗(yàn)中主要儀器實(shí)驗(yàn)中主要儀器CO2恒溫培養(yǎng)箱日本SANYO公司超凈工作臺(tái)上海上凈凈化設(shè)備廠倒置相差顯微鏡日本OLYMPUS公司電熱恒溫水槽上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司臺(tái)式離心機(jī)德國(guó)EPPENDF公司酶標(biāo)儀美國(guó)THERMO公司超低溫冰箱日本SANYO公司純水機(jī)瑞士MILLIPE公司EPPENDF移液器德國(guó)EPPENDF公司高速低溫離心機(jī)上海市離心機(jī)機(jī)械研究所蝸旋器江蘇海門(mén)市麒麟醫(yī)用儀器廠電子天平上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司游標(biāo)卡尺上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司IX70倒置相差顯微鏡及配備拍照系統(tǒng)日本OLYMPUS公司切片機(jī)美國(guó)LEICA公司烤箱美國(guó)LEICA公司封片機(jī)美國(guó)LEICA公司器皿及耗材，6孔細(xì)胞培養(yǎng)板、96孔細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞計(jì)數(shù)板、蓋玻片、離心管（15ML）、凍存管（2ML），美國(guó)CNING公司。213實(shí)驗(yàn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)動(dòng)物BALBC裸鼠雄性，46周齡，1518G，40只，購(gòu)自上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司（原中國(guó)科學(xué)院上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心），實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證編號(hào)SCXK（滬）20070005。22實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)方法221腺相關(guān)病毒載體的制備腺相關(guān)病毒載體的制備2211質(zhì)粒PRAAVCAGSECEGFP和PRAAVCAGSECHGFKL的構(gòu)建

簡(jiǎn)介：目的艾滋病AIDS是由艾滋病病毒HIV引起的一種傳染病，尚無(wú)法治愈。高效抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療（HAART）是目前治療艾滋病最有效的方法。但HIV的高變異特性和抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物的選擇壓力導(dǎo)致HIV耐藥迅速產(chǎn)生，并成為影響抗病毒治療效果的最主要原因。歐美發(fā)達(dá)國(guó)家接受抗病毒治療患者的HIV耐藥率已超過(guò)60％。我國(guó)于2003年開(kāi)始施行大規(guī)模免費(fèi)抗病毒治療，到2010年10月，全國(guó)已有10萬(wàn)多艾滋病患者接受了HAART。隨著免費(fèi)抗病毒治療的廣泛開(kāi)展，艾滋病患者生存時(shí)間顯著延長(zhǎng)，生存質(zhì)量明顯改善，死亡率顯著下降。日益升高的耐藥率使現(xiàn)有的免費(fèi)抗病毒治療效果下降，更換二線(xiàn)抗病毒治療方案已成為當(dāng)務(wù)之急。國(guó)外有研究報(bào)道更換治療方案前檢測(cè)到大量耐藥變異，但在更換二線(xiàn)抗病毒方案后，不同地區(qū)研究觀測(cè)的治療效果并不一致。而我國(guó)目前也缺少關(guān)于更換治療方案后系統(tǒng)的療效觀察和耐藥研究。