人博卡病毒在健康獻漿人群中的基因組和血清學抗體流行情況研究.pdf

1、碩士學位論文人博卡病毒在健康獻漿人群中的基因組和血清學抗體流行情況研究所院：姓名：指導教師：導師小組：學科專業(yè)：研究方向：完成日期：輸血研究所李紅學李武平教授李武平陳利民何苗教授病原生物學人博卡病毒的分子流行病學2014年5月中國醫(yī)學科學院北京協和醫(yī)學院碩士研究生學位論文人博卡病毒在健康獻漿人群中的基因組和血清學抗體流行情況研究摘要目的了解中國健康獻漿人群、原料血漿和血液制品中人博卡病毒(Humanbocavims，HBoV)的基因組和

2、血清學抗體的流行情況以及遺傳多樣性特征。方法基于ABI7900HTFastRealTimePCRSystem平臺，建立檢測HBoVDNA的特異性、敏感性RealTimePCR(SYBRGreen法)方法。并根據此方法對從血液制品公司收集到的健康獻漿人群的單人份血漿(不同月份共6096份)以及本實驗室中保存的原料血漿(共241份)和血液制品[共326份，包含白蛋白65份，靜脈注射丙種球蛋白(intravenousimmunoglobuli

3、n，IVIG)197份，凝血因子VIII(factorVIII，Fvm)47份，纖維蛋白原(fibrinogen，Fg)12份，蛋白酶原復合物(prothrombincomplexconcentrate，PCC)5份1進行HBoVDNA的篩查，并用NestedPCR的方法進行確認。巢式確認陽性后樣本進行820bp片段的巢式PCR擴增、測序并進行遺傳多樣性分析。同時，對209份血漿樣品(根據HBoV病毒載量分為3組：組1，病毒載量104c

4、opies／mL；組2，基因組陽性但病毒載量104copies／mL；組3，基因組陰性)分別進行血清學抗HBoVIgG和IgM抗體的篩查。結果HBoV在健康獻漿人群中的基因組流行率為906％，病毒載量范圍為501102_302x106copies／mL。241份原料血漿中有43份有HBoVDNA檢出，檢出率為1784％，其中3份病毒載量高于104copies／mL。326份血液制品中44份為HBoVDNA陽性，陽性率為1350％，其中2

5、份白蛋白(308％，2／65)、14份IVIG(711％，14／197)、26份FⅧ(5532％，26／47)和2份Fg(1667％，2／12)中HBoVDNA陽性，5份PCC中未檢出HBoVDNA。不同病毒載量血漿中血清學抗體陽性率分析表明，HBoV核酸檢測陽性血漿中抗HBoVIgG抗體檢出率高于HBoV核酸陰性血漿，HBoV病毒高載量組血漿中抗HBoVIgM抗體檢出率高于HBoV陰性組。遺傳多樣性分析顯示在中國被檢地區(qū)健康獻漿人群中