Aurora A對子宮內(nèi)膜癌轉(zhuǎn)移能力及化療藥物抵抗性的影響及機制研究.pdf

1、目的：
　　子宮內(nèi)膜癌(Endometrial Cancer，EMC)為女性生殖系統(tǒng)常見的三大惡性腫瘤之一，局部復發(fā)、遠處轉(zhuǎn)移及化療藥物不敏感與臨床不良預后密切相關。因此，對子宮內(nèi)膜癌侵襲轉(zhuǎn)移及耐藥性的研究至關重要。
　　AuroraA屬于絲/蘇氨酸激酶家族成員，參與調(diào)控細胞周期進展與有絲分裂。其基因擴增及蛋白過表達常見于包括婦科腫瘤在內(nèi)的多種實體腫瘤，已成為腫瘤治療的新靶點，眾多AuroraA小分子抑制劑已進入臨床試驗。既

2、往研究表明，子宮內(nèi)膜癌中異常增高的AuroraA可能與腫瘤的級別、病理類型等具有相關性;然而，其具體的調(diào)控機制尚不清楚。
　　本研究通過臨床樣本調(diào)查、體外細胞功能實驗及體外分子機制研究三個方面明確AuroraA表達與子宮內(nèi)膜癌的相關性;闡述AuroraA對子宮內(nèi)膜癌細胞遷移能力及耐藥性的影響;并探究Aurora A通過AKT/MMP-2，MMP-9通路調(diào)控子宮內(nèi)膜癌細胞遷移能力及化療藥物抵抗性的分子機制，為評估該通路相關分子及其抑

3、制劑是否可以作為臨床診治的新靶點提供科學依據(jù)。
　　方法：
　　1.通過qRT-PCR、Western Blot及免疫組化檢測子宮內(nèi)膜癌及正常內(nèi)膜組織中Aurora A的mRNA及蛋白水平;分析Aurora A的表達與患者臨床病理特征的相關性。
　　2.通過CCK-8、Migration Assay方法檢測外源性高表達或內(nèi)源性抑制AuroraA后2種子宮內(nèi)膜癌細胞系（高分化子宮內(nèi)膜癌細胞系Ishikawa及中分化子宮內(nèi)

4、膜癌細胞系HEC-1B）的遷移能力及其對化療藥物紫杉醇、順鉑抵抗性的變化。
　　3.通過qRT-PCR、Western Blot、明膠酶譜及細胞功能逆轉(zhuǎn)實驗(AKT活性抑制劑wortmannin，MMP-2/9活性抑制劑SB-3CT)探究AKT/MMP-2，MMP-9信號通路在Aurora A介導的腫瘤進展中的調(diào)控機制。
　　結(jié)果：
　　1.在人子宮內(nèi)膜癌組織中，AuroraA蛋白水平顯著升高，其表達與患者臨床病理特征

5、具有相關性。
　　2.腺病毒外源性高表達Aurora A能夠促進子宮內(nèi)膜癌細胞系Ishikawa與HEC-1B的遷移能力，并增加其對紫杉醇、順鉑的抵抗性;同時，Aurora A特異性抑制劑MLN8237能夠抑制Ishikawa與HEC-1B的遷移能力，并降低其藥物抵抗性。
　　3.Aurora A能夠促進MMP-2，MMP-9 mRNA的表達，并增加MMP-2/TIMP-2及MMP-9/TIMP-1 mRNA表達比值;同時，

6、Aurora A能夠促進MMP-2，MMP-9蛋白表達。
　　4.AuroraA通過磷酸化AKT(Ser473)(Thr308)位點調(diào)控MMP-2，MMP-9的表達;AKT活性抑制劑wortmannin能夠有效逆轉(zhuǎn)AuroraA介導的子宮內(nèi)膜癌細胞遷移能力增加和化療藥物不敏感;MMP-2/9活性抑制劑SB-3CT能夠抑制Aurora A介導的化療藥物不敏感。
　　結(jié)論：
　　本研究證實絲/蘇氨酸激酶Aurora A在子