隨著我國(guó)免費(fèi)抗病毒治療的廣泛開(kāi)展和治療時(shí)間的不斷延長(zhǎng)，耐藥率逐年增高，更換二線(xiàn)抗病毒治療方案后其治療效果如何一線(xiàn)方案治療失敗后耐藥變異的累積是否會(huì)影響二線(xiàn)抗病毒治療方案的效果隨著二線(xiàn)治療方案的應(yīng)用，是否會(huì)很快出現(xiàn)新的耐藥變異為回答上述問(wèn)題，本研究對(duì)我國(guó)河南省尉氏縣更換二線(xiàn)方案治療的艾滋病患者進(jìn)行了前瞻性隊(duì)列隨訪研究。方法1、研究對(duì)象參照2007版國(guó)家免費(fèi)艾滋病抗病毒藥物治療手冊(cè)中艾滋病病人二線(xiàn)方案入選標(biāo)準(zhǔn)，在我國(guó)河南省尉氏縣于2009年8月招募89例艾滋病患者，其中65例病人符合二線(xiàn)方案入選標(biāo)準(zhǔn)，另外24例病人不符合二線(xiàn)方案入選標(biāo)準(zhǔn)，但病人自愿加入隊(duì)列應(yīng)用二線(xiàn)方案進(jìn)行抗病毒治療，所有患者均簽署了知情同意書(shū)。二線(xiàn)抗病毒治療方案均使用WHO推薦的拉米夫定3TC替諾福韋TDF和諾匹那韋利托那韋克立芝，LPVR，經(jīng)治療6個(gè)月、12個(gè)月后分別進(jìn)行隨訪調(diào)查，并進(jìn)行CD4、病毒載量及耐藥檢測(cè)。2、CD4T淋巴細(xì)胞測(cè)定20ΜLCD4CD8CD3TRITEST試劑加入TRUCOUNT管中，加入50ΜL抗凝血，室溫避光15MIN，加入免洗溶血素450Μ1，室溫避光15MIN，用FACSMMLTISET軟件檢測(cè)并進(jìn)行自動(dòng)分析、計(jì)算CD4、CD8、CD3T淋巴細(xì)胞絕對(duì)值及相應(yīng)比值等。3、病毒載量測(cè)定以1ML血漿采用ROCHE公司COBASAMPLIPREPCOBASTAQMAN自動(dòng)載量?jī)x檢測(cè)病毒載量。4、病毒核酸提取以抗凝140ΜL血漿提取病毒基因組RNA，按照QIAAMPVIRALRNAMINIKIT說(shuō)明書(shū)步驟提取RNA，提取物溶于60ΜL洗脫液中。5、巢氏聚合酶鏈反應(yīng)NESTPCR以外、側(cè)引物對(duì)MAW265′TTGGAAATGTGGAAAGGAAGGAC3′；HXB220282050和RT215′CTGTATTTCTGCTATTAAGTCTTTTGATGGG3′HXB235093539；內(nèi)側(cè)引物對(duì)PRO15′CAGAGCCAACAGCCCCACCA3′；HXB235093539和RT4R5′CTTCTGTATATCATTGACAGTCCAGCT3′HXB235093539，用于擴(kuò)增HIV1POL序列。6、序列分析經(jīng)PCR擴(kuò)增和測(cè)序得到HIV1POL基因的基因序列片段，然后用CONTIG軟件進(jìn)行拼接，用BIOEDIT軟件進(jìn)行序列比對(duì)。用MEGA4軟件的進(jìn)行系統(tǒng)樹(shù)分析，登錄美國(guó)斯坦福大學(xué)HIV耐藥數(shù)據(jù)庫(kù)HIVDBSTANFDEDU在線(xiàn)進(jìn)行HIV耐藥突變情況和耐藥性分析。7、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析用SPSS15統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析；數(shù)據(jù)使用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差及中位數(shù)±95％可信區(qū)間；X2或FISHER檢驗(yàn)分析二線(xiàn)方案病毒學(xué)抑制情況；P＜005為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；LOGISTIC回歸分析二線(xiàn)方案治療12個(gè)月時(shí)影響病毒學(xué)抑制未達(dá)到HIVRNA＜400COPIESML相關(guān)因素。結(jié)果一、研究對(duì)象基本資料本研究換藥前符合二線(xiàn)方案入選標(biāo)準(zhǔn)病人有65例，其中男43612％人，女22328％人，平均年齡453260歲。檢出耐藥病人比例為785％5165，未檢出PI耐藥患者。換藥前一線(xiàn)方案治療平均治療時(shí)間為5481373個(gè)月，使用最多的一線(xiàn)方案是AZTDDINVP，占788％5265。二線(xiàn)方案治療開(kāi)始后，所有病人服藥依從性均＞90％。二線(xiàn)方案治療6個(gè)月時(shí)，隨訪到52人，12個(gè)月時(shí)隨訪到53人。另外24例不符合二線(xiàn)方案入選標(biāo)準(zhǔn)的病人，換藥前一線(xiàn)力案平均治療時(shí)間為556972月，使用最多的一線(xiàn)方案也是AZTDDINVP占696％1624。換藥后6個(gè)月時(shí)隨訪到16人，12個(gè)月時(shí)隨訪到19人。二、換藥后病人治療情況二線(xiàn)方案治療12個(gè)月后，CD4均值上升了7489CELLSMM395％CI2806，12172，病毒載量＜400COPIESML病人比例由換藥前的62％上升到了698％，病毒載量VLLOG均值由換藥前451±1076下降為217±1612，下降了2271OG1095％CI178，277。三、耐藥情況本研究65例病人換藥前檢出耐藥比例是785％5165，二線(xiàn)方案治療6個(gè)月、12個(gè)月時(shí)，病人耐藥比例下降為231％1252和113％653，換藥后耐藥比例較換藥前顯著降低。更換二線(xiàn)方案治療前后均未檢測(cè)到P1耐藥患者。（一）耐藥相關(guān)突變本研究換藥前后均未發(fā)現(xiàn)PI主要耐藥突變，但發(fā)現(xiàn)存在大量的PI次要耐藥相關(guān)突變，包括L10I、V1LIV、A71ATV。換藥前后最常見(jiàn)的NRTI耐藥突變均為T(mén)AMS突變。而與3TC和TDF耐藥相關(guān)的突變M184V和K65R，換藥前有106％7和45％3，治療1年后檢出率分別降為38％2和0。換藥前常見(jiàn)NNRTI耐藥突變依次是K103N、Y181C、V106AM和G190AS，分別占379％、258％、197％和91％，治療后檢出率分別下降為38％、19％、19％和19％。（二）換藥前后藥物耐藥情況1、換藥前后交叉耐藥和多藥耐藥情況入組時(shí)病人藥物交叉耐藥和多藥耐藥嚴(yán)重。換藥前病人對(duì)NRTI耐藥比例為662％4365，對(duì)AZTD4TDDI三種藥物交叉耐藥比例為523％3465。換藥治療6個(gè)月、12個(gè)月時(shí)，對(duì)NRTI耐藥比例分別135％752和94％553，換藥后顯著降低，AZTD4TDDI三種藥物交叉耐藥比例分別為96％552和75％453。換藥前病人對(duì)NNRTI耐藥比例為785％5165，換藥治療6個(gè)月、12個(gè)月時(shí)，對(duì)NNRTI耐藥比例分別為231％1252和113％653，EFVNVP的交叉耐藥率在換藥前后都很高為100％。經(jīng)二線(xiàn)方案治療一年后，對(duì)NRTI和NNRTI多藥耐藥比例由662％下降到94％。2、換藥前后二線(xiàn)方案中3TC和TDF耐藥情況二線(xiàn)方案中主要治療藥物3TC和TDF，換藥前耐藥比例分別為415％2765和508％3365，二線(xiàn)方案治療一年后，兩種藥物耐藥比例降為96％552和77％452。治療一年后，換藥前3TC和TDF交叉耐藥比例也由369％2465降為19％153，并且這些人中875％2124體內(nèi)HIVRNA被有效抑制。四、換藥后影響病人治療效果相關(guān)因素分析二線(xiàn)方案治療12個(gè)月后，隊(duì)列中病人有302％1653病毒載量未能抑制在400COPIESML以下。單變量分析發(fā)現(xiàn)，換藥前病人CD4＜100CELLSMM3和HIV1RNA＞10000COPIESML，與治療后病毒載量未能有效抑制相關(guān)，值分別是51495％CI099，2671和33695％CI066，1721。女性病人病毒學(xué)抑制失敗風(fēng)險(xiǎn)是男性病人的119倍95％CI034，418，年齡＞45歲是病毒學(xué)抑制失敗的危險(xiǎn)因素21195％CI064，695，二線(xiàn)方案僅更換1個(gè)NRTI藥物的患者病毒未被有效抑制的風(fēng)險(xiǎn)要高于更換了2個(gè)NRTI藥物的患者，而應(yīng)用一線(xiàn)抗病毒治療方案時(shí)間＞3年并未影響二線(xiàn)方案的治療效果。五、不符合二線(xiàn)方案入選標(biāo)準(zhǔn)患者換藥后治療情況對(duì)于不符合二線(xiàn)方案入選標(biāo)準(zhǔn)病人，在應(yīng)用二線(xiàn)方案治療6個(gè)月、12個(gè)月時(shí)CD4T細(xì)胞計(jì)數(shù)和病毒載量與換藥前相比均無(wú)顯著性差異。這些病人在換藥前后均未檢出耐藥相關(guān)突變。結(jié)論1、一線(xiàn)抗病毒治療失敗更換二線(xiàn)抗病毒方案的艾滋患者治療一年后，病毒學(xué)和免疫學(xué)治療效果顯著，不符合二線(xiàn)方案入選標(biāo)準(zhǔn)病人治療后無(wú)顯著的療效提升。2、在我國(guó)一線(xiàn)方案治療失敗后的病人中存在嚴(yán)重的多藥耐藥和交叉耐藥，但不會(huì)影響病人二線(xiàn)方案治療效果3、換藥前CD4細(xì)胞計(jì)數(shù)低、病毒載量高的病人，其二線(xiàn)方案治療效果較差。換藥前病人使用一線(xiàn)抗病毒方案時(shí)間＞3年并不會(huì)增加更換二線(xiàn)方案后病毒學(xué)抑制失敗的風(fēng)險(xiǎn)。4、更換二線(xiàn)方案前后均未發(fā)現(xiàn)PI耐藥，但檢出大量蛋白酶抑制劑次要變異，應(yīng)對(duì)更換二線(xiàn)抗病毒治療方案患者進(jìn)行長(zhǎng)期的耐藥監(jiān)測(cè)。

簡(jiǎn)介：上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文輕度認(rèn)知障礙和阿爾茨海默病外周血生化標(biāo)志物的探索研究姓名趙圣杰申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專(zhuān)業(yè)神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師趙永波20110511摘要空間規(guī)劃缺失CSPDCP0007、刺激界限反應(yīng)SBRAPO037、SPDAPO033等畫(huà)鐘實(shí)驗(yàn)的錯(cuò)誤類(lèi)型可以在門(mén)診用于MCI的篩查，特異度和敏感度分別為75％和77％。結(jié)論本實(shí)驗(yàn)采用的神經(jīng)心理學(xué)量表組合可以準(zhǔn)確的鑒別蝴CI，另外APOE基因影響AMCI患者認(rèn)知水平，但是作用的機(jī)制和大小尚不清楚。畫(huà)鐘實(shí)驗(yàn)的錯(cuò)誤類(lèi)型可以用于門(mén)診初步、快速的鑒別MCI患者。第Ⅱ部分研究AMCI和AD炎性因子和血小板中凋亡相關(guān)蛋白變化目的探討AMCI血清中炎性因子是否適合作為生物標(biāo)記物；探討AMCI和AD患者血小板中是否存在A3代謝相關(guān)酶及凋亡相關(guān)蛋白的異常，期望為血小板成為AD和MCI凋亡研究的外周模式提供理論基礎(chǔ)，期望找到適合AD早期診斷的生物化學(xué)標(biāo)記物。方法150例正常老年對(duì)照和150例AMCI患者在進(jìn)行了神經(jīng)心理學(xué)量表評(píng)分后，采用ELISA方法進(jìn)行血清IL6、IL一10、IFNY、TNF。C的測(cè)定，分析AMCI和正常對(duì)照之間是否存在炎性因子水平的差異。并分析APOE基因、IL6基因、N師A基因和IFNY基因?qū)ν庵苎貉仔砸蜃铀降挠绊懀治鲅仔砸蜃优c神經(jīng)心理學(xué)量表評(píng)分之間的相關(guān)性。從抗凝血中提取血小板，用WESTERNBLOT的方法測(cè)量50例正常老年對(duì)照、50例AMCI和50例AD患者血小板BACEL和ADAML0，觀察血小板中是否存在A3代謝相關(guān)酶的表達(dá)異常。